標準解讀

GB/T 17999.2-1999是一項中國國家標準,全稱為《SPF雞血清中和試驗》。該標準規定了使用SPF(無特定病原體)雞進行血清中和試驗的方法,旨在檢測抗病毒抗體的存在及其滴度,評估疫苗效果或研究動物對特定病毒的免疫反應。以下是該標準的主要內容概覽:

標準適用范圍

本標準適用于評價禽類疫苗效力及監測動物群體中針對特定病毒的免疫狀態,通過測定SPF雞血清中和病毒的能力來實現。

術語定義

  • SPF雞:指無特定病原體的雞,用于確保實驗結果的準確性和可重復性。
  • 血清中和試驗:一種生物測定方法,通過測定病毒與特異性抗體在體外反應后失去感染力的能力,來評估血清中的中和抗體水平。

試驗材料與試劑

  • 規定了所需SPF雞的來源、飼養條件及血清采集要求。
  • 列出了用于試驗的標準病毒株、細胞培養條件、維持液及稀釋液的具體要求。

試驗步驟

  1. 病毒準備:詳細說明了病毒的增殖、收獲、滅活及滴定過程。
  2. 血清準備:包括血清的收集、處理及稀釋方法。
  3. 中和反應:描述了將病毒與不同稀釋度的血清預混合,然后加入敏感細胞培養的具體操作步驟。
  4. 觀察與判定:規定了觀察細胞病變效應(CPE)的時間點及判定標準,以確定血清的中和效價。

結果判定與計算

  • 介紹了如何根據細胞培養的CPE情況,通過計算血清的中和指數或中和滴度(如50%中和滴度,NT50)來評價血清的中和能力。

精密度與準確度

  • 提供了重復性與再現性的要求及評估方法,確保不同實驗室間結果的一致性。

試驗報告

  • 要求記錄詳細的試驗條件、所用材料、操作步驟、觀察結果及最終結論,確保試驗的可追溯性。

注意事項

  • 強調了生物安全操作的重要性,以及在整個試驗過程中需遵循的無菌操作規范。

該標準為SPF雞血清中和試驗提供了一套標準化流程,確保了實驗結果的可靠性和可比性,是獸醫研究、疫苗開發及動物疾病防控領域的重要參考依據。


如需獲取更多詳盡信息,請直接參考下方經官方授權發布的權威標準文檔。

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  • 被代替
  • 已被新標準代替,建議下載現行標準GB/T 17999.3-2008
  • 1999-11-10 頒布
  • 2000-04-01 實施
?正版授權
GB/T 17999.2-1999SPF雞血清中和試驗_第1頁
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GB/T 17999.2-1999SPF雞血清中和試驗-免費下載試讀頁

文檔簡介

TC5.65.020.30B41中華人民共和國國家標準GB/T17999.2-1999SPF雞血清中和試驗SPFchicken-Serumneutralizationtest1999-11-10發布2000-04-01實施國家質量技術監督局發布

GB/T17999.2-1999前本標準參照美國SPAFAS公司的血清中和試驗(SN)操作規程編制而成。SPF雞微生物學質量控制國家系列標準,包括SPF雞微生物學監測總則和9種SPF雞微生物學檢測方法。本標準為《SPF雞血清中和試驗》。SPF雞微生物學檢測方法還包括以下部分:GB/T17999.1-1999SPF雞紅細胞凝集抑制試驗;GB/T17999.3—1999SPF雞血清平板凝集試驗:GB/T17999.4-1999SPF雞瓊脂擴散試驗:GB/T17999.5—1999SPF雞酶聯免疫吸附試驗;GB/T17999.6—1999SPF雞旺敏感試驗;GB/T17999.7—1999SPF雞雞白喇沙門氏菌檢驗;GB/T17999.8—1999SPF雞試管凝集試驗;GB/T17999.9—1999SPF雞間接免疫熒光試驗本標準由中華人民共和國農業部、國家科學技術部提出。本標準由農業部畜牧獸醫司歸口本標準起草單位:農業部實驗動物研究中心、山東省農科院家禽研究所本標準主要起草人:趙立紅、陳德威、張秀美、秦卓明

中華人民共和國國家標準GB/T17999.2-1999SPF雞血清中和試驗SPFchicken--Serumneutralizationtest1范圍本標準規定了血清中和試驗所用試劑、材料.操作程序及結果判定等本標準適用于SPF雞感染以下病毒后的中和抗體的監測:禽腦脊髓炎病毒(AvianEncephalomyelitisVirus)、傳染性支氣管炎病毒(InfectiousBronchitisVirus)、傳染性喉氣管炎病毒(In-fectiousLaryngotracheitisVirus)、傳染性法氏襄病病毒(InfectiousBursalDiseaseVirus)。2原理中和試驗系指有生物活性的病毒與相應的抗體結合后,可失去原有的生物活性的中和反應。中和反應不僅有高度特異性.且具有嚴格的量的關系。因此可用中和試驗鑒定病毒.也可用于相應抗體的定量檢測3試劑和器材3.1試劑3.1.1蛋白際磷酸肉湯、3.1.2青霉素/鏈霉素(雙抗)液3.1.33%碘溶液。3.1.4SPF蛋。3.2器材3.2.1蛋鉆(打孔器)3.2.26針頭。3.2.37*針頭。3.2.4混合器3.2.5照蛋器、3.2.6常規實驗設備4操作程序4.1試驗準備4.1.1血清樣品處理被檢血清和陽性對照血清經56C30min~45min滅活,保存于-20C條件下備用4.1.2SPF蛋準備4.1.2.1共需12枚蛋4.1.2.2照蛋檢查胚體活力.試驗只用健康胚4.1.2.3根據

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