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項目二α—淀粉酶的制備及應用班級：學號：姓名：指導老師：淀粉酶屬于水解酶類，是催化淀粉、糖原、糊精中糖苷鍵水解的一類酶的統稱。此類酶廣泛存在于植物和微生物中。根據對淀粉的作用方式不同，可將淀粉酶分為α—淀粉酶、β—淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、脫支酶。α—淀粉酶是一種內切酶，其相對分子量約50000左右作用于淀粉時，可從淀粉分子內部隨機切開α—1，4糖苷鍵，不能切開α—1，6糖苷鍵以及與α—1，6糖苷鍵相連的α—1，4糖苷鍵，但能越過支點切開內部的α—1，4糖苷鍵。其水解產物中除含葡萄糖、麥芽糖外還含有具有α—1，6糖苷鍵的極限糊精含α—1，6糖苷鍵的具葡萄糖殘基的低聚糖。α—淀粉酶α—淀粉酶廣泛分布于動物、植物及微生物。微生物的酶幾乎都是分泌性的。此酶以Ca2+為必需因子并作為穩定因子，既作用于直鏈淀粉，亦作用于支鏈淀粉，無差別地切斷α—1，4鏈。因此，其特征是引起底物溶液粘度的急劇下降和碘反應的消失，最終產物在分解直鏈淀粉時以麥芽糖為主，此外，還有麥芽三糖及少量葡萄糖。另一方面在分解支鏈淀粉時，除麥芽糖、葡萄糖外，還生成分支部分具有α—1，6鍵的α—極限糊精。一般分解限度以葡萄糖為準是35-50％，但在細菌的淀粉酶中，亦有呈現高達70％分解限度的。α—淀粉酶分布α—淀粉酶通常在PH5.5—8.0時穩定，在PH4.0以下易失活其作用的最適PH為5.0—6.0，但不同來源的酶其最適PH值差別很大。動物的α—淀粉酶在氮離子存在時其最適作用PH為7.0，高等植物在PH3.6以下時失活，耐酸性的α—淀粉酶最適作用PH為4.0左右，在PH2.5—6.5穩定；非耐酸的α—淀粉酶最適PH為6.5左右，在PH5.5—9.5穩定。1.PH值對酶活性的影響溫度對酶活性有很大影響，溫度升高，酶的反應速度就增加，一般每升高十攝氏度，反應速度可增加2—3倍，但是大多數酶都是蛋白質，溫度過高則可導致蛋白質變質，從而使酶失活。在一定條件下，在某一溫度時酶的反應速度最大。這使得反應速度是最適合反應溫度。2.溫度對酶活性的影響1.菌種：枯草芽孢桿菌JD—32生產法2.儀器：培養皿、試管、發酵罐、滅菌鍋、振蕩培養箱、高速冷凍離心機實驗器材工藝流程1.培養基的制備與滅菌發酵培養基：蛋白胨5g，酵母膏2.5g，葡萄糖0.5g，可溶性淀粉2.5g，KH2PO41g，MgSO4.7H2O0.25g，CaCl2.2H2O0.1g,H2O500ml，PH7.0。分裝與100ml錐形瓶中，每瓶50ml，121℃滅菌20min。實驗步驟將菌種接種于培養基斜面，35℃培養三天，然后轉接到搖瓶種子培養基，搖瓶培養一定時間，當菌體進入對數生長期時，以0.5％接種量接入固體培養基，在厚層通風制曲箱內，通風保持37—42℃，培養48小時出去風干。2.接種與產酶培養麩曲用1％食鹽水3—4倍浸泡，3

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