實(shí)驗(yàn)細(xì)菌的接種及分離培養(yǎng)第一頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日目的要求1、學(xué)習(xí)和掌握細(xì)菌分離與培養(yǎng)的各種基本技術(shù)；2、進(jìn)一步熟悉和掌握無(wú)菌操作技術(shù)。第二頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)材料標(biāo)本和菌種：咽拭子、葡萄球菌培養(yǎng)物、變形桿菌培養(yǎng)物；實(shí)驗(yàn)器材：接種環(huán)、接種針、酒精燈；培養(yǎng)基：普通瓊脂平板、試管斜面、液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基；第三頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日常用的有接種針、接種環(huán)、接種鉤、接種圈、接種鏟或接種鋤、玻璃涂棒等（見(jiàn)圖－6）。圖－6接種工具第四頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日細(xì)菌接種的基本程序滅菌接種環(huán)沾取標(biāo)本接種滅菌接種環(huán)殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染標(biāo)本殺滅接種環(huán)沾染的細(xì)菌，以免污染環(huán)境第五頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日（一）細(xì)菌的分離方法培養(yǎng)基：固體平板培養(yǎng)基分離方法：劃線分離法意義：該法主要是借助劃線而將混雜的細(xì)菌在瓊脂表面分散開(kāi)，使單個(gè)細(xì)菌能固定在某一點(diǎn)，生長(zhǎng)繁殖后形成單個(gè)菌落，以達(dá)到分離純種的目的。細(xì)菌的分離培養(yǎng)方法第六頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日微生物的分離—平板劃線法1.分區(qū)劃線法：2.連續(xù)劃線法：第七頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日微生物的分離—平板劃線法第八頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日第九頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日分區(qū)劃線法第一區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第三區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第十頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日連續(xù)劃線法第十一頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日（二）細(xì)菌的接種法當(dāng)細(xì)菌分離成純種后，常需要接種到相關(guān)的培養(yǎng)基中，以測(cè)試其各種生物學(xué)性狀。一般可用斜面、半固體、液體培養(yǎng)基來(lái)檢驗(yàn)細(xì)菌的培養(yǎng)特性，相應(yīng)培養(yǎng)基的接種方法有三種。第十二頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日斜面接種法培養(yǎng)基：斜面固體培養(yǎng)基；接種方法：斜面培養(yǎng)基接種法；用途：擴(kuò)增細(xì)菌、保存菌種；或用于觀察其某些生化特性。第十三頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日瓊脂斜面培養(yǎng)基接種法第十四頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日穿刺接種半固體培養(yǎng)基：接種方法：穿刺接種法。用接種針垂直地穿入培養(yǎng)基中心至底部然后沿著原接種線將針拔出用途：檢驗(yàn)細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)性或觀察細(xì)菌的生化反應(yīng)。第十五頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日液體培養(yǎng)基接種法培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基：接種方法：液體接種法從斜面菌種接入液體培養(yǎng)液從液體培養(yǎng)液接入液體培養(yǎng)液用途：擴(kuò)增細(xì)菌，用于觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)特性或測(cè)定其生化特性。第十六頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日細(xì)菌培養(yǎng)法一般培養(yǎng)（需氧培養(yǎng)）：★培養(yǎng)溫度：37℃（采用恒溫培養(yǎng)箱）★培養(yǎng)時(shí)間：18～24h二氧化碳培養(yǎng)法：燭缸法、二氧化碳培養(yǎng)箱厭氧培養(yǎng)法：厭氧培養(yǎng)箱、厭氧袋、厭氧罐、皰肉培養(yǎng)法、硫乙醇酸鹽法等第十七頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象菌落：★定義：指單個(gè)細(xì)菌在平板培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖，形成單一肉眼可見(jiàn)的細(xì)菌集團(tuán)。★菌落特征：大小、形狀、邊緣、顏色、表面、透明度、濕潤(rùn)度、黏度、溶血性★菌落類型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）菌苔：指多個(gè)菌落融合在一起形成的細(xì)菌堆積物。第十八頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日菌落第十九頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日菌落與菌苔第二十頁(yè)，共二十二頁(yè)，2022年，8月28日細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象混濁沉淀：多見(jiàn)于