表1醫(yī)院科門（急）診流感樣病例數和門急診病例就診總數原附件1全國流感監(jiān)測技術指南（2017年版）為進一步規(guī)范我國流感監(jiān)測工作技術環(huán)節(jié)，科學指導全國流感監(jiān)測網絡和各級疾病預防控制機構做好流感監(jiān)測工作，依據《全國流感監(jiān)測方案（2017年版）》，特制定本指南。一、監(jiān)測目的（一）實時監(jiān)測流感活動水平和流行趨勢；（二）實時追蹤流感病毒變異，及時發(fā)現新型流感病毒，并做出預警;（三）為全球及我國流感疫苗株的推薦及抗病毒藥物的使用提供依據;（四）為流感大流行的準備和應對提供技術支撐。二、流感樣病例監(jiān)測（一）監(jiān)測病例定義流感樣病例：發(fā)熱（體溫》38℃）,伴咳嗽或咽痛之一者。出現發(fā)熱的時間應在本次急性發(fā)熱病程內，體溫認定包括患者自測體溫和醫(yī)療機構檢測體溫。（二）監(jiān)測時間所有流感樣病例監(jiān)測哨點醫(yī)院和流感監(jiān)測網絡實驗室均全年開展流感樣病例監(jiān)測。流感監(jiān)測周歷編排標準參照IS08601,按照公歷的周一到周日編排，周一為每周第一天（周歷注釋：如1月1日為周一至周四,該周屬于新年第一周；如1月1日為周五至周日，該周則屬于上一年最后一周；監(jiān)測年度注釋：每年第十四周為監(jiān)測年度起始周；下一年的第十三周則屬于監(jiān)測年度終上周。）。（三）哨點醫(yī)院監(jiān)測診室的設置.綜合醫(yī)院在內科門診、內科急診、發(fā)熱門診和（或）兒內科門診、兒內科急診開展流感樣病例的監(jiān)測。.兒童醫(yī)院在兒內科門診、兒內科急診和（或）發(fā)熱門診開展流感樣病例的監(jiān)測。.所有國家級流感樣病例哨點監(jiān)測醫(yī)院都應按要求規(guī)范設置監(jiān)測診室,不能僅將發(fā)熱門診設為監(jiān)測診室。（四）流感樣病例的報告.報告內容和程序（1）哨點醫(yī)院監(jiān)測診室的醫(yī)務人員，按照流感樣病例的定義，對每天在所有監(jiān)測診室就診的病例進行診斷，每天按科室登記各年齡組的流感樣病例數和門急診病例就診總數，填寫“醫(yī)院科門（急）診流感樣病例數和門急診病例就診總數原始登記表”（附表1）,報醫(yī)院主管科室。原始登記表中“流感樣病例數”和“門急診病例就診總數”可分科室、診室，由各科室確定專人每日進行登記。（2）哨點醫(yī)院主管科室，每周一負責將本院各監(jiān)測診室上周的“醫(yī)院科門（急）診流感樣病例數和門急診病例就診總數原始登記表”（附表1）,分診室錄入“中國流感監(jiān)測信息系統”。（3）有醫(yī)院信息系統的哨點醫(yī)院，要求利用醫(yī)院信息系統開展流感樣病例登記、報告等工作，提高監(jiān)測工作質量。.注意事項流感樣病例數和門急診病例就診總數在每個監(jiān)測診室的產生來源必須一致。舉例：ILI%二（內科診室ILI數）/（所有內科診室就診患者數）。（五）流感樣病例標本的采集和運送上海、江蘇、浙江、安徽、福建、江西、湖北、湖南、廣東、廣西、海南、重慶、四川、貴州、云南等15個南方省份每家哨點醫(yī)院平均每周采集流感樣病例標本20份（每周不能低于10份，不超過40份）。北京、天津、河北、山西、內蒙古、遼寧、吉林、黑龍江、山東、河南、西藏、陜西、甘肅、青海、寧夏、新疆等16個北方省份和新疆生產建設兵團每家哨點醫(yī)院在4至9月每月采集流感樣病例標本20份，10月至次年3月平均每周采集流感樣病例標本20份（每周不能低于10份，不超過40份）。標本采集日期應均勻分布，避免集中、突擊采樣。哨點醫(yī)院監(jiān)測診室的醫(yī)護人員采集流感樣病例標本時，須填寫“流感樣病例標本原始登記送檢表”（附表2）,隨同標本送至對應的流感監(jiān)測網絡實驗室。.采樣對象：發(fā)病3天內的流感樣病例。.標本采集種類包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽拭子。標本采集后，放入含3-4mL采樣液的采樣管中。采集方法詳見附件10.標本的運輸：標本采集后應在2-8℃的條件下，2個工作日運送至對應的流感監(jiān)測網絡實驗室。如未能48小時內送至實驗室，應置-70℃或以下保存，并保證采集的標本一周內送到對應的網絡實驗室。標本應避免反復凍融。標本運輸方法詳見附件1。.全國流感監(jiān)測網絡實驗室的工作人員接到標本后，48小時內將“流感樣病例標本原始登記送檢表"（附表2）錄入到中國流感監(jiān)測信息系統“流感樣病例標本登記表”中（附表3）。（六）流感樣病例標本的實驗室檢測.實驗室條件及生物安全操作要求開展流感樣病例病原學監(jiān)測的實驗室必須是生物安全n級或以上實驗室，具備以下實驗室條件和相關儀器設備。(1)流感病毒分離必須在生物安全II級或以上實驗室的生物安全柜內操作，并遵守相關的生物安全管理規(guī)定。(2)紅細胞凝集(HA)和紅細胞凝集抑制(HI)試驗在生物安全H級實驗室里操作，并遵守相關的生物安全管理規(guī)定。(3)實驗室基本條件：A2型生物安全柜、倒置顯微鏡、離心機、C02培養(yǎng)箱、恒溫培養(yǎng)箱、液氮罐、醫(yī)用-4℃和-20℃冰箱、-70℃及以下低溫冰箱、高通量熒光定量PCR儀、自動核酸提取儀、純水儀、全自動高壓滅菌器、自動孵蛋箱等。(4)除上述條件外，省級流感參比中心實驗室條件：高速冷凍離心機、全自動流感病毒藥物敏感性檢測系統、深度測序系統、自動化工作站等。.病毒分離與鑒定流感監(jiān)測網絡實驗室收到哨點醫(yī)院采集的標本后，要在3個工作日內利用核酸檢測方法進行流感病毒亞型或系鑒定。對于檢測陽性的標本,要求1周內利用狀態(tài)良好的MDCK細胞和(或)SPF雞胚進行病毒分離。(1)標本的處理：將原始標本分為三份，一份用于MDCK細胞接種，一份雞胚接種，一份-70℃或以下溫度保存用于復核。(2)標本的接種、收獲和鑒定：為提高病毒分離的陽性率，標本應避免反復凍融，核酸檢測陽性的標本最好在24小時內利用生長狀態(tài)良好的MDCK細胞和(或)雞胚進行病毒分離。MDCK細胞或雞胚收獲的病毒培養(yǎng)液用豚鼠、人。型或火雞血紅細胞進行HA試驗，確定病毒滴度。標本接種后陰性標本需盲傳1次；對于血凝滴度小于1:8的毒株，將病毒培養(yǎng)液進行10T?10-3稀釋后，進行傳代。HA試驗完成后，采用國家流感中心每年分發(fā)的各型別/亞型標準參照血清進行HI試驗，以確定病毒的型別和亞型。進行HI試驗時，需同時采用各型別/亞型的標準抗原作為對照。具體方法參見附件1。(3)結果錄入檢測結果在檢測完成后48小時內錄入到中國流感監(jiān)測信息系統“流感監(jiān)測病毒分離、鑒定結果登記表”中（附表4）。.流感病毒的抗原性分析省級流感參比中心每年選取本省至少20%的流感毒株使用國家流感中心統一提供的參考抗原和參考血清進行抗原性分析，流行季節(jié)每月至少開展一次。通過與陽性對照的HI滴度進行對比，分析流行病毒的抗原性變異情況。每月以電子版的方式將本省流感病毒抗原性分析的數據（流感病毒抗原性分析結果登記表（附表5））上報至國家流感中心，郵箱為flulab@o.流感病毒基因特性分析省級流感參比中心每年選取進行過抗原性分析的至少30株流感毒株進行序列測定和基因特性分析，每月將序列數據提交至“中國流感病毒基因序列數據庫”，各網絡實驗室通過“中國流感基因序列數據庫”共享最新的流感序列，利用序列信息開展綜合分析，提高數據利用能力。.流感病毒的耐藥性監(jiān)測省級流感參比中心每年選取進行過抗原性分析的至少30株流感毒株進行耐藥性檢測，通過表型測定的方法來監(jiān)測流行病毒的耐藥性，為指導抗流感病毒藥物的使用提供依據。每月以電子版的方式將本省份流感病毒耐藥性監(jiān)測的數據（流感病毒耐藥檢測結果登記表（附表6））上報至國家流感中心，郵箱為flulab@0.流感毒株的管理和寄送（1）毒株的保存管理包括國家流感中心在內的全國流感