暗視野顯微鏡是利用丁達爾（Tyndall）光學效應的原理，在普通光學顯微鏡的結構基礎上改造而成的。暗視野聚光器，使光源的中央光束被阻擋。不能由下而上地通過標本進入物鏡。從而使光改變途徑，傾斜地照射在觀察的標本上，標本遇光發生反射或散射，散射的光線投入物鏡內，因而整個視野是黑暗的。暗視野顯微鏡的基本原理是丁達爾效應。當一束光線透過黑暗的房間,從垂直于入射光的方向可以觀察到空氣里出現的一條光亮的灰塵“通路”,這種現象即丁達爾效應。暗視野顯微鏡在普通的光學顯微鏡上換裝暗視野聚光鏡后,由于該聚光器內部拋物面結構的遮擋,照射在待檢物體表面的光線不能直接進入物鏡和目鏡,僅散射光能通過,因而視野是黑暗的。暗視野顯微鏡由于不將透明光射入直接觀察系統，無物體時，視野暗黑，不可能觀察到任何物體；當有物體時，以物體衍射回的光與散射光等在暗的背景中明亮可見。暗視野顯微鏡常用來觀察未染色的透明樣品。這些樣品因為具有和周圍環境相似的折射率，不易在一般明視野之下看的清楚，于是利用暗視野提高樣品本身與背景之間的對比。這種顯微鏡能見到小至4~200nm的微粒子，只能看到物體的存在、運動和表面特征，不能辨清物體的細微結構。暗視野顯微鏡是利用丁達爾（Tyndall）光學效應的原理，在普通光學顯微鏡的結構基礎上改造而成的。暗視野聚光器，使光源的中央光束被阻擋。不能由下而上地通過標本進入物鏡。從而使光改變途徑，傾斜地照射在觀察的標本上，標本遇光發生反射或散射，散射的光線投入物鏡內，因而整個視野是黑暗的。暗視野顯微鏡的基本原理是丁達爾效應。當一束光線透過黑暗的房間,從垂直于入射光的方向可以觀察到空氣里出現的一條光亮的灰塵“通路”,這種現象即丁達爾效應。暗視野顯微鏡在普通的光學顯微鏡上換裝暗視野聚光鏡后,由于該聚光器內部拋物面結構的遮擋,照射在待檢物體表面的光線不能直接進入物鏡和目鏡,僅散射光能通過,因而視野是黑暗的。暗視野顯微鏡由于不將透明光射入直接觀察系統，無物體時，視野暗黑，不可能觀察到任何物體；當有物體時，以物體衍射回的光與散射光等在暗的背景中明亮可見。暗視野顯微鏡常用來觀察未染色的透明樣品。這些樣品因為具有和周圍環境相似的折射率，不易在一般明視野之下看的清楚，于是利用暗視野提高樣品本身與背景之間的對比。這種顯微鏡能見到小至4~200nm的微粒子，只能看到物體的存在、運動和表面特征，不能辨清物體的細微結構。暗視野顯微鏡是利用丁達爾（Tyndall）光學效應的原理，在普通光學顯微鏡的結構基礎上改造而成的。暗視野聚光器，使光源的中央光束被阻擋。不能由下而上地通過標本進入物鏡。從而使光改變途徑，傾斜地照射在觀察的標本上，標本遇光發生反射或散射，散射的光線投入物鏡內，因而整個視野是黑暗的。暗視野顯微鏡的基本原理是丁達爾效應。當一束光線透過黑暗的房間,從垂直于入射光的方向可以觀察到空氣里出現的一條光亮的灰塵“通路”,這種現象即丁達爾效應。暗視野顯微鏡在普通的光學顯微鏡上換裝暗視野聚光鏡后,由于該聚光器內部拋物面結構的遮擋,照射在待檢物體表面的光線不能直接進入物鏡和目鏡,僅散射光能通過,因而視野是黑暗的。暗視野顯微鏡由于不將透明光射入直接觀察系統，無物體時，視野暗黑，不可能觀察到任何物體；當有物體時，以物體衍射回的光與散射光等在暗的背景中明亮可見。暗視野顯微鏡常用來觀察未染色的透明樣品。這些樣品因為具有和周圍環境相似的折射率，不易在一般明視野之下看的清楚，于是利用暗視野提高樣品本身與背景之間的對比。這種顯微鏡能見到小至4~200nm的微粒子，只能看到物體的存在、運動和表面特征，不能辨清物體的細微結構。免疫酶技術是將抗原抗體反應的特異性與酶的高效催化作用有機結合的一種方法。它以酶作為標記物，與抗體或抗原聯結，與相應的抗原或抗體作用后，通過底物的顏色反應作抗原抗體的定性和定量，亦可用于組織中抗原或抗體的定位研究，即酶免疫組織化學技術。目前應用最多的免疫酶技術是酶聯免疫吸附實驗（ELISA），它是使抗原或抗體吸附于固相載體，使隨后進行的抗原抗體反應均在載體表面進行，從而簡化了分離步驟，提高了靈敏度，即可檢測抗原，也可檢測抗體。實驗方法包括間接法、夾心法及競爭法。為了檢測抗原可用夾心法。將特異性抗體吸附在固相載體（聚苯乙烯制成的小管、小盤或小孔）上，然后加被測溶液，倘樣品中有相應抗原，則與抗體在載體表面形成復合物。洗滌后加入酶標記的特異性抗體，后者通過抗原也結合到載體的表面。洗去過剩的標記抗體，加入酶的底物，在一定時間內經酶催化產生的有色產物的量與溶液中抗原含量成正比，可用肉眼觀察或分光光度計測定。為了檢測抗體可用間接法。使抗原吸附于載體上，然后加入被測血清，如有抗體，則與抗原在載體上形成復合物。洗滌后加酶標記的抗球蛋白（抗抗體）與之反應。洗滌后加底物顯色，有色產物的量與抗體的量成正比。常用的酶有辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（AP），相應的底物分別是鄰苯二胺（OPD）和對硝基苯磷酸鹽，前者呈色反應為棕黃色，后者為藍色。可用目測定性，也可用酶標儀測定光密度（OD）值以反映抗原含量。接觸抑制：將多細胞生物的細胞進行體外培養時，分散貼壁生長的細胞一旦相互匯合接觸，即停止移動和生長的現象。細胞增殖到一定程度,也就是互相挨在一起的時候,糖蛋白識別了這種信息,就會使細胞停止繼續繁殖,這種現象就叫做接觸抑制.細胞內核苷酸的合成有內源性和外源性兩個途徑，DNA的內源性生物合成途徑是指細胞可利用谷氨酞胺與尿嘌呤核昔單磷酸合成核苷酸，這是主要途徑。這一合成途徑可以被葉酸的拮抗物一氨基喋吟(A)所阻斷。核苷酸的外源性生物合成途徑包括:細胞通過鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT)利用次黃嘌呤(H)合成嘌呤核昔酸，通過胸腺嘧啶激酶(thymidinekinase,TK)利用胸腺嘧啶核昔(T)合成嘧啶核昔酸，進而合成DNA。HAT選擇性培養基是在常規培養基內添加了氨基喋吟(A)，用以阻斷DNA的內源性生物合成途徑，同時提供核苷酸合成的前體次黃嘌呤(H)和胸腺嘌呤核昔(T),供細胞利用外源途徑合成DNA。

用于細胞融合的骨髓瘤細胞是經過8一氮鳥嘌呤處理缺失HGPRT的營養缺陷型細胞，或缺失TK的缺陷型細胞，該細胞只有核昔酸合成的內源性途徑，而沒有外源性合成途徑，所以在HAT培養基中骨髓瘤細胞和它們彼此融合的細胞均被殺死，未融合的淋巴細胞和它們彼此融合的細胞不能傳代而最終死亡，而雜交瘤細胞獲得了骨髓瘤細胞的遺傳信息，能在體外無限生長，又從鼠脾淋巴細胞中獲得了HGPRT或TK，在該培養基中可利用生物合成的外源性途徑合成DNA。因此，只有雜交瘤細胞能夠在HAT培養基中大量生長繁殖。特征N-連接O-連接合成部位起始于糙面內質網，后在高爾基體中寡糖鏈進一步加工稱為成熟的糖蛋白高爾基體合成方式來自同一個寡糖前體一個個單糖加上去與之結合的氨基酸殘基Asn-X-Thr（Ser）的天冬酰胺殘基上，X是除Pro以外的任意氨基酸Ser、Thr、羥Pro、羥Lys第一個糖殘基N-乙酰葡糖胺N-乙酰半乳糖胺最終長度至少5個糖殘基一般1-4個糖殘基，但ABO血型較長特征N-連接O-連接合成部位起始于糙面內質網，后在高爾基體中寡糖鏈進一步加工稱為成熟的糖蛋白高爾基體合成方式來自同一個寡糖前體一個個單糖加上去與之結合的氨基酸殘基Asn-X-Thr（Ser）的天冬酰胺殘基上，X是除Pro以外的任意氨基酸Ser、Thr、羥Pro、羥Lys第一個糖殘基N-乙酰葡糖胺N-乙酰半乳糖胺最終長度至少5個糖殘基一般1-4個糖殘基，但ABO血型較長特征N-連接O-連接合成部位起始于糙面內質網，后在高爾基體中寡糖鏈進一步加工稱為成熟的糖蛋白高爾基體合成方式來自同一個寡糖前體一個個單糖加上去與之結合的氨基酸殘基Asn-X-Thr（Ser）的天冬酰胺殘基上，X是除Pro以外的任意氨基酸Ser、Thr、羥Pro、羥Lys第一個糖殘基N-乙酰葡糖胺N-乙酰半乳糖胺最終長度至少5個糖殘基一般1-4個糖殘基，但ABO血型較長特征N-連接O-連接合成部位起始于糙面內質網，后在高爾基體中寡糖鏈進一步加工稱為成熟的糖蛋白高爾基體合成方式來自同一個寡糖前體一個個單糖加上去與之結合的氨基酸殘基Asn-X-Thr（Ser）的天冬酰胺殘基上，X是除Pro以外的任意氨基酸Ser、Thr、羥Pro、羥Lys第一個糖殘基N-乙酰葡糖胺N-乙酰半乳糖胺最終長度至少5個糖殘基一般1-4個糖殘基，但ABO血型較長前列腺素（prostaglandin，PG）是存在于動物和人體中的一類不飽和脂肪酸組成的、具有多種生理作用的活性物質。最早發現它存在于人的精液中，當時以為這一物質是由前列腺釋放的，因而定名為前列腺素。現已證明精液中的前列腺素主要來自精囊，全身許多組織細胞都能產生前列腺素。前列腺素（PG）在體內由花生四烯酸所合成，結構為一個五環和兩條側鏈構成的20碳不飽和脂肪酸。按其結構，前列腺素分為A、B、C、D、E、F、G、H、I等類型。不同類型的前列腺素具有不同的功能，如前列腺素E能舒張支氣管平滑肌，降低通氣阻力；而前列腺素F的作用則相反。前列腺素的半衰期極短（1～2分鐘），除前列腺素I2外，其他的前列腺素經肺和肝迅速降解，故前列腺素不像典型的激素那樣，通過循環影響遠距離靶向組織的活動，而是在局部產生和釋放，對產生前列腺素的細胞本身或對鄰近細胞的生理活動發揮調節作用。前列腺素對內分泌、生殖、消化、血液呼吸、心血管、泌尿及神經系統均有作用。鋅指結構定義指的是在很多蛋白中存在的一類具有指狀結構的結構域，這些具有鋅指結構的蛋白大多都是與基因表達的調控有關的功能蛋白。共同特征鋅指結構的共同特征是通過肽鏈中氨基酸殘基的特征基團與Zn2+的結合來穩定一種很短的，可自我折疊成“手指”形狀的的多肽空間構型。發現鋅指蛋白最初在非洲爪蟾的卵母細胞中發現，已知廣泛分布在動物、植物和微生物中，人類基因組中可能有將近1%的序列編碼的是含有鋅指結構的蛋白質，目前人們已經清楚地知道鋅指結構是識別特定堿基序列的一種普遍性的轉錄基因結構，但大多數含有鋅指結構蛋白質的確切功能以及他們是否具有其他方面的功能尚不清楚。[1]視黃酸維生素A（視黃醇）在細胞內轉化為視黃酸，與視黃醛（維生素A在脫氫酶作用下氧化產物）共同作用，可以調控基因表達，減弱上皮細胞向鱗片狀的分化，增加上皮生長因子受體的數量，它與和DNA連接及調節基因表達的受體結合以維持上皮組織和各種其他組織的導向分化.★細胞骨架三種組分的比較內容微絲微管中間纖維纖維直徑7nm24nm10nm蛋白質組成球形肌動蛋白組裝而成微管蛋白異二聚體組裝而成6類中間纖維蛋白P222纖維結構雙鏈螺旋13根原纖絲組成空心管狀略極性有（有裂縫的一端為-，另一端為+）有（а端為-、β端為+）無組裝在適當濃度Ca2+以及很低濃度的Na+、K+等陽離子溶液中,微絲趨于解聚;而在ATP、Mg2+和高濃度的Na+,K+溶液誘導下,肌動蛋白則裝配為纖維狀微絲體外：一定的微管蛋白濃度、、GTP、Mg2＋、EDTA、一定的溫度(最適為37℃）實現微管組裝細胞內：起始于微管組織中心即中心體（發出紡錘絲）、基體（發出鞭毛、纖毛），都是9（3）+0模式略踏車現象快的一端（+極）比慢的一端（-極）快上5到10倍。當ATP濃度達一定臨界值時，可以觀察到+極組裝而-極同時去組裝的現象，被命為“踏車”。微管具有極性，(+)極生長速度快，(-)極生長速度慢。微管和微絲一樣具有踏車行為。無相關的分子馬達肌球蛋白驅動蛋白、動力蛋白有特異性藥物細胞松馳素B（抑制聚合）鬼筆環肽（抑制解聚）秋水仙素（抑制組裝）長春花堿（抑制組裝）紫杉醇（抑制去組裝）諾考達唑（促使解聚）未發現細胞皮層，應力纖維，維持細胞形態維持細胞形態增加細胞的機械強度，在受到較大的變形力時不易斷裂，比微絲和微管更耐受剪切力；支持結構，維持細胞形態對細胞結構的組織作用，維持細胞器的空間定位、維持細胞器的空間定位形成核纖層，核骨架細胞的多種運動：胞質環流、阿米巴運動、變皺膜運動、吞噬、膜蛋白的定位、細胞偽足的形成、細胞遷移細胞器的分布與轉移與遺傳信息的傳遞及細胞的分化有關，與mRNA的運輸有關，并對mRNA的胞內定位和翻譯有決定性作用微絨毛鞭毛、纖毛（兩聯體微管的B管滑動使鞭毛、纖毛產生局部彎曲）胞質分裂環依賴于微管的物質運輸肌肉收縮（粗細肌絲相對滑動的結果）構成紡錘體參與形成黏著帶、黏著斑參與橋粒和半橋粒的形成組織特異性無無有、與細胞分化有關活性染色質和非活性染色質的特點活性染色質非活性染色質1.常染色質、異染色質常染色質是活性染色質的必要條件異染色質一定是非活性染色質2.DNAase超敏感活性染色質對DNAaseⅠ超敏感3.HMG蛋白活性染色質含有非組蛋白HMG14、HMG174.組蛋白具轉錄活性的核小體常缺乏H1；H2A在活性染色質中很少以變異的形式存在；H3的變種H3.3只在活躍轉錄的染色質中存在；5.組蛋白乙酰化組蛋白乙酰化是活性染色質的標志如H3K9乙酰化、H3K14乙酰化組蛋白去乙酰化是非活性染色質的標志，如H3K9去乙酰化6.組蛋白磷酸化H3S10磷酸化H2B磷酸化，一般是非活性染色質的標志H1磷酸化導致染色體凝集而失活7.組蛋白甲基化H3K4甲基化H3K9甲基化8.印記如雌性兩條X染色體中，其中一條始終保持凝集失活狀態并可在細胞世代間穩定遺傳9.位置花瓣效應有的活性基因轉移到異染色質區會失活，這一現象稱為位置花瓣效應10.DNA甲基化非活躍轉錄基因的DNA甲基化程度普遍高于活躍轉錄的基因注：S代表絲氨酸，K代表賴氨酸羅伯遜易位(Robertsoniantranslocation)，又稱著絲粒融合（centricfusion）。這是發生于近端著絲粒染色體的一種易位形式。當兩個近端著絲粒染色體在著絲粒部位或著絲粒附近部位發生斷裂后，二者的長臂在著絲粒處接合在一起，形成一條由長臂構成的衍生染色體；兩個短臂則構成一個小染色體，小染色體往往在第二次分裂時丟失，這可能由于其缺乏著絲粒或者是由于其完全由異染色質構成所致。由于丟失的小染色體幾乎全是異染色質，而由兩條長臂構成的染色體上則幾乎包含了兩條染色體的全部基因，因此，羅伯遜易位攜帶者雖然只有45條染色體，但表型一般正常，只在形成配子的時候會出現異常，造成胚胎死亡而流產或出生先天畸形等患兒。在進化中是生物染色體數目變化的一種情況。羅伯遜裂解：一條中央著絲粒染色體斷裂成兩條端著絲粒染色體的過程。細胞周期各期事件及機制時期事件機制G1細胞生長，合成各種蛋白質、糖類、脂質SDNA的復制、組蛋白的合成，核小體的組裝G2微管蛋白的合成，為分裂期（M期）紡錘體微管的組裝提供原料，中心粒完成復制而成2對中心粒前期染色體凝縮、分裂極的確立和紡錘體的裝配前中期核膜的崩解核纖層蛋白磷酸化，核膜解聚完成紡錘體的裝配負向運動的動力蛋白在微管之間搭橋，確定兩極；正向運動的驅動蛋白將紡錘體拉長；負向運動的馬達蛋白在細胞膜和星體微管之間搭橋，紡錘體進一步拉長染色體整列紡錘體發出的微管捕捉染色體動粒，形成染色體動粒微管中期染色體整列完成并且所有染色體排列到赤道板上，紡錘體結構呈現典型的紡錘樣牽拉和外推學說，當染色體完成在赤道面整列之后，兩側的動粒微管長度相等，作用力均衡后期中期整列的染色體其兩條姐妹染色單體分離，分別向兩極運動動粒微管變短，將染色體逐漸拉向兩極；極微管在重疊區相互滑動，重疊區變窄，兩極距離變長；胞質動力蛋白在星體微管和細胞膜之間搭橋，并向負極移動，進一步將兩極距離拉長；末期核膜核仁重建，染色體去濃縮，RNA合成功能逐漸恢復動粒微管消失，極微管繼續加長，較多的分布于兩組染色單體之間，核纖層蛋白去磷酸化，核纖層與核膜重新組裝。胞質分裂分裂溝位置的確立；肌動蛋白聚集和收縮環形成；收縮環收縮；收縮環處細胞膜融合；中央紡錘體和星體微管共同決定了分裂溝形成的位置，星體微管參與了分裂溝的形成減數分裂Ⅰ前期各時相特點細線期染色質凝縮，出現一系列顆粒狀染色粒；染色體端粒通過接觸斑與核膜相連；偶線期同源染色體配對；合成S期未合成的約0.3%的DNA粗線期染色體進一步凝縮，變粗變短，并與核膜繼續保持接觸；發生等位基因之間部分DNA片段的交換和重組；合成減數分裂期專有的組蛋白，置換體細胞類型的組蛋白。雙線期重組階段結束，同源染色體仍聯系的部位稱為交叉，細胞學上的交叉是遺傳學上交換的基礎，遺傳學上的交換在前，細胞學上的交叉在后；燈刷染色體即為卵母細胞中停留在雙線期的的染色體，其側環存在旺盛的DNA轉錄；終變期染色體重新開始凝集，燈刷染色體側環回縮；核仁消失，發生交叉端化；減數分裂Ⅰ前期各時相特點細線期染色質凝縮，出現一系列顆粒狀染色粒；染色體端粒通過接觸斑與核膜相連偶線期同源染色體配對；合成S期未合成的約0.3%的DNA粗線期染色體進一步凝縮，變粗變短，并與核膜繼續保持接觸；發生等位基因之間部分DNA片段的交換和重組；合成減數分裂期專有的組蛋白，置換體細胞類型的組蛋白。雙線期重組階段結束，同源染色體仍聯系的部位稱為交叉，細胞學上的交叉是遺傳學上交換的基礎，遺傳學上的交換在前，細胞學上的交叉在后；燈刷染色體即為卵母細胞中停留在雙線期的的染色體，其側環存在旺盛的DNA轉錄；終變期染色體重新開始凝集，燈刷染色體側環回縮；核仁消失，發生交叉端化；減數分裂Ⅰ前期各時相特點細線期染色質凝縮，出現一系列顆粒狀染色粒；染色體端粒通過接觸斑與核膜相連偶線期同源染色體配對；合成S期未合成的約0.3%的DNA粗線期染色體進一步凝縮，變粗變短，并與核膜繼續保持接觸；發生等位基因之間部分DNA片段的交換和重組；合成減數分裂期專有的組蛋白，置換體細胞類型的組蛋白。雙線期重組階段結束，同源染色體仍聯系的部位稱為交叉，細胞學上的交叉是遺傳學上交換的基礎，遺傳學上的交換在前，細胞學上的交叉在后；燈刷染色體即為卵母細胞中停留在雙線期的的染色體，其側環存在旺盛的DNA轉錄；終變期染色體重新開始凝集，燈刷染色體側環回縮；核仁消失，發生交叉端化；有絲分裂各時相的調控1.細胞周期檢驗點：細胞要分裂，必須正確復制DNA和達到一定的體積，在獲得足夠物質支持分裂以前，細胞不可能進行分裂。細胞周期的運行，是在一系列稱為檢驗點（checkpoint）的嚴格檢控下進行的，當DNA發生損傷，復制不完全或紡錘體形成不正常，周期將被阻斷。G1/S檢驗點:在酵母中稱start點，在哺乳動物中稱R點(restrictionpoint)，控制細胞由靜止狀態的G1進入DNA合成期，相關的事件包括：DNA是否損傷？細胞外環境是否適宜？細胞體積是否足夠大？S期檢驗點：DNA復制是否完成？G2/M檢驗點：是決定細胞一分為二的控制點，相關的事件包括：DNA是否損傷？細胞體積是否足夠大？中-后期檢驗點（紡錘體組裝檢驗點）：任何一個著絲點沒有正確連接到紡錘體上，都會抑制APC的活性，引起細胞周期中斷。2..CDK：細胞周期蛋白依賴性蛋白激酶（含量穩定）Cyclin：細胞周期蛋白（含量周期性變化）CDK與cyclin結合表現出蛋白激酶的活性，使靶蛋白磷酸化，調控細胞周期中期→中期→后期MPF=p34cdc2=CDK1+cyclinA、B1、B2、B3結合，表現出激酶活性，使組蛋白H1磷酸化，促進染色質凝縮；核纖層蛋白磷酸化，促進核纖層解聚；核仁蛋白磷酸化，促進核仁解體G2→MSPF=CDK2+cyclinA、D、ECDK4+cyclinDCDK6+cyclinD通過下游靶蛋白磷酸化，調控G1向S期轉化G1→SS期內部檢驗點、DNA復制檢驗點，通過檢驗，自動轉化到G2期S→G2在中期當MPF活性達到最高時，通過一種未知的途徑，激活后期促進因子APC，在APC的作用下，M期周期蛋白（A、B）被泛素標記，然后被蛋白酶體降解，M-CDK（即CDK1）活性喪失，上述被CDK1磷酸化的靶蛋白去磷酸化，細胞周期便從M期中期向后期轉化飼養層在正常機體內，細胞除了獲得一些血液來的營養外，還在細胞與細胞之間互換特殊的物質，用于分裂分化和營養等。因而，在細胞體外培\o"養中"養中，除了正常的培養基外，先培養一層特殊的細胞，然后再在其上接種要實驗的細胞，這樣更能模擬體內環境。這些特殊的細胞就