標準解讀

《GB/T 31793-2015 油菜莖基潰瘍病菌檢疫鑒定方法》是一項國家標準，主要針對油菜莖基潰瘍病菌（Leptosphaeria maculans）的檢測與鑒定提供指導。該標準適用于進出口植物及其產品的檢驗檢疫、科研單位以及相關機構對油菜莖基潰瘍病菌進行的實驗室檢測工作。

根據標準內容，首先明確了適用范圍，并介紹了所需材料和試劑，包括但不限于病害樣本采集工具、培養基等實驗用品。接著詳細描述了樣品處理步驟，如如何正確地從疑似感染植株上采取樣本，以及如何制備適合后續分析使用的樣本。

對于病原菌的分離與純化過程，標準給出了具體的操作指南，涵蓋了接種方法、培養條件及觀察時間等關鍵點。此外，還列舉了幾種有效的病原菌鑒定技術，比如形態學特征識別、分子生物學手段（PCR擴增特定DNA片段）等，以確保能夠準確無誤地鑒別出目標病原體。


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....

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  • 2015-07-03 頒布
  • 2015-11-27 實施
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GB/T 31793-2015油菜莖基潰瘍病菌檢疫鑒定方法_第1頁
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文檔簡介

ICS65020010

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T31793—2015

油菜莖基潰瘍病菌檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofLeptosphaeriamaculansFuckelCes.etDeNot.

()

2015-07-03發布2015-11-27實施

中華人民共和國國家質量監督檢驗檢疫總局發布

中國國家標準化管理委員會

GB/T31793—2015

前言

本標準按照給出的規則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位中國檢驗檢疫科學研究院中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫局

:、。

本標準主要起草人吳品珊易建平周國梁杜洪忠

:、、、。

Ⅰ

GB/T31793—2015

油菜莖基潰瘍病菌檢疫鑒定方法

1范圍

本標準規定了油菜莖基潰瘍病菌的檢疫鑒定方法

。

本標準適用于油菜和油菜莖基潰瘍病菌其他十字花科寄主種子和植株中油菜莖基潰瘍病菌的檢疫

和鑒定

。

2儀器和用具

21儀器

.

電子天平感量生物顯微鏡體視顯微鏡高速冷凍離心機純水儀超凈工作臺高壓滅菌

(0.01g)、、、、、、

鍋制冰機儀凝膠成像系統電泳儀實時熒光儀培養箱冰箱

、、PCR、、、PCR、、。

22用具

.

燒杯三角瓶量筒培養皿酒精燈鑷子剪刀解剖刀接種針載玻片蓋玻片研缽移液器移

、、、、、、、、、、、、、

液器吸頭離心管液氮罐孔徑和的網篩

、、、2.5mm1.5mm。

3試劑和培養基

31試劑

.

次氯酸鈉瓊脂粉馬鈴薯葡萄糖乳酸瓊脂糖無菌雙蒸水液氮蛋白胨磷酸二

1.0%(NaClO),,,,,,,,,

氫鉀硫酸鎂鏈霉素新霉素五氯硝基苯氯四環素利福平

,,,,,,,Tris-HCl,MgCl2,HCl,EDTA,NaOH,

無水乙醇苯酚溴化乙錠三氯甲烷

NaOAc,KCl,Tris,CTAB,TAE,(ethanol),(phenol),(EB),(chloro-

異丙醇異戊醇蛋白酶Taq聚合酶相對

form),(isopropanol),(isoamylalcohol),K,DNA,dNTP,DNA

分子質量標準物特異性引物和實時熒光特異性引物及探針

,PCRPCR。

32培養基

.

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基酸性馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基具體配方參見附錄

(PDA),(APDA)。A。

4檢疫鑒定方法

41種子檢測

.

未帶有種衣劑的種子解剖鏡下挑取皺縮干癟變色畸形殘缺或有霉變的種子帶有種

,、、、、1g~2g;

衣劑的種子先用自來水浸泡洗去種衣劑或用紗布包裹浸泡搓洗種子自來水沖洗去種衣劑待風干后

,,,,

挑取異常種子做分離培養

,。

商用油菜籽樣品取用孔徑和的網篩過篩孔徑篩上物多為豆莢和

1kg,2.5mm1.5mm,2.5mm

莖等植株殘體孔徑篩下物多為碎屑和細小油菜籽篩上物和篩下物混勻后取制

,1.5mm。,

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