實驗九醬油中氨基酸總量的測定

—甲醛法（微型滴定）實驗目的實驗原理實驗步驟注意事項儀器試劑問題討論數據處理實驗目的1.了解醬油的用途及其制備。2.掌握醬油中氨基酸含量測定的原理和方法。3.學會微型滴定操作。4.掌握移液管和容量瓶的使用。實驗原理氨基酸是一類兩性物質，在溶液中以偶極離子的形式存在，不能用直接法滴定氨基酸上的羧基。

氨基與甲醛加成后，由于羥基為吸電子基團，氮原子上電子云密度顯著降低，消弱了它接受質子的能力，使氨基的堿性消失，則可用強堿如NaOH來滴定氨基酸的羧基，從而測定醬油中氨基酸的總量。儀器與試劑1.儀器微型滴定管（3mL）、容量瓶（100mL）、移

液管（5mL、10mL）、錐形瓶（25mL）、燒

杯、電子天平（0.01g）、抽濾裝置等。2.試劑醬油、HCHO（18%）、NaOH(約0.1mol·L-1)、

活性炭、酚酞指示劑（0.04%醇溶液）、濾紙等

實驗步驟醬油脫色減壓過濾微型滴定定容100mL用移液管取10.00mL醬油，加入4g活性炭，加熱煮沸，脫色（攪拌）10min。減壓過濾墊2層濾紙，傾注法過濾，洗滌時每次用水5mL，洗2-3次。醬油脫色定容將濾液轉移至容量瓶中，并洗滌抽濾瓶2-3次，定容至100mL。

固液分離技術——減壓過濾

容量瓶、比色管的使用——定容操作微型滴定從容量瓶中吸取5.000mL醬油稀釋溶液，加3d酚酞，用NaOH滴定多余的酸.再加入中性甲醛4mL（18%），放置1min后，用NaOH滴定，終點顏色為微紅色。主要操作1.移液操作

(1)移液管準備：自來水清洗三次，蒸餾水潤洗3次，管壁外的水用濾紙擦干，管內的水用洗耳球吹干。移取溶液時，再用待取液潤洗3次。

(2)取液：右手拿移液管，左手拿洗耳球，將溶液吸至刻度線以上，食指封口。

(3)放液：減輕食指壓力，緩慢將溶液放至刻度處，將移液管口與承接容器輕靠，移液管豎直，承接容器傾斜，將溶液緩慢放至承接容器中（半滴處理）。2.定容操作

檢漏—洗滌—無損轉移—直立混勻—定容(1)檢漏：容量瓶裝滿水，倒置、靜置1min。(2)洗滌：自來水洗三次，蒸餾水潤洗三次。(3)無損轉移：將溶液無損轉移至容量瓶中。(4)直立混勻：2/3刻度處，不蓋容量瓶蓋子搖勻。(5)定容：加入蒸餾水至刻度線，搖勻。3.微型滴定操作

微型滴定管的使用與酸堿滴定管相似(1)洗滌時類似移液管。

(2)插入塑料尖嘴以減少半滴誤差，

尖嘴可重復使用。

(3)讀數時3位小數。

項目IIIIII中和醬油中其它酸NaOH滴定的終體積Ve/mLNaOH滴定的初體積V0/mLNaOH中和酸體積V/mL氨基酸滴定NaOH滴定的終體積Ve/mLNaOH滴定的初體積V0/mLNaOH滴定氨基酸的體積V/mL氨態氮含量（g·100mL-1）平均值（g·100mL-1）偏差相對平均偏差數據處理注意事項1.抽濾瓶洗滌干凈，抽濾時墊2層濾紙。2.洗滌時少量多次，每次用水5mL。3.用小燒杯取NaOH溶液。4.甲醛禁止敞口放置，滴一份加一份。5.微型滴定管的讀數。6.移液管和容量瓶的使用。問題討論1.實驗所用中性甲醛為什么呈微紅色？

答：甲醛中常含有微量甲酸，應預先以酚酞為指示劑，用NaOH溶液中和至溶液呈微紅色。2.NaOH為非基準試劑，采用什