哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析第四章細菌的遺傳分析哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析1.

F'因子

阿德伯格(Adelberg)和伯恩斯(Burns)[1959]：F因子偶爾在環出時不夠準確，會攜帶出染色體上的一些基因，這種因子稱為F'因子。

F'因子攜帶染色體的節段大小：從一個標準基因到半個細菌染色體。(六)、F'

因子與性導哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析⑴.

F'因子轉移基因頻率極高，如同F因子轉移頻率；⑵.F'因子攜帶與細菌染色體一樣的同源區段，自然整合率極高，并且整合在一定的座位上，而正常F因子可在不同座位整合。(3).整合過程可逆，即可通過環出，完整的F因子重新離開染色體。F'因子的特點：哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析性導：指接合時由F'因子所攜帶的外源DNA整合到細菌染色體的過程。2.

性導哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析雅各布(Jacob)和阿德伯格(Adelberg)發現：特殊的Hfr菌株能把lac+

等位基因高頻率地轉移到F-lac-受體中(lac基因位于遠端，中斷雜交實驗中只有1/1000重組率)；原因：由F'攜帶lac+

基因進入受體后可在lac位點上形成部分二倍體F'

lac+/lac-。2.

性導哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析性導在大腸桿菌遺傳研究中的作用：①.分離出大量F'因子（每個F'因子攜帶有不同大腸桿菌基因）è

利用不同基因在一起的并發性導的頻率來作圖；②.性導形成的部分二倍體可用作互補測驗

è

確定兩個突變類型是否屬于同一個基因。③.通過性導產生部分二倍體è

確定等位基因的顯隱性關系；哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析接合哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析四、E.coli的轉化哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析(一)、轉化現象的發現概念：某些細菌通過其細胞膜攝取周圍供體的染色體片段，將此外源DNA片段通過重組整合到自己染色體的過程。1928年，格里菲斯（GriffithF.）在肺炎雙球菌中發現轉化現象。1944年，艾弗里（AveryO.T.）進行肺炎雙球菌轉化試驗；證實遺傳物質是DNA；轉化是細菌交換基因的方法之一。哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析1.受體細胞處于感受態

感受態：指細菌能夠從周圍環境吸收DNA分子的生理狀態；2.供體DNA與受體細胞結合(可逆)結合發生在受體細胞特定部位(結合點)；對供體DNA片段有一定要求(不大于20000個核苷酸對）；3.DNA攝取(不可逆)當細菌結合點飽和之后，細菌開始攝取外源DNA；一條DNA單鏈進入細胞，另一條鏈在膜上降解；(二)、轉化過程哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析5.整合(重組)4.聯會

同源位點配對，親緣關系越遠，聯會越機率小、轉化的可能性越小。

是指單鏈的轉化DNA與受體DNA對應位點的置換穩定地進入到受體DNA。對同源DNA具有特異性。異源DNA，視親緣關系遠近也可發生不同頻率整合。哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析(三)、轉化作圖萊德伯格等用枯草桿菌進行轉化和重組試驗：

DNA片段與受體染色體重組，緊密連鎖的兩個基因有較多的機會同時整合到受體染色體中。哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析單交換時，染色體開環易降解，故不存在單交換類型；只有雙交換和偶數的多交換才有效。哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析五、E.coli

的轉導哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析萊德伯格與津德（1951）：2.轉導的發現兩個沙門氏菌的營養缺陷型進行雜交(一)、轉導的發現

1.概念：指以噬菌體為媒介進行的細菌遺傳物質重組。哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析產生上述結果的原因:

③.是否屬于回復突變?高頻率出現不可能是回復突變。①.是否屬于接合?戴維斯U型管試驗(防止細胞直接接觸)è

也獲得野生型重組體，排除由于接合或性導而產生基因重組可能性。②.是否屬于轉化?結果表現為不受DNA酶的影響，排除了由于DNA片斷通過濾片經轉化實現基因重組可能性。哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析唯一可能的結論是：這種重組通過一種過濾性因子實現。這種過濾性因子稱為FA，不受DNA酶的影響。后來的研究表明：FA為噬菌體P22（溶源性）。哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析具體過程如下：（1）噬菌體侵染細菌。（2）噬菌體DNA破壞細菌染色體并合成自己DNA與外殼。（3）新噬菌體包裝：偶爾將細菌染色體片段也包裝進去成為“假噬菌體”并和真噬菌體一起釋放出來。（4）“假噬菌體”和真噬菌體一樣可再侵染細菌，其中“假噬菌體”侵染時，就將外來的細菌基因注入，經過基因重組改變遺傳性狀，完成轉導的過程。3.轉導的機制哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析(二)、普遍性轉導與作圖1.特征：可隨機轉導細菌染色體組的任何部分錯誤包裝1/1000機率轉導顆粒(假噬菌體)同源重組哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析普遍性轉導作圖原理：如果兩個基因一起轉導或同時轉導（共轉導或并發轉導）頻率較高，那么證明兩基因連鎖，而且頻率越高，則兩基因距離越近。如：a基因和b基因共轉導頻率高，a和c共轉導頻率也高，b和c共轉導頻率低，則3個基因順序為b-a-c哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析共由以上公式可知：轉導DNA的平均長度約為１個病毒基因組的大??；通過試驗測知兩個基因的共轉導頻率，就可估算出兩個基因間的物理距離。共轉導哈工大-遺傳學第四章細菌的遺傳分析3.流產轉導

普遍性轉導中，在基本培養基上除了出現正常菌落外，還有大量小菌落，這兩者之比大約1:10，這一現象稱為流產轉導(abortivetransduction)原因：供體野生型基因只有10%重組入受體染色體中，90%的未重組細胞分裂時，只有一個細胞得到這一基因，呈單線傳遞。凡沒有得到這一基因的細胞不能合成相應的酶，但仍含有母細胞中殘留的酶，可供這些細胞分裂一兩次，所有這些細胞將形成小菌落，稱為流產轉導型。哈工大-遺傳學第四章