標準解讀

《GB/T 34756-2017 豬輪狀病毒病 病毒RT-PCR檢測方法》是一項國家標準，旨在提供一種通過逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）技術來檢測豬輪狀病毒的方法。該標準適用于豬只及其相關樣品中豬輪狀病毒核酸的定性檢測。

根據文件內容，首先定義了術語和縮略語，明確了“豬輪狀病毒”、“逆轉錄聚合酶鏈反應”等專業詞匯的具體含義。接著，詳細描述了進行RT-PCR檢測所需的主要試劑與材料，包括但不限于引物、探針、逆轉錄酶、DNA聚合酶以及其他必要的化學試劑，并對這些物質的質量要求進行了規定。

標準還列舉了實驗操作步驟，從樣本采集到RNA提取，再到cDNA合成及后續PCR擴增過程都有明確指導。其中特別強調了實驗室安全防護措施的重要性以及避免交叉污染的技術手段。此外，對于如何設置陽性對照、陰性對照以確保實驗結果準確性也有具體說明。


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....

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  • 現行
  • 正在執行有效
  • 2017-11-01 頒布
  • 2018-05-01 實施
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文檔簡介

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T34756—2017

豬輪狀病毒病病毒RT-PCR檢測方法

Porcinerotavirusdisease—RT-PCRfordetectingvirusacid

2017-11-01發布2018-05-01實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

豬輪狀病毒病病毒RT-PCR檢測方法

GB/T34756—2017

*

中國標準出版社出版發行

北京市朝陽區和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區三里河北街號

16(100045)

網址

:

服務熱線

:400-168-0010

年月第一版

201711

*

書號

:155066·1-57537

版權專有侵權必究

GB/T34756—2017

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農業部提出

。

本標準由全國動物衛生標準化技術委員會歸口

(SAT/TC181)。

本標準起草單位東北農業大學中國動物衛生與流行病學中心河南牧業經濟學院

:、、。

本標準起草人喬薪瑗邵衛星魏榮崔文唐麗杰李一經姜艷平孫映雪李衛華徐耀輝

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T34756—2017

豬輪狀病毒病病毒RT-PCR檢測方法

1范圍

本標準規定了豬輪狀病毒檢測方法的試劑儀器設備操作程序

RT-PCR、、。

本標準適用于豬臨床樣品新鮮糞便和小腸及細胞培養物中豬輪狀病毒核酸的檢測

()。

2縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

鳥類病毒反轉錄酶

AMV:RNA(avianmyeloblastosisvirus)

堿基對

bp:(basepair)

焦碳酸二乙酯

DEPC:(diethypyrocarbonate)

脫氧核糖核酸

DNA:(deoxyribonucleicacid)

脫氧核糖核苷三磷酸

dNTPs:(deoxyribonucleosidetriphosphates)

磷酸鹽緩沖液

PBS:(phosphate-bufferedsalinebuffer)

聚合酶鏈式反應

PCR:(polymerasechainreaction)

核糖核酸

RNA:(ribonucleicacid)

酶抑制劑

RRI:RNA(RNaseribonucleaseinhibitor)

反轉錄

RT:(reversetranscriptase)

反轉錄聚合酶鏈式反應

RT-PCR:-(reversetranscriptase-polymerasechainreaction)

Taq酶Taq聚合酶Taq

:DNA(DNApolymerase)

3試劑

除另有規定外所用試劑應為分析純提取病毒所用試劑應使用無酶的容器進行

,。RNARNA

分裝

。

31氯仿常溫保存

.:。

32異丙醇

.。

33乙醇

.75%。

34二乙基焦磷酰胺

.(DEPC)。

35Taq酶

.。

36

.AMV。

37分子量標準

.DNA(DL2000bp)。

38電泳緩沖液配制見

.(TAE)(A.1)。

39瓊脂糖配制見

.1.5%(A.3)。

310豬輪狀病毒陽性樣品及陰性樣品

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