血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的代謝紊亂血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的代謝紊亂（優(yōu)選）血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的代謝紊亂（優(yōu)選）血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的代謝紊亂目錄

血漿蛋白質(zhì)及其代謝紊亂1氨基酸代謝紊亂2嘌呤核苷酸代謝紊亂3血清蛋白質(zhì)測定4血清蛋白質(zhì)電泳分析5血清氨基酸測定6小結與展望7返回總目錄3目錄血漿蛋白質(zhì)及其代謝紊亂1氨基酸代謝紊亂2嘌呤核苷第一節(jié)血漿蛋白質(zhì)及其代謝紊亂蛋白質(zhì)是人體中含量和種類最多的物質(zhì)，蛋白質(zhì)占人體干重的45％，種類約有10萬之多。幾乎在所有的生理過程中蛋白質(zhì)都起著關鍵作用。血漿蛋白質(zhì)是血漿固體成分中含量最多的一類化合物，目前所了解的血漿蛋白質(zhì)約有500種。4第一節(jié)血漿蛋白質(zhì)及其代謝紊亂蛋一、血漿蛋白質(zhì)的種類和生理功能

（一）血漿蛋白質(zhì)的種類——電泳分類法

可將血清蛋白質(zhì)分為清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白5條主要區(qū)帶。

正常血清蛋白電泳圖譜示意圖及其掃描曲線5一、血漿蛋白質(zhì)的種類和生理功能（一）血漿蛋白質(zhì)的種類——電血漿蛋白質(zhì)的種類——功能分類法運輸載體類補體蛋白類免疫球蛋白類凝血蛋白類蛋白酶抑制物蛋白類激素6血漿蛋白質(zhì)的種類——功能分類法6（二）血漿蛋白質(zhì)的生理功能①營養(yǎng)作用，修補組織蛋白；②維持血漿膠體滲透壓；③作為激素、維生素、脂類、代謝產(chǎn)物、離子、藥物等的載體；④作為血液pH緩沖系統(tǒng)的一部分；⑤抑制組織蛋白酶；7（二）血漿蛋白質(zhì)的生理功能①營養(yǎng)作用，修補組織蛋白；7（二）血漿蛋白質(zhì)的生理功能⑥一些酶在血漿中起催化作用；⑦代謝調(diào)控作用；⑧參與凝血與纖維蛋白溶解；⑨作為免疫球蛋白與補體等免疫分子組成體液免疫防御系統(tǒng)。8（二）血漿蛋白質(zhì)的生理功能⑥一些酶在血漿中起催化作用；8痛風石：是痛風特征性損害。此外，雌激素也可使AAG降低。α1-酸性糖蛋白（AAG）的臨床評價21g/L～27g/L中度缺乏二、繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂嘌呤核苷酸從頭合成途徑分子量為120kD~200kD的聚合體，由于n不同，可以在電泳中出現(xiàn)多條帶因α1-酸性糖蛋白含糖量很高，曾被稱為血清類粘蛋白（orosomucoid，粘蛋白）。α1-酸性糖蛋白是一種粘多糖與蛋白質(zhì)分子結合成的有耐熱功能的復合蛋白質(zhì)，主要在肝臟產(chǎn)生,某些腫瘤組織也可產(chǎn)生優(yōu)點：不需特殊設備、經(jīng)濟和操作簡單，而且采集在濾紙上的標本可以郵寄。血脂正常，膽固醇不高的人群。各種蛋白質(zhì)含氮量在疾病狀態(tài)差異較大，等由肝細胞、單核細胞和星形細胞合成（2）同型半胱氨酸與心血管疾病②腺苷酸（AMP）和鳥苷酸（GMP）的合成＜21g/L嚴重缺乏（二）溴甲酚綠法測定血清清蛋白與Ⅰ型不同的是：血中甲硫氨酸不升高。（一）血清蛋白電泳的正常圖譜血清蛋白電泳（serumproteinelectrophoresis，SPE）正常圖譜，由正極到負極可依次分為清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白五個區(qū)帶。二、血清蛋白質(zhì)電泳組分的臨床分析9痛風石：是痛風特征性損害。（一）血清蛋白電泳的正常圖譜（二）血清蛋白電泳的異常圖譜血清蛋白電泳異常圖譜分型血清蛋白電泳典型異常圖譜漿細胞病與M蛋白10（二）血清蛋白電泳的異常圖譜血清蛋白電泳異常圖譜分型10（一）血清蛋白電泳異常圖譜分型圖譜類型TPAlbα1α2βγ低蛋白血癥型↓↓↓↓N↑N↓N↑腎病型↓↓↓↓N↑↑↑↑↓N↑肝硬化型N↓↑↓↓N↓N↓β-γ↑（融合）彌漫性肝損害型N↓↓↓↑↓↑慢性炎癥型↓↑↑↑急性時相反應型N↓N↑↑NM蛋白血癥型在α-γ區(qū)帶中出現(xiàn)M蛋白區(qū)帶高α2(β)-球蛋白血癥型↓↑↑↑妊娠型↓N↓↑↑N蛋白質(zhì)缺陷型個別區(qū)帶出現(xiàn)特征性缺乏11（一）血清蛋白電泳異常圖譜分型圖譜類型TPAlbα1α2βγ（二）血清蛋白電泳典型異常圖譜

A.

正常電泳圖B.雙清蛋白血癥

C.

清蛋白缺乏癥

D.腎病綜合征

E.肝硬化（β-γ橋）

F.急性炎癥

12（二）血清蛋白電泳典型異常圖譜A.正常電泳圖B.雙清（三）漿細胞病與M蛋白正常血清蛋白電泳上顯示的寬γ區(qū)帶主要成分：免疫球蛋白。發(fā)生漿細胞病（plasmacelldyscrasia）時，異常漿細胞克隆增殖，產(chǎn)生大量單克隆免疫球蛋白或其輕鏈或重鏈片段，病人血清或尿液中可出現(xiàn)結構單一的M蛋白，在蛋白電泳時呈現(xiàn)一個色澤深染的窄區(qū)帶，此區(qū)帶較多出現(xiàn)在γ或β區(qū)，偶見于α區(qū)。13（三）漿細胞病與M蛋白正常血清蛋白電泳上顯示的寬γ區(qū)帶主要成漿細胞病的電泳圖電泳條帶由上至下依次為Alb,α1,α2,β,γ區(qū)帶箭頭所指為可疑M區(qū)帶血清蛋白電泳圖可疑M區(qū)帶14漿細胞病的電泳圖電泳條帶由上至下依次為Alb,α1,α2血漿蛋白質(zhì)的性質(zhì)功能及其與電泳區(qū)帶的關系電泳區(qū)帶蛋白質(zhì)種類成人參考范圍（g/L）半壽期（d）分子量（kD）等電點含糖量(%)功能前清蛋白前清蛋白0.2~0.41.9554.70.5營養(yǎng)、運載清蛋白清蛋白35~5215~1966.24~5.80維持膠壓、運載和營養(yǎng)等α1-球蛋白α1-抗胰蛋白酶0.9~2.04524.812蛋白酶抑制劑α1-酸性糖蛋白0.5~1.25402.7~3.545免疫應答修飾劑甲胎蛋白3×10－569胎兒期蛋白高密度脂蛋白1.7~3.25200膽固醇逆轉(zhuǎn)運α2-球蛋白結合珠蛋白0.3~2.0285~4004.112結合血紅蛋白α2-巨球蛋白1.3~3.057205.48蛋白酶抑制劑銅藍蛋白0.1~0.44.51324.4鐵氧化酶β-球蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白2.0~3.6779.65.76運鐵到胞內(nèi)低密度脂蛋白0.6~1.55300運膽固醇到組織C30.9~1.81852補體成分C40.1~0.42067補體成分β2-微球蛋白0.001~0.00211.8纖維蛋白原2.0~4.02.53405.53凝血因子γ-球蛋白IgG7.0~1624144~1506~7.33免疫球蛋白IgA0.7~4.06~1608免疫球蛋白IgM0.4~2.3597012免疫球蛋白C-反應蛋白＜5~1156.20炎癥介質(zhì)15血漿蛋白質(zhì)的性質(zhì)功能及其與電泳區(qū)帶的關系電泳區(qū)帶蛋白質(zhì)種類成根據(jù)等位基因出現(xiàn)頻率的不同，缺陷變體可進一步分為常見和少見兩部分,最常見的缺陷變體為Z和S型,表現(xiàn)為：ZZ、SS、SZ、MZ、MS血管外溶血不會使Hp發(fā)生變化。（一）前清蛋白（prealbumin，PA）監(jiān)測腎移植后的排斥反應等血清蛋白電泳典型異常圖譜主要由肝細胞合成，單核細胞、肺泡巨噬細胞和上皮細胞也能合成Hp參考范圍較寬，須連續(xù)觀察溶血是否處于進行狀態(tài)。四、急性時相反應蛋白作為營養(yǎng)狀態(tài)的一項指標，在營養(yǎng)不良及慢性肝臟疾病時下降血漿中含量最多的蛋白質(zhì)AAT缺陷：酪氨酸酶（tyrosinase）缺乏，酪氨酸則不能轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏兀瑢е掳谆。╝lbinism），患者表現(xiàn)為白色頭發(fā)、淺色皮膚和灰藍色眼睛等。但在營養(yǎng)不良、嚴重肝病及腎病綜合征時往往下降。（三）各種痛風癥狀的發(fā)生機制發(fā)生漿細胞病（plasmacelldyscrasia）時，異常漿細胞克隆增殖，產(chǎn)生大量單克隆免疫球蛋白或其輕鏈或重鏈片段，病人血清或尿液中可出現(xiàn)結構單一的M蛋白，在蛋白電泳時呈現(xiàn)一個色澤深染的窄區(qū)帶，此區(qū)帶較多出現(xiàn)在γ或β區(qū)，偶見于α區(qū)。一種急性時相蛋白和轉(zhuǎn)運蛋白。＜21g/L嚴重缺乏第六節(jié)血清氨基酸測定21g/L～27g/L中度缺乏四、急性時相反應蛋白三、血漿蛋白質(zhì)及其異常分析（一）前清蛋白（prealbumin，PA）PA的主要功能：作為組織修補材料和運載蛋白，參與T3、T4、維生素A的運輸。PA是負性急性時相反應蛋白，在急性炎癥、惡性腫瘤、創(chuàng)傷等任何急需合成蛋白質(zhì)的情況下，血清PA均迅速下降。16根據(jù)等位基因出現(xiàn)頻率的不同，缺陷變體可進一步分為常見和少見兩前清蛋白的臨床評價PA在臨床上可以：①作為營養(yǎng)不良的指標，其評價標準是：PA200mg/L～400mg/L為正常，100mg/L～150mg／L輕度缺乏，50mg/L～100mg／L中度缺乏，＜50mg／L嚴重缺乏；②作為肝功能不全的指標，在反映肝功能的損害與恢復方面的敏感性優(yōu)于清蛋白。17前清蛋白的臨床評價PA在臨床上可以：①作為營養(yǎng)不良的指標，其（二）清蛋白（albumin，Alb）585個氨基酸殘基組成分子量66.2kD含17個二硫鍵，是唯一不含糖的血漿蛋白質(zhì)肝實質(zhì)細胞合成半壽期19d血漿中含量最多的蛋白質(zhì)18（二）清蛋白（albumin，Alb）585個氨基酸殘基組清蛋白的功能特征維持血漿膠體滲透壓：血漿滲透壓的75%～80%由Alb維持血漿中主要的載體蛋白，具有結合各種配體分子的能力緩沖酸堿，維持酸堿平衡作用營養(yǎng)作用19清蛋白的功能特征維持血漿膠體滲透壓：血漿滲透壓的75%～80清蛋白的臨床評價低清蛋白血癥：Alb合成不足、Alb的分布異常、Alb過度丟失、Alb分解代謝增加、無清蛋白血癥(analbuminaemia)

血漿Alb增高：少見Alb的遺傳性變異由Alb含量估計其配體的存在形式和作用作為個體營養(yǎng)狀態(tài)的評價指標20清蛋白的臨床評價低清蛋白血癥：Alb合成不足、Alb的分布異＞35g/L正常28g/L～34g/L輕度缺乏21g/L～27g/L中度缺乏＜21g/L嚴重缺乏血漿Alb作為營養(yǎng)指標的評價標準21＞35g/L正常血漿Alb（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）394個氨基酸殘基組成；分子量51kD；pI為4.8含糖10%～12%在醋纖膜電泳中位于α1區(qū)帶主要由肝細胞合成，單核細胞、肺泡巨噬細胞和上皮細胞也能合成22（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）394個氨基酸殘（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）AAT具有多種遺傳表型，迄今已分離鑒定的有33種等位基因，其中最多見的是PiMM型，占人群的90%以上F型：fast（電泳遷移率快）,M型：middle（電泳遷移率中等）,S型：slow

（電泳遷移率慢）根據(jù)等位基因出現(xiàn)頻率的不同，缺陷變體可進一步分為常見和少見兩部分,最常見的缺陷變體為Z和S型,表現(xiàn)為：ZZ、SS、SZ、MZ、MS23（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）AAT具有多種遺α1-抗胰蛋白酶的臨床評價

AAT缺陷：PiZZ型、PiSS型甚至PiMS型常伴有早年（20歲～30歲）出現(xiàn)的肺氣腫低血漿AAT可發(fā)現(xiàn)于胎兒呼吸窘迫綜合征ZZ蛋白聚集在肝細胞，導致肝硬化24α1-抗胰蛋白酶的臨床評價AAT缺陷：24α1-抗胰蛋白酶的臨床評價PiZZ表型的新生兒中10%～20%在出生數(shù)周后易患肝炎，最后因活動性肝硬化致死PiZZ表型的某些成人會發(fā)生肝損害AAT增加：AAT屬急性時相蛋白，在炎癥、感染、腫瘤、肝病時均顯著增加25α1-抗胰蛋白酶的臨床評價PiZZ表型的新生兒中10%～20（四）α1-酸性糖蛋白（AAG）181個氨基酸殘基組成分子量約40kD；pI為2.7～3.5屬血漿中含糖量最高（達45%）、酸性最強的糖蛋白典型的急性時相反應蛋白α1-酸性糖蛋白是一種粘多糖與蛋白質(zhì)分子結合成的有耐熱功能的復合蛋白質(zhì)，主要在肝臟產(chǎn)生,某些腫瘤組織也可產(chǎn)生26（四）α1-酸性糖蛋白（AAG）181個氨基酸殘基組成26α1-酸性糖蛋白與粘蛋白氨基葡萄糖、氨基半乳糖、甘露糖、巖藻糖及唾液酸（sialicacid，涎酸）等均稱為粘多糖。Meyer將糖與蛋白質(zhì)的復合物以氨基己糖的含量進行分類，氨基己糖的含量大于4%的稱粘蛋白（因含糖量高而粘稠），小于4%的稱糖蛋白。因α1-酸性糖蛋白含糖量很高，曾被稱為血清類粘蛋白（orosomucoid，粘蛋白）。粘蛋白是第3版《規(guī)程》上的一個測定項目。進一步研究發(fā)現(xiàn)，α1-酸性糖蛋白只是血清類粘蛋白的一種主要成分，屬于體內(nèi)糖蛋白的一種。現(xiàn)在，一般將血清類粘蛋白統(tǒng)稱為糖蛋白。27α1-酸性糖蛋白與粘蛋白氨基葡萄糖、氨基半乳糖、甘露糖α1-酸性糖蛋白（AAG）的臨床評價目前主要作為急性時相反應指標：在風濕病、惡性腫瘤及心肌梗死等炎癥或組織壞死時一般增加3～4倍。AAG增高是活動性潰瘍性結腸炎最可靠的指標之一。28α1-酸性糖蛋白（AAG）的臨床評價②抗氧化作用，可防止組織中脂質(zhì)過氧化物和自由基的生成，特別在炎癥時具有重要意義缺點：不同蛋白質(zhì)與染料的結合力不一致，且試劑對比色杯有吸附作用。一、血漿蛋白質(zhì)的種類和生理功能監(jiān)測腎移植后的排斥反應等28g/L～34g/L輕度缺乏精密度好，CV%為0.③局部溫度降低。且尿酸和膽紅素在280nm附近也有干擾，故該法的準確性和特異性有限；第六節(jié)血清氨基酸測定含17個二硫鍵，是唯一不含糖的血漿蛋白質(zhì)嘧啶核苷酸從頭合成途徑中的酶缺陷可引起乳清酸尿癥，但臨床應用很少，故不在本章介紹。一、血漿蛋白質(zhì)的種類和生理功能蛋白質(zhì)是人體中含量和種類最多的物質(zhì)，蛋白質(zhì)占人體干重的45％，種類約有10萬之多。優(yōu)點：準確度高，回收率達101.含硫氨基酸的正常代謝苯丙氨酸的代謝紊亂苯丙氨酸的代謝紊亂檢測APRP有助于監(jiān)測炎癥進程和判斷治療反應，尤其是檢測那些升高最早和最多的蛋白質(zhì)。尿含有同型胱氨酸和其他含硫氨基酸如Met、甲硫氨酸硫氧化物和Cys的二硫化物和HCY。（三）各種痛風癥狀的發(fā)生機制甘氨酸、丙酸、羥化丙酸、甲基檸檬酸AAG增高糖皮質(zhì)激素增加，包括內(nèi)源性的庫欣綜合征和外源性強的松、地塞米松等藥物治療時，可引起AAG升高。AAG降低見營養(yǎng)不良、嚴重肝損害、腎病綜合征以及胃腸道疾病致蛋白嚴重丟失等情況。此外，雌激素也可使AAG降低。α1-酸性糖蛋白（AAG）的臨床評價29②抗氧化作用，可防止組織中脂質(zhì)過氧化物和自由基的生成，特別在（五）結合珠蛋白（haptoglobin，Hp）一種急性時相蛋白和轉(zhuǎn)運蛋白。在電泳中位于α2區(qū)帶。由α與β鏈形成α2β2四聚體，α鏈有α1及α2兩種，而α1又有α1F及α1S兩種遺傳變異體，兩種變異體僅為一個氨基酸殘基不同。30（五）結合珠蛋白（haptoglobin，Hp）一種急性時結合珠蛋白的功能特征運輸血管內(nèi)游離的血紅蛋白(Hb)到網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞降解，防止Hb從腎臟丟失而為機體有效地保留鐵，并能避免Hb對腎臟的損傷。31結合珠蛋白的功能特征運輸血管內(nèi)游離表型

亞單位的結構

組成Hp1-1

(α1F)2β2α1Fα1Sβ2(α1S)2β2分子量約為80kD，α鏈含氨基酸殘基83個，β鏈含氨基酸殘基245個Hp2-1

(α1Sα2β2)n(α1Fα2β2)n分子量為120kD~200kD的聚合體，由于n不同，可以在電泳中出現(xiàn)多條帶Hp2-2

（α2β)nn=3~8分子量為160kD~400kD，由于n不同，可在電泳中出現(xiàn)多條帶結合珠蛋白的遺傳表型32表型亞單位的組結合珠蛋白的臨床評價Hp下降：①溶血性疾病如溶血性貧血、輸血反應、瘧疾。Hp參考范圍較寬，須連續(xù)觀察溶血是否處于進行狀態(tài)。血管外溶血不會使Hp發(fā)生變化。②嚴重肝病患者，其Hp合成減少。Hp升高：屬急性時相反應蛋白，當燒傷和腎病綜合征情況下，血Hp常明顯升高。組合檢測項目包括血漿Hp、LD和游離Hb。33結合珠蛋白的臨床評價Hp下降：①溶血性疾病如溶血性貧血、輸血（六）α2-巨球蛋白（α2-MG或AMG）血漿中分子量最大的糖蛋白，約為725kD，含糖量約8%由肝細胞、單核細胞和星形細胞合成半壽期約5d包括補體C3和C4在內(nèi)的一組血漿蛋白的主要成員，為硫酯鍵血漿蛋白家族34（六）α2-巨球蛋白（α2-MG或AMG）血漿中分子量最大的α2-巨球蛋白的功能特征主要特性是能與多種離子和分子結合，特別是能與蛋白水解酶結合而抑制酶的活性，導致酶不易作用于大分子底物分子量小的蛋白質(zhì)，則能被α2-MG-蛋白酶復合物所催化水解。因此，α2-MG可選擇性地保護某些蛋白酶的活性35α2-巨球蛋白的功能特征主要特性是能與多種離子和分子結合，特不屬于急性時相反應蛋白α2-MG增高：低清蛋白血癥，尤其是腎病綜合征時，顯著增高α2-MG降低：嚴重的急性胰腺炎和進展型前列腺癌治療前α2-巨球蛋白的臨床評價36不屬于急性時相反應蛋白α2-巨球蛋白的臨床評價36（七）銅藍蛋白（ceruloplasmin,Cp）含銅的α2球蛋白由1046個氨基酸殘基組成含糖約8%~9.5%每分子結合6個～8個銅原子，由于含銅而呈藍色95%的血清銅存在于Cp中，其余5%呈可擴散狀態(tài)血循環(huán)中的Cp可認為是銅的無毒性代謝庫37（七）銅藍蛋白（ceruloplasmin,Cp）含銅銅藍蛋白的功能特征①能調(diào)節(jié)鐵的吸收和運輸，對多酚及多胺類底物有催化其氧化的能力，具有亞鐵氧化酶及胺氧化酶的活性②抗氧化作用，可防止組織中脂質(zhì)過氧化物和自由基的生成，特別在炎癥時具有重要意義38銅藍蛋白的功能特征①能調(diào)節(jié)鐵的吸收和運輸，對多酚及多胺類底物銅藍蛋白的臨床評價Cp濃度減少有關的疾病：包括Wilson病、營養(yǎng)性銅缺乏和Menkes病（遺傳性銅吸收不良）。屬于急性時相反應蛋白：在妊娠、感染、創(chuàng)傷和腫瘤時血漿濃度增加。但在營養(yǎng)不良、嚴重肝病及腎病綜合征時往往下降。39銅藍蛋白的臨床評價Cp濃度減少有關的疾病：包括Wilson病＜21g/L嚴重缺乏②作為肝功能不全的指標，在反映肝功能的損害與恢復方面的敏感性優(yōu)于清蛋白。現(xiàn)在，一般將血清類粘蛋白統(tǒng)稱為糖蛋白。（三）總蛋白測定方法學評價優(yōu)點：不需特殊設備、經(jīng)濟和操作簡單，而且采集在濾紙上的標本可以郵寄。目前臨床上特定蛋白質(zhì)多采用免疫比濁法測定，包括散射比濁法和透射比濁法，透射比濁法可在自動生化分析儀中測定，散射比濁法則通常需利用特定蛋白分析儀。酪氨酸轉(zhuǎn)變成兒茶酚胺激素α2-巨球蛋白的臨床評價氨基酸種類繁多，理化性質(zhì)相似，并同時存在于各種生物樣品中，因此檢測各個氨基酸時必須先將它們分離再分別檢測。可保留制劑的生物活性，多用于純化的血清清蛋白(pI4.生化異常：血漿同型胱氨酸(HCY的氧化形式)達到可檢測水平，血漿Met升高。28g/L～34g/L輕度缺乏妊娠時，則應使用治療本病的膳食，以免因再發(fā)高苯丙氨酸血癥而影響胎兒正常發(fā)育。α1-酸性糖蛋白（AAG）的臨床評價＞35g/L正常②肽鍵220～225nm強吸收峰：但太高而需要大量稀釋。2、氨基酸代謝紊亂分為原發(fā)性（遺傳性）和繼發(fā)性。

Wilson病的診斷標準定義：Wilson病是一種常染色體隱性遺傳病，即患者血漿Cp含量明顯減少，血漿游離銅增加，銅沉積在肝可引起肝硬化，沉積在腦基底節(jié)的豆狀核則導致豆狀核變性，因而該病又稱為肝豆狀核變性。Wilson病診斷標準：Cp下降，血清總銅濃度降低、游離銅增加和尿銅排泄增加，肝中銅的含量升高。40＜21g/L嚴重缺乏W（八）轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TRF）分子量約79.5kD；pI5.5～5.9；半壽期為7d為單鏈糖蛋白，含糖量約6%電泳位置在β區(qū)帶主要由肝細胞合成能可逆地結合多價陽離子，每分子TRF可結合2個Fe3+血漿中TRF的濃度受食物鐵供應的影響41（八）轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TRF）分子量約轉(zhuǎn)鐵蛋白的臨床評價用于貧血的鑒別診斷TRF在急性時相反應中含量往往降低。因此在炎癥、惡性病變時常隨著清蛋白、前清蛋白同時下降作為營養(yǎng)狀態(tài)的一項指標，在營養(yǎng)不良及慢性肝臟疾病時下降42轉(zhuǎn)鐵蛋白的臨床評價用于貧血的鑒別診斷42（九）C-反應蛋白（C-reactiveprotein，CRP）CRP是由肝細胞所合成的急性時相反應蛋白，含5個相同的亞單位，非共價地結合為盤形多聚體相對分子質(zhì)量為115kD～140kD循環(huán)中的CRP半壽期約19h，電泳分布在慢γ區(qū)帶，有時可以延伸到β區(qū)帶43（九）C-反應蛋白（C-reactiveprotein，CC-反應蛋白的臨床評價第一個被認識的急性時相反應蛋白，是急性時相反應的一個極靈敏指標結合臨床病史監(jiān)測疾病：如評估炎癥性疾病的活動度監(jiān)測系統(tǒng)性紅斑狼瘡、白血病和外科手術后并發(fā)的感染監(jiān)測腎移植后的排斥反應等44C-反應蛋白的臨床評價第一個被認識的急性時相反應蛋白，是急性四、急性時相反應蛋白

在急性炎癥性疾病如感染、手術、創(chuàng)傷、心肌梗死、惡性腫瘤等，血漿AAT、AAG、Hp、Cp、CRP，以及α1-抗糜蛋白酶、血紅素結合蛋白、C3、C4、纖維蛋白原等濃度顯著升高或升高；而血漿PA、Alb、TRF濃度則出現(xiàn)相應下降。這些血漿蛋白質(zhì)統(tǒng)稱為急性時相反應蛋白（acutephasereactionproteins，APRP）、急性時相反應蛋白（acutephaseproteins，APP），這種現(xiàn)象稱為急性時相反應（acutephasereaction，APR）。45四、急性時相反應蛋白在急性炎癥性疾各種APRP升高的速度不同，CRP和α1-抗糜蛋白酶首先升高，在12h內(nèi)AAG也升高，然后AAT、Hp、C4和纖維蛋白原升高，最后是C3和Cp升高，這些APRP通常在2d~5d內(nèi)達到最高值。檢測APRP有助于監(jiān)測炎癥進程和判斷治療反應，尤其是檢測那些升高最早和最多的蛋白質(zhì)。四、急性時相反應蛋白

返回章目錄46各種APRP升高的速度不同，CRP和α1-抗糜蛋白酶首先升高

第二節(jié)氨基酸代謝紊亂原發(fā)性氨基酸代謝紊亂：由于參與氨基酸代謝的酶或其他蛋白因子缺乏而引起的遺傳性疾病。繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂：由與氨基酸代謝有關的器官（如肝、腎）出現(xiàn)嚴重病變而導致。47第二節(jié)氨基酸代謝紊亂原發(fā)性氨基酸代謝紊亂：由于參與氨氨基酸血癥（aminoacidemia）：當酶缺乏出現(xiàn)在代謝途徑的起點時，其作用的氨基酸將在血循環(huán)中增加。氨基酸尿癥（aminoaciduria）：升高的氨基酸從尿中排出。48氨基酸血癥（aminoacidemia）：當酶缺乏出現(xiàn)在代謝遺傳性氨基酸代謝紊亂及血、尿的檢測結果遺傳性氨基酸代謝紊亂名稱缺乏的酶血中升高的成分尿中升高的成分苯丙酮酸尿癥苯丙氨酸羥化酶苯丙氨酸、苯丙酮酸苯丙氨酸、苯丙酮酸Ⅰ型酪氨酸血癥延胡索酰乙酰乙酸水解酶酪氨酸、甲硫氨酸酪氨酸、對-羥苯丙酮酸等尿黑酸尿癥尿黑酸氧化酶尿黑酸（輕度）尿黑酸同型胱氨酸尿癥胱硫醚--合酶同型胱氨酸、甲硫氨酸胱硫醚尿癥-胱硫醚酶胱硫醚胱硫醚及其代謝產(chǎn)物組氨酸血癥組氨酸酶組氨酸、丙氨酸咪唑、丙酮酸和組氨酸代謝產(chǎn)物甘氨酸血癥甘氨酸裂解酶系統(tǒng)受阻甘氨酸槭糖漿尿癥(支鏈酮酸尿癥)支鏈酮酸脫羧酶亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸和相應的酮酸丙酸尿癥丙酰CoA羧化酶甘氨酸甘氨酸、丙酸、羥化丙酸、甲基檸檬酸49遺傳性氨基酸代謝紊亂及血、尿的檢測結果遺傳性氨基酸缺乏的酶血一、原發(fā)性氨基酸代謝紊亂（一）苯丙酮酸尿癥苯丙酮酸尿癥（phenylketonuria，PKU）是主要由苯丙氨酸羥化酶缺乏引起的常染色體隱性遺傳病，因患兒尿液中排出大量的苯丙酮酸等代謝產(chǎn)物而得名。50一、原發(fā)性氨基酸代謝紊亂（一）苯丙酮酸尿癥苯丙氨酸+O2酪氨酸+H2O苯丙氨酸羥化酶四氫生物蝶呤二氫生物蝶呤NADPH+H+NADP+苯丙氨酸的正常代謝苯丙氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)槔野彼岬倪^程51苯丙氨酸+O2酪氨酸+H2O苯丙氨酸羥化酶四氫生物蝶當出現(xiàn)遺傳性苯丙氨酸羥化酶缺乏或不足時，苯丙氨酸不能正常轉(zhuǎn)變成酪氨酸，在體內(nèi)蓄積，并可經(jīng)轉(zhuǎn)氨基作用生成苯丙酮酸等代謝產(chǎn)物。1.苯丙氨酸的代謝紊亂52當出現(xiàn)遺傳性苯丙氨酸羥化酶缺乏或不足2.苯丙酮酸尿癥的臨床表現(xiàn)及治療PKU患者有智力缺陷。PKU患者還表現(xiàn)有毛發(fā)和皮膚色素較正常人略淺。患兒在出生后3月內(nèi)就需用低苯丙氨酸膳食（如低苯丙氨酸的奶粉）治療即飲食治療。治療最少要堅持到10歲，甚至終生。在停止飲食治療前需作負荷試驗。若腦電圖正常，則可停止飲食治療。女性在幼時若治療恰當，可正常生長發(fā)育。妊娠時，則應使用治療本病的膳食，以免因再發(fā)高苯丙氨酸血癥而影響胎兒正常發(fā)育。532.苯丙酮酸尿癥的臨床表現(xiàn)及治療PKU患者有智力缺陷。（二）酪氨酸血癥1.酪氨酸的正常分解代謝和轉(zhuǎn)變正常情況下酪氨酸在酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶的催化下，生成對羥苯丙酮酸，進一步氧化生成尿黑酸、最終轉(zhuǎn)變?yōu)檠雍魉岷鸵阴Ｒ宜幔缓蠓謩e進入糖和脂肪酸的代謝途徑。54（二）酪氨酸血癥1.酪氨酸的正常分解代謝和轉(zhuǎn)變

酪氨酸先轉(zhuǎn)變?yōu)槎喟停?jīng)多巴脫羧酶作用后轉(zhuǎn)變?yōu)槎喟桶罚缓笊赡I上腺素和去甲腎上腺素。通常把多巴胺、腎上腺素和去甲腎上腺素等含有鄰苯二酚的激素統(tǒng)稱為兒茶酚胺類激素。酪氨酸轉(zhuǎn)變成兒茶酚胺激素

55酪氨酸先轉(zhuǎn)變?yōu)槎喟停?jīng)多巴脫羧酶作用后轉(zhuǎn)酪氨酸先轉(zhuǎn)變?yōu)槎喟停谄つw黑色素細胞中多巴經(jīng)氧化、脫羧等反應轉(zhuǎn)變成吲哚5,6醌，吲哚醌可聚合生成黑色素。酪氨酸酶（tyrosinase）缺乏，酪氨酸則不能轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏兀瑢е掳谆。╝lbinism），患者表現(xiàn)為白色頭發(fā)、淺色皮膚和灰藍色眼睛等。酪氨酸轉(zhuǎn)變成黑色素

56酪氨酸先轉(zhuǎn)變?yōu)槎喟停谄つw黑色素細胞中多巴經(jīng)氧化、脫羧等反應2.酪氨酸血癥——Ⅰ型（tyrosinemiaⅠ）原因：酪氨酸分解途徑中的延胡索酰乙酰乙酸水解酶活性降低。該癥可出現(xiàn)：血和尿中酪氨酸水平增加；血中甲硫氨酸濃度升高；尿中排出大量多巴和其他酪氨酸代謝物。572.酪氨酸血癥——Ⅰ型（tyrosinemiaⅠ）原

I型酪氨酸血癥又稱肝腎型酪氨酸血癥，急性患者有肝大、肝細胞脂肪浸潤或壞死，如未治，常在1歲前死于肝功能衰竭。慢性患者可有肝纖維化、肝硬化、甚至發(fā)生肝癌，癥狀較輕，常在10歲前死亡。酪氨酸血癥——Ⅰ型（tyrosinemiaⅠ）58I型酪氨酸血癥又稱肝腎型酪氨酸血癥，急性酪氨3.酪氨酸血癥——Ⅱ型（tyrosinemiaⅡ）

原因：肝細胞液酪氨酸轉(zhuǎn)氨酶缺乏。血中和尿中酪氨酸水平升高，尿中酚酸和酪胺濃度增加。Ⅱ型病罕見。與Ⅰ型不同的是：血中甲硫氨酸不升高。593.酪氨酸血癥——Ⅱ型（tyrosinemiaⅡ（三）含硫氨基酸代謝紊亂1.含硫氨基酸的正常代謝

甲硫氨酸S-腺苷同型半胱氨酸S-腺苷甲硫氨酸同型半胱氨酸FH4N5—CH3—FH4N5—CH3—FH4轉(zhuǎn)甲基酶(VitB12)H2O腺苷RHATPPPi+PiR-CH360（三）含硫氨基酸代謝紊亂1.含硫氨基酸的正常代謝甲硫氨酸（1）同型胱氨酸尿癥（homocystinuria）是最常見的以HCY（同型半胱氨酸）增高為特征的代謝紊亂。胱硫醚-β-合成酶缺失(常見)。體液HCY及其前體積聚，Cys和胱氨酸下降。生化異常：血漿同型胱氨酸(HCY的氧化形式)達到可檢測水平，血漿Met升高。尿含有同型胱氨酸和其他含硫氨基酸如Met、甲硫氨酸硫氧化物和Cys的二硫化物和HCY。N5-甲基四氫葉酸轉(zhuǎn)甲基酶缺失(罕見)。血漿Met不升高。2.同型半胱氨酸代謝紊亂61（1）同型胱氨酸尿癥（homocystinuria）是最常見（2）同型半胱氨酸與心血管疾病

——

HCY水平檢測適宜人群血脂正常，膽固醇不高的人群。有嚴重AS性疾病和家族史人群。有早期(＜50歲)冠心病、腦血管或外周血管病癥狀的人群。服用氨甲喋呤、氨茶堿、苯妥英等人群中HCY升高的比例較高，有進一步引發(fā)血管疾病的可能，需要聯(lián)合考慮。62（2）同型半胱氨酸與心血管疾病血脂正常，膽固醇不高的人群。6二、繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂

主要發(fā)生在肝臟和腎臟疾患（蛋白質(zhì)營養(yǎng)紊亂）以及燒傷等：肝功能衰竭和氨基酸代謝失衡腎臟疾病返回章目錄63二、繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂主要發(fā)生在肝臟和腎臟疾患（蛋

第三節(jié)核苷酸代謝紊亂核苷酸是核酸的基本組成單位。嘌呤核苷酸合成和分解中最多見的代謝紊亂是高尿酸血癥，并由此導致痛風。嘧啶核苷酸從頭合成途徑中的酶缺陷可引起乳清酸尿癥，但臨床應用很少，故不在本章介紹。64第三節(jié)核苷酸代謝紊亂核嘌呤核苷酸從頭合成途徑合成原料:CO2、甲酰基、氨基酸等合成場所:肝細胞的胞液合成過程:包括兩個階段①次黃嘌呤核苷酸(IMP)的合成②腺苷酸（AMP）和鳥苷酸（GMP）的合成一、嘌呤核苷酸的代謝65嘌呤核苷酸從頭合成途徑合成原料:CO2、甲酰基、氨基酸等一嘌呤核苷酸從頭合成途徑66嘌呤核苷酸從頭合成途徑66嘌呤核苷酸補救合成途徑67嘌呤核苷酸補救合成途徑67嘌呤核苷酸分解68嘌呤核苷酸分解68二、高尿酸血癥

由尿酸排泄障礙或嘌呤代謝紊亂引起。人體內(nèi)缺乏尿酸酶，尿酸無法再分解，通過腎臟排出體外。體液尿酸濃度的高低取決于體內(nèi)嘌呤合成量、食入量和尿酸排出量之間的平衡狀態(tài)。腎臟尿酸排泄減少或體內(nèi)嘌呤來源過多均可導致高尿酸血癥。69二、高尿酸血癥由尿酸排泄障礙或嘌呤代謝紊亂引起。69高尿酸血癥的原因原發(fā)性:原發(fā)性腎臟排泄尿酸減少原發(fā)性尿酸產(chǎn)生過多繼發(fā)性:各種腎臟疾病導致嘌呤分解過多疾病70高尿酸血癥的原因原發(fā)性:70三、痛風的發(fā)生機制

痛風（gout）是一組嘌呤代謝紊亂所致的疾病，由遺傳性和（或）獲得性的尿酸排泄減少和（或）嘌呤代謝障礙，導致高尿酸血癥及尿酸鹽結晶形成和沉積，從而引起特征性急性關節(jié)炎、痛風石、間質(zhì)性腎炎，嚴重者呈關節(jié)畸形及功能障礙；常伴尿酸性尿路結石。僅有高尿酸血癥，即使合并尿酸性結石也不稱之為痛風。（一）痛風的概念

71三、痛風的發(fā)生機制痛風（gout）是一組嘌（二）尿酸結晶與痛風

血漿中尿酸鹽以單鈉尿酸鹽形式存在，其溶解度很低，當血液pH為7.4時，尿酸鈉的溶解度約為420μmol/L，超過此濃度時血漿尿酸已成過飽和狀態(tài)。72（二）尿酸結晶與痛風血漿中尿酸鹽以單鈉（二）尿酸結晶與痛風

當濃度>480μmol/L持久不降，如遇下列情況可使尿酸鈉呈微小結晶析出：①血漿清蛋白及α1、α2球蛋白減少；②局部pH降低；③局部溫度降低。73（二）尿酸結晶與痛風當濃度>480（三）各種痛風癥狀的發(fā)生機制1.急性關節(jié)炎：由尿酸鈉結晶沉積于關節(jié)腔內(nèi)引起，常是痛風的首發(fā)癥狀，最易受累部位是跖趾關節(jié)。2.痛風石：是痛風特征性損害。74（三）各種痛風癥狀的發(fā)生機制1.急性關節(jié)炎：由尿酸鈉結晶沉（三）各種痛風癥狀的發(fā)生機制3.間質(zhì)性腎炎：是腎髓質(zhì)或乳頭處有尿酸鹽結晶，其周圍有圓形細胞和巨大細胞反應，慢性間質(zhì)性炎癥導致腎小管變形、上皮細胞壞死、萎縮、纖維化、硬化、管腔閉塞，進而累及腎小球血管床。返回章目錄75（三）各種痛風癥狀的發(fā)生機制3.間質(zhì)性腎炎：是腎髓質(zhì)或乳第四節(jié)血清蛋白質(zhì)測定

（一）血清總蛋白測定方法學概述凱氏定氮法：參考方法雙縮脲法：是臨床測定血清總蛋白首選的常規(guī)方法

酚試劑法紫外吸收法染料結合法：氨基黑、麗春紅、考馬斯亮藍、鄰苯三酚紅鉬一、血清總蛋白測定76第四節(jié)血清蛋白質(zhì)測定（一）血清總蛋白測定方法學概述凱氏（二）血清總蛋白雙縮脲法測定原理血清中蛋白質(zhì)的兩個相鄰肽鍵（-CO-NH-）在堿性溶液中能與二價銅離子作用產(chǎn)生穩(wěn)定的紫色絡合物。生成的紫色絡合物顏色的深淺與血清蛋白質(zhì)含量成正比，故可用來測定蛋白質(zhì)含量。77（二）血清總蛋白雙縮脲法測定原理血（三）總蛋白測定方法學評價

凱氏定氮法優(yōu)點：準確度高，回收率達101.54%；精密度好，CV%為0.85%缺點：操作流程長，程序復雜。各種蛋白質(zhì)含氮量在疾病狀態(tài)差異較大，等該法主要用作血清蛋白質(zhì)標準品定值及參考性工作，血清總蛋白常規(guī)測定中很少使用。78（三）總蛋白測定方法學評價凱氏定氮法優(yōu)點：準確度高，回收（三）總蛋白測定方法學評價

雙縮脲法優(yōu)點：顯色穩(wěn)定性好，干擾物質(zhì)少，試劑單一，方法簡便缺點：靈敏度較低干擾物質(zhì)：主要為右旋糖酐，其與反應混合液中的銅和酒石酸結合形成沉淀，影響測定結果的準確度。此外膽紅素、血紅蛋白、脂濁、某些抗菌素和銨鹽等也可干擾結果。79（三）總蛋白測定方法學評價雙縮脲法優(yōu)點：顯色穩(wěn)定性好，干擾優(yōu)點：呈色靈敏度較高，達到雙縮脲法的100倍左右，有利于檢出較微量的蛋白質(zhì)。缺點：費時較長，試劑配制復雜，且專一性較差，大部分具有還原性的物質(zhì)均有不同程度的干擾作用。酚試劑法（三）總蛋白測定方法學評價

80優(yōu)點：呈色靈敏度較高，達到雙縮脲法的100倍左右，有利于檢出優(yōu)點：簡便而常用，因未加任何試劑和處理，可保留制劑的生物活性，多用于純化的蛋白質(zhì)樣品。缺點：準確性不如雙縮脲法，因而不能作為常規(guī)方法廣泛使用。紫外吸收法（三）總蛋白測定方法學評價

①芳香族氨基酸280nm吸收峰：但因為各種蛋白質(zhì)中芳香族氨基酸的含量與比例不同而有較大差異；且尿酸和膽紅素在280nm附近也有干擾，故該法的準確性和特異性有限；高度靈敏要稀釋。②肽鍵220～225nm強吸收峰：但太高而需要大量稀釋。81優(yōu)點：簡便而常用，因未加任何試劑和處理，紫外吸收法（三）總蛋氨基黑、麗春紅常作為血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳或瓊脂糖凝膠電泳的染料。染料結合法測定方法學評價

82氨基黑、麗春紅常作為血清蛋白醋酸纖維考馬斯亮藍常用于需更高呈色靈敏度的蛋白電泳中，也可用于測定尿液、腦脊液等的蛋白質(zhì)。優(yōu)點：簡便、快速、靈敏。缺點：不同蛋白質(zhì)與染料的結合力不一致，且試劑對比色杯有吸附作用。染料結合法測定方法學評價

83考馬斯亮藍常用于需更高呈色靈敏度的蛋白鄰苯三酚紅鉬可用于測定尿液、腦脊液等蛋白質(zhì)，該法克服了考馬斯亮藍法易吸附于比色杯的缺點，具有簡便、穩(wěn)定等優(yōu)點，可用于自動化分析儀。染料結合法測定方法學評價

84鄰苯三酚紅鉬可用于測定尿液、腦脊液等染料結合法——國內(nèi)最常用方法是溴甲酚綠（bromcresolgreen，BCG）法，還有溴甲酚紫（bromcresolpurple,BCP）法。BCP法比BCG法受其他血漿蛋白的干擾少，但靈敏度較低，且與非人源性清蛋白結合力相當弱，不適合于測定動物樣本中的清蛋白，故BCP法臨床應用較少。電泳法免疫法（免疫擴散法、免疫比濁法和RIA）電化學測定法（一）血清清蛋白測定方法學概述二、血清清蛋白測定85染料結合法——國內(nèi)最常用方法是溴甲酚綠（bromcresol（二）溴甲酚綠法測定血清清蛋白

血清清蛋白(pI4.7)在pH4.2的緩沖液中帶正電荷，在有非離子型表面活性劑存在時，可與帶負電荷的染料BCG結合形成藍綠色復合物，其顏色深淺與清蛋白濃度成正比。86（二）溴甲酚綠法測定血清清蛋白血（三）血清清蛋白測定方法學評價BCG法靈敏度高、操作簡便、重復性好，既可用作手工操作也可自動分析。該法存在問題較多，主要是試劑標準化、標準品的選用、反應時間等，如不嚴格掌握，將會對測定結果造成嚴重影響。

反應時間：要求血清清蛋白的測定在30s內(nèi)完成（快反應），30s后球蛋白的非特異性反應增高。87（三）血清清蛋白測定方法學評價BCG法靈敏度高、操作簡便、三、特定蛋白質(zhì)的測定血清中的蛋白質(zhì)因為都是由氨基酸組成，性質(zhì)相似，故除清蛋白等少數(shù)蛋白質(zhì)有某種特性可利用，因而能使用染料結合法等方法測定外，其他都需制備特異的抗血清，可采用免疫比濁法、免疫擴散法、化學發(fā)光免疫法、放射免疫法等方法測定。88三、特定蛋白質(zhì)的測定血清中的蛋白質(zhì)目前臨床上特定蛋白質(zhì)多采用免疫比濁法測定，包括散射比濁法和透射比濁法，透射比濁法可在自動生化分析儀中測定，散射比濁法則通常需利用特定蛋白分析儀。特定蛋白質(zhì)的測定方法返回章目錄89目前臨床上特定蛋白質(zhì)多采用免疫比濁法測第五節(jié)血清蛋白質(zhì)電泳分析

一、血清蛋白質(zhì)電泳原理：電泳利用血清蛋白質(zhì)各種組分所帶電荷性質(zhì)、電荷數(shù)量以及相對分子質(zhì)量的不同，在同一電場的作用下，各組分泳動的方向和速率也各不相同。因此，在一定時間內(nèi)各組分泳動的距離也不同，從而達到分離鑒定的目的，然后經(jīng)染色洗脫比色或掃描等方法求得血清各組分蛋白質(zhì)的含量。90第五節(jié)血清蛋白質(zhì)電泳分析一、血清蛋白質(zhì)電泳醋酸纖維素薄膜電泳臨床常規(guī)檢測項目瓊脂糖凝膠電泳血清蛋白質(zhì)的分離通常采用低壓電泳：100V～500V，電泳時間較長。臨床檢測蛋白質(zhì)最常用的染色劑是麗春紅，其具有很高的靈敏度，通過掃描光密度儀對染色的凝膠進行掃描也可以進行定量分析，確定樣品中不同蛋白質(zhì)的相對含量。91醋酸纖維素薄膜電泳血清蛋白質(zhì)二、免疫固定電泳原理：免疫固定電泳包括瓊脂糖凝膠蛋白電泳和免疫沉淀兩個過程的操作。先利用電泳將蛋白質(zhì)分離，再加入已知相應單價抗血清，當抗體與其區(qū)帶中的單克隆免疫球蛋白結合后，便形成抗原－抗體復合物，從而被固定，通過漂洗和染色，呈現(xiàn)狹窄但濃染的區(qū)帶。92二、免疫固定電泳原理：免疫固定電泳免疫固定電泳分離檢測血清蛋白對多發(fā)性骨髓瘤、Waldenstrom巨球蛋白血癥、分泌型骨髓瘤、輕鏈病、重鏈病等的診斷和研究有較高價值。返回章目錄93免疫固定電泳分離檢測血清蛋白對多發(fā)性骨第六節(jié)血清氨基酸測定氨基酸種類繁多，理化性質(zhì)相似，并同時存在于各種生物樣品中，因此檢測各個氨基酸時必須先將它們分離再分別檢測。40年代出現(xiàn)了離子交換樹脂層析分離法；50年代末又出現(xiàn)了自動裝置，隨著技術的進步，分析一個樣品的時間從一周減少到一小時左右，同時樣品用量也從mmol減少到nmol，使靈敏度提高千、萬倍，從而使全自動氨基酸分析儀在臨床醫(yī)學中發(fā)揮作用。94第六節(jié)血清氨基酸測定氨基酸主要由五個部分組成，即色譜系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、加樣系統(tǒng)、控制系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)70年代以后檢測系統(tǒng)中的比色計有的被熒光計所取代。所用的熒光試劑是鄰苯二醛，它可檢出pmol水平的氨基酸，但亞氨基酸不發(fā)生反應，必須加入某些氧化劑（如次氯酸鈉）后才發(fā)生熒光反應，使儀器結構復雜化一、自動分析法——氨基酸自動分析儀95主要由五個部分組成，即色譜系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、加樣系統(tǒng)、控制系統(tǒng)紙層析優(yōu)點：不需特殊設備、經(jīng)濟和操作簡單，而且采集在濾紙上的標本可以郵寄。缺點：靈敏度低、分辨率差和費時。

二、氨基酸的紙層析和薄層層析

近幾年紙層析已逐漸由速度快、分離效率高的薄層層析代替。96紙層析二、氨基酸的紙層析和薄層層析近幾年紙層尿液總氨基酸量測定——磷酸銅試劑法色氨酸測定尿羥脯氨酸測定三、氨基酸的化學法測定

97尿液總氨基酸量測定——磷酸銅試劑法三、氨基酸的化學法測定四、氨基酸的酶法分析

苯丙氨酸測定酪氨酸測定支鏈氨基酸測定谷氨酰胺測定98四、氨基酸的酶法分析苯丙氨酸測定98苯丙氨酸苯丙氨酸氧化酶H2O2+4-氨基安替比林+N，N’-二甲苯胺生成醌亞胺550nmNADH+H+苯丙氨酸NAD+苯丙氨酸脫氫酶苯丙酮酸苯丙氨酸的酶法分析①②340nm99苯丙氨酸苯丙氨酸氧化酶H2O2+4-氨基安替比林+550nm支鏈氨基酸的酶法分析相應酮酸LeuIleVal亮氨酸脫氫酶NADH+H+NAD+340nm100支鏈氨基酸的酶法分析相應酮酸Leu亮氨酸脫氫酶NADH+Hα-酮戊二酸谷氨酰胺的酶法分析GlnNH3谷氨酰胺酶GluNAD+谷氨酸脫氫酶NADH+H+340nm返回章目錄101α-酮戊二酸谷氨酰胺的酶法分析GlnNH3谷氨酰胺酶Glu

1、血漿蛋白質(zhì)異常可反映許多病理情況，如某些疾病時血清蛋白電泳區(qū)帶可出現(xiàn)特征性改變，其中腎病綜合征、肝硬化較多見，且具有特征性，在臨床上診斷意義最大。

2、氨基酸代謝紊亂分為原發(fā)性（遺傳性）和繼發(fā)性。遺傳性多數(shù)是缺乏某種酶引起。繼發(fā)性主要發(fā)生在肝臟和腎臟疾患等。

3、嘌呤核苷酸的代謝終產(chǎn)物是尿酸，腎臟尿酸排泄障礙，或嘌呤的合成、吸收和分解代謝發(fā)生紊亂，均可導致高尿酸血癥。【小結】1021、血漿蛋白質(zhì)異常可反映許多病理情況，如某些疾病時血清

4、臨床上血清總蛋白用雙縮脲法測定，血清清蛋白多用BCG法，血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳越來越多地使用于全自動電泳儀，特定蛋白質(zhì)目前臨床上多采用免疫比濁法測定，包括散射比濁法和透射比濁法。利用氨基酸自動分析儀或高效液相色譜儀可檢測出血液中的各種氨基酸，個別的血液中氨基酸可用化學法和酶法測定。【小結】1034、臨床上血清總蛋白用雙縮脲法測定，血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的代謝紊亂血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的代謝紊亂（優(yōu)選）血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的代謝紊亂（優(yōu)選）血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的代謝紊亂目錄

血漿蛋白質(zhì)及其代謝紊亂1氨基酸代謝紊亂2嘌呤核苷酸代謝紊亂3血清蛋白質(zhì)測定4血清蛋白質(zhì)電泳分析5血清氨基酸測定6小結與展望7返回總目錄106目錄血漿蛋白質(zhì)及其代謝紊亂1氨基酸代謝紊亂2嘌呤核苷第一節(jié)血漿蛋白質(zhì)及其代謝紊亂蛋白質(zhì)是人體中含量和種類最多的物質(zhì)，蛋白質(zhì)占人體干重的45％，種類約有10萬之多。幾乎在所有的生理過程中蛋白質(zhì)都起著關鍵作用。血漿蛋白質(zhì)是血漿固體成分中含量最多的一類化合物，目前所了解的血漿蛋白質(zhì)約有500種。107第一節(jié)血漿蛋白質(zhì)及其代謝紊亂蛋一、血漿蛋白質(zhì)的種類和生理功能

（一）血漿蛋白質(zhì)的種類——電泳分類法

可將血清蛋白質(zhì)分為清蛋白、α1、α2、β、γ球蛋白5條主要區(qū)帶。

正常血清蛋白電泳圖譜示意圖及其掃描曲線108一、血漿蛋白質(zhì)的種類和生理功能（一）血漿蛋白質(zhì)的種類——電血漿蛋白質(zhì)的種類——功能分類法運輸載體類補體蛋白類免疫球蛋白類凝血蛋白類蛋白酶抑制物蛋白類激素109血漿蛋白質(zhì)的種類——功能分類法6（二）血漿蛋白質(zhì)的生理功能①營養(yǎng)作用，修補組織蛋白；②維持血漿膠體滲透壓；③作為激素、維生素、脂類、代謝產(chǎn)物、離子、藥物等的載體；④作為血液pH緩沖系統(tǒng)的一部分；⑤抑制組織蛋白酶；110（二）血漿蛋白質(zhì)的生理功能①營養(yǎng)作用，修補組織蛋白；7（二）血漿蛋白質(zhì)的生理功能⑥一些酶在血漿中起催化作用；⑦代謝調(diào)控作用；⑧參與凝血與纖維蛋白溶解；⑨作為免疫球蛋白與補體等免疫分子組成體液免疫防御系統(tǒng)。111（二）血漿蛋白質(zhì)的生理功能⑥一些酶在血漿中起催化作用；8痛風石：是痛風特征性損害。此外，雌激素也可使AAG降低。α1-酸性糖蛋白（AAG）的臨床評價21g/L～27g/L中度缺乏二、繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂嘌呤核苷酸從頭合成途徑分子量為120kD~200kD的聚合體，由于n不同，可以在電泳中出現(xiàn)多條帶因α1-酸性糖蛋白含糖量很高，曾被稱為血清類粘蛋白（orosomucoid，粘蛋白）。α1-酸性糖蛋白是一種粘多糖與蛋白質(zhì)分子結合成的有耐熱功能的復合蛋白質(zhì)，主要在肝臟產(chǎn)生,某些腫瘤組織也可產(chǎn)生優(yōu)點：不需特殊設備、經(jīng)濟和操作簡單，而且采集在濾紙上的標本可以郵寄。血脂正常，膽固醇不高的人群。各種蛋白質(zhì)含氮量在疾病狀態(tài)差異較大，等由肝細胞、單核細胞和星形細胞合成（2）同型半胱氨酸與心血管疾病②腺苷酸（AMP）和鳥苷酸（GMP）的合成＜21g/L嚴重缺乏（二）溴甲酚綠法測定血清清蛋白與Ⅰ型不同的是：血中甲硫氨酸不升高。（一）血清蛋白電泳的正常圖譜血清蛋白電泳（serumproteinelectrophoresis，SPE）正常圖譜，由正極到負極可依次分為清蛋白、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β-球蛋白、γ-球蛋白五個區(qū)帶。二、血清蛋白質(zhì)電泳組分的臨床分析112痛風石：是痛風特征性損害。（一）血清蛋白電泳的正常圖譜（二）血清蛋白電泳的異常圖譜血清蛋白電泳異常圖譜分型血清蛋白電泳典型異常圖譜漿細胞病與M蛋白113（二）血清蛋白電泳的異常圖譜血清蛋白電泳異常圖譜分型10（一）血清蛋白電泳異常圖譜分型圖譜類型TPAlbα1α2βγ低蛋白血癥型↓↓↓↓N↑N↓N↑腎病型↓↓↓↓N↑↑↑↑↓N↑肝硬化型N↓↑↓↓N↓N↓β-γ↑（融合）彌漫性肝損害型N↓↓↓↑↓↑慢性炎癥型↓↑↑↑急性時相反應型N↓N↑↑NM蛋白血癥型在α-γ區(qū)帶中出現(xiàn)M蛋白區(qū)帶高α2(β)-球蛋白血癥型↓↑↑↑妊娠型↓N↓↑↑N蛋白質(zhì)缺陷型個別區(qū)帶出現(xiàn)特征性缺乏114（一）血清蛋白電泳異常圖譜分型圖譜類型TPAlbα1α2βγ（二）血清蛋白電泳典型異常圖譜

A.

正常電泳圖B.雙清蛋白血癥

C.

清蛋白缺乏癥

D.腎病綜合征

E.肝硬化（β-γ橋）

F.急性炎癥

115（二）血清蛋白電泳典型異常圖譜A.正常電泳圖B.雙清（三）漿細胞病與M蛋白正常血清蛋白電泳上顯示的寬γ區(qū)帶主要成分：免疫球蛋白。發(fā)生漿細胞病（plasmacelldyscrasia）時，異常漿細胞克隆增殖，產(chǎn)生大量單克隆免疫球蛋白或其輕鏈或重鏈片段，病人血清或尿液中可出現(xiàn)結構單一的M蛋白，在蛋白電泳時呈現(xiàn)一個色澤深染的窄區(qū)帶，此區(qū)帶較多出現(xiàn)在γ或β區(qū)，偶見于α區(qū)。116（三）漿細胞病與M蛋白正常血清蛋白電泳上顯示的寬γ區(qū)帶主要成漿細胞病的電泳圖電泳條帶由上至下依次為Alb,α1,α2,β,γ區(qū)帶箭頭所指為可疑M區(qū)帶血清蛋白電泳圖可疑M區(qū)帶117漿細胞病的電泳圖電泳條帶由上至下依次為Alb,α1,α2血漿蛋白質(zhì)的性質(zhì)功能及其與電泳區(qū)帶的關系電泳區(qū)帶蛋白質(zhì)種類成人參考范圍（g/L）半壽期（d）分子量（kD）等電點含糖量(%)功能前清蛋白前清蛋白0.2~0.41.9554.70.5營養(yǎng)、運載清蛋白清蛋白35~5215~1966.24~5.80維持膠壓、運載和營養(yǎng)等α1-球蛋白α1-抗胰蛋白酶0.9~2.04524.812蛋白酶抑制劑α1-酸性糖蛋白0.5~1.25402.7~3.545免疫應答修飾劑甲胎蛋白3×10－569胎兒期蛋白高密度脂蛋白1.7~3.25200膽固醇逆轉(zhuǎn)運α2-球蛋白結合珠蛋白0.3~2.0285~4004.112結合血紅蛋白α2-巨球蛋白1.3~3.057205.48蛋白酶抑制劑銅藍蛋白0.1~0.44.51324.4鐵氧化酶β-球蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白2.0~3.6779.65.76運鐵到胞內(nèi)低密度脂蛋白0.6~1.55300運膽固醇到組織C30.9~1.81852補體成分C40.1~0.42067補體成分β2-微球蛋白0.001~0.00211.8纖維蛋白原2.0~4.02.53405.53凝血因子γ-球蛋白IgG7.0~1624144~1506~7.33免疫球蛋白IgA0.7~4.06~1608免疫球蛋白IgM0.4~2.3597012免疫球蛋白C-反應蛋白＜5~1156.20炎癥介質(zhì)118血漿蛋白質(zhì)的性質(zhì)功能及其與電泳區(qū)帶的關系電泳區(qū)帶蛋白質(zhì)種類成根據(jù)等位基因出現(xiàn)頻率的不同，缺陷變體可進一步分為常見和少見兩部分,最常見的缺陷變體為Z和S型,表現(xiàn)為：ZZ、SS、SZ、MZ、MS血管外溶血不會使Hp發(fā)生變化。（一）前清蛋白（prealbumin，PA）監(jiān)測腎移植后的排斥反應等血清蛋白電泳典型異常圖譜主要由肝細胞合成，單核細胞、肺泡巨噬細胞和上皮細胞也能合成Hp參考范圍較寬，須連續(xù)觀察溶血是否處于進行狀態(tài)。四、急性時相反應蛋白作為營養(yǎng)狀態(tài)的一項指標，在營養(yǎng)不良及慢性肝臟疾病時下降血漿中含量最多的蛋白質(zhì)AAT缺陷：酪氨酸酶（tyrosinase）缺乏，酪氨酸則不能轉(zhuǎn)變?yōu)楹谏兀瑢е掳谆。╝lbinism），患者表現(xiàn)為白色頭發(fā)、淺色皮膚和灰藍色眼睛等。但在營養(yǎng)不良、嚴重肝病及腎病綜合征時往往下降。（三）各種痛風癥狀的發(fā)生機制發(fā)生漿細胞病（plasmacelldyscrasia）時，異常漿細胞克隆增殖，產(chǎn)生大量單克隆免疫球蛋白或其輕鏈或重鏈片段，病人血清或尿液中可出現(xiàn)結構單一的M蛋白，在蛋白電泳時呈現(xiàn)一個色澤深染的窄區(qū)帶，此區(qū)帶較多出現(xiàn)在γ或β區(qū)，偶見于α區(qū)。一種急性時相蛋白和轉(zhuǎn)運蛋白。＜21g/L嚴重缺乏第六節(jié)血清氨基酸測定21g/L～27g/L中度缺乏四、急性時相反應蛋白三、血漿蛋白質(zhì)及其異常分析（一）前清蛋白（prealbumin，PA）PA的主要功能：作為組織修補材料和運載蛋白，參與T3、T4、維生素A的運輸。PA是負性急性時相反應蛋白，在急性炎癥、惡性腫瘤、創(chuàng)傷等任何急需合成蛋白質(zhì)的情況下，血清PA均迅速下降。119根據(jù)等位基因出現(xiàn)頻率的不同，缺陷變體可進一步分為常見和少見兩前清蛋白的臨床評價PA在臨床上可以：①作為營養(yǎng)不良的指標，其評價標準是：PA200mg/L～400mg/L為正常，100mg/L～150mg／L輕度缺乏，50mg/L～100mg／L中度缺乏，＜50mg／L嚴重缺乏；②作為肝功能不全的指標，在反映肝功能的損害與恢復方面的敏感性優(yōu)于清蛋白。120前清蛋白的臨床評價PA在臨床上可以：①作為營養(yǎng)不良的指標，其（二）清蛋白（albumin，Alb）585個氨基酸殘基組成分子量66.2kD含17個二硫鍵，是唯一不含糖的血漿蛋白質(zhì)肝實質(zhì)細胞合成半壽期19d血漿中含量最多的蛋白質(zhì)121（二）清蛋白（albumin，Alb）585個氨基酸殘基組清蛋白的功能特征維持血漿膠體滲透壓：血漿滲透壓的75%～80%由Alb維持血漿中主要的載體蛋白，具有結合各種配體分子的能力緩沖酸堿，維持酸堿平衡作用營養(yǎng)作用122清蛋白的功能特征維持血漿膠體滲透壓：血漿滲透壓的75%～80清蛋白的臨床評價低清蛋白血癥：Alb合成不足、Alb的分布異常、Alb過度丟失、Alb分解代謝增加、無清蛋白血癥(analbuminaemia)

血漿Alb增高：少見Alb的遺傳性變異由Alb含量估計其配體的存在形式和作用作為個體營養(yǎng)狀態(tài)的評價指標123清蛋白的臨床評價低清蛋白血癥：Alb合成不足、Alb的分布異＞35g/L正常28g/L～34g/L輕度缺乏21g/L～27g/L中度缺乏＜21g/L嚴重缺乏血漿Alb作為營養(yǎng)指標的評價標準124＞35g/L正常血漿Alb（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）394個氨基酸殘基組成；分子量51kD；pI為4.8含糖10%～12%在醋纖膜電泳中位于α1區(qū)帶主要由肝細胞合成，單核細胞、肺泡巨噬細胞和上皮細胞也能合成125（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）394個氨基酸殘（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）AAT具有多種遺傳表型，迄今已分離鑒定的有33種等位基因，其中最多見的是PiMM型，占人群的90%以上F型：fast（電泳遷移率快）,M型：middle（電泳遷移率中等）,S型：slow

（電泳遷移率慢）根據(jù)等位基因出現(xiàn)頻率的不同，缺陷變體可進一步分為常見和少見兩部分,最常見的缺陷變體為Z和S型,表現(xiàn)為：ZZ、SS、SZ、MZ、MS126（三）α1-抗胰蛋白酶（α1-AT或AAT）AAT具有多種遺α1-抗胰蛋白酶的臨床評價

AAT缺陷：PiZZ型、PiSS型甚至PiMS型常伴有早年（20歲～30歲）出現(xiàn)的肺氣腫低血漿AAT可發(fā)現(xiàn)于胎兒呼吸窘迫綜合征ZZ蛋白聚集在肝細胞，導致肝硬化127α1-抗胰蛋白酶的臨床評價AAT缺陷：24α1-抗胰蛋白酶的臨床評價PiZZ表型的新生兒中10%～20%在出生數(shù)周后易患肝炎，最后因活動性肝硬化致死PiZZ表型的某些成人會發(fā)生肝損害AAT增加：AAT屬急性時相蛋白，在炎癥、感染、腫瘤、肝病時均顯著增加128α1-抗胰蛋白酶的臨床評價PiZZ表型的新生兒中10%～20（四）α1-酸性糖蛋白（AAG）181個氨基酸殘基組成分子量約40kD；pI為2.7～3.5屬血漿中含糖量最高（達45%）、酸性最強的糖蛋白典型的急性時相反應蛋白α1-酸性糖蛋白是一種粘多糖與蛋白質(zhì)分子結合成的有耐熱功能的復合蛋白質(zhì)，主要在肝臟產(chǎn)生,某些腫瘤組織也可產(chǎn)生129（四）α1-酸性糖蛋白（AAG）181個氨基酸殘基組成26α1-酸性糖蛋白與粘蛋白氨基葡萄糖、氨基半乳糖、甘露糖、巖藻糖及唾液酸（sialicacid，涎酸）等均稱為粘多糖。Meyer將糖與蛋白質(zhì)的復合物以氨基己糖的含量進行分類，氨基己糖的含量大于4%的稱粘蛋白（因含糖量高而粘稠），小于4%的稱糖蛋白。因α1-酸性糖蛋白含糖量很高，曾被稱為血清類粘蛋白（orosomucoid，粘蛋白）。粘蛋白是第3版《規(guī)程》上的一個測定項目。進一步研究發(fā)現(xiàn)，α1-酸性糖蛋白只是血清類粘蛋白的一種主要成分，屬于體內(nèi)糖蛋白的一種。現(xiàn)在，一般將血清類粘蛋白統(tǒng)稱為糖蛋白。130α1-酸性糖蛋白與粘蛋白氨基葡萄糖、氨基半乳糖、甘露糖α1-酸性糖蛋白（AAG）的臨床評價目前主要作為急性時相反應指標：在風濕病、惡性腫瘤及心肌梗死等炎癥或組織壞死時一般增加3～4倍。AAG增高是活動性潰瘍性結腸炎最可靠的指標之一。131α1-酸性糖蛋白（AAG）的臨床評價②抗氧化作用，可防止組織中脂質(zhì)過氧化物和自由基的生成，特別在炎癥時具有重要意義缺點：不同蛋白質(zhì)與染料的結合力不一致，且試劑對比色杯有吸附作用。一、血漿蛋白質(zhì)的種類和生理功能監(jiān)測腎移植后的排斥反應等28g/L～34g/L輕度缺乏精密度好，CV%為0.③局部溫度降低。且尿酸和膽紅素在280nm附近也有干擾，故該法的準確性和特異性有限；第六節(jié)血清氨基酸測定含17個二硫鍵，是唯一不含糖的血漿蛋白質(zhì)嘧啶核苷酸從頭合成途徑中的酶缺陷可引起乳清酸尿癥，但臨床應用很少，故不在本章介紹。一、血漿蛋白質(zhì)的種類和生理功能蛋白質(zhì)是人體中含量和種類最多的物質(zhì)，蛋白質(zhì)占人體干重的45％，種類約有10萬之多。優(yōu)點：準確度高，回收率達101.含硫氨基酸的正常代謝苯丙氨酸的代謝紊亂苯丙氨酸的代謝紊亂檢測APRP有助于監(jiān)測炎癥進程和判斷治療反應，尤其是檢測那些升高最早和最多的蛋白質(zhì)。尿含有同型胱氨酸和其他含硫氨基酸如Met、甲硫氨酸硫氧化物和Cys的二硫化物和HCY。（三）各種痛風癥狀的發(fā)生機制甘氨酸、丙酸、羥化丙酸、甲基檸檬酸AAG增高糖皮質(zhì)激素增加，包括內(nèi)源性的庫欣綜合征和外源性強的松、地塞米松等藥物治療時，可引起AAG升高。AAG降低見營養(yǎng)不良、嚴重肝損害、腎病綜合征以及胃腸道疾病致蛋白嚴重丟失等情況。此外，雌激素也可使AAG降低。α1-酸性糖蛋白（AAG）的臨床評價132②抗氧化作用，可防止組織中脂質(zhì)過氧化物和自由基的生成，特別在（五）結合珠蛋白（haptoglobin，Hp）一種急性時相蛋白和轉(zhuǎn)運蛋白。在電泳中位于α2區(qū)帶。由α與β鏈形成α2β2四聚體，α鏈有α1及α2兩種，而α1又有α1F及α1S兩種遺傳變異體，兩種變異體僅為一個氨基酸殘基不同。133（五）結合珠蛋白（haptoglobin，Hp）一種急性時結合珠蛋白的功能特征運輸血管內(nèi)游離的血紅蛋白(Hb)到網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞降解，防止Hb從腎臟丟失而為機體有效地保留鐵，并能避免Hb對腎臟的損傷。134結合珠蛋白的功能特征運輸血管內(nèi)游離表型

亞單位的結構

組成Hp1-1

(α1F)2β2α1Fα1Sβ2(α1S)2β2分子量約為80kD，α鏈含氨基酸殘基83個，β鏈含氨基酸殘基245個Hp2-1

(α1Sα2β2)n(α1Fα2β2)n分子量為120kD~200kD的聚合體，由于n不同，可以在電泳中出現(xiàn)多條帶Hp2-2

（α2β)nn=3~8分子量為