上節(jié)回顧1、阻礙植物細(xì)胞雜交的結(jié)構(gòu)？解除阻礙的方法？2、誘導(dǎo)原生質(zhì)融合的方法？原理？植物細(xì)胞融合的標(biāo)志？3、如何將雜種細(xì)胞培育成雜種植株？原理？植物體細(xì)胞雜交成功的標(biāo)志？4、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的流程？和傳統(tǒng)雜交育種相比，植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)？5、微型繁殖屬于哪種繁殖方式？優(yōu)點(diǎn)？6、作物脫毒的選材？單倍體育種的步驟？優(yōu)點(diǎn)？7、突變體的獲得利用的是什么原理？培養(yǎng)細(xì)胞一直處于分生狀態(tài)指的是哪一時(shí)期的細(xì)胞？動(dòng)物細(xì)胞工程閱讀課本44頁第一段，回答問題：動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段其中，

是基礎(chǔ)。

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、生產(chǎn)單克隆抗體動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1、概念：2、原理：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物有機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖.細(xì)胞增殖動(dòng)物組織塊制成細(xì)胞懸液傳代培養(yǎng)胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞（原因）幼齡動(dòng)物的器官組織或胚胎（原因）用胰蛋白酶等處理貼壁細(xì)胞適宜條件，原代培養(yǎng)3、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程（原因）細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，分裂旺盛，分化程度低，容易培養(yǎng)使細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，利于吸收營養(yǎng)加入培養(yǎng)液細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)細(xì)胞生長特點(diǎn)：接觸抑制，貼壁生長強(qiáng)調(diào)一：細(xì)胞貼壁過程■細(xì)胞貼壁：在培養(yǎng)瓶懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。■培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿壁要求：表面光滑、無毒、易于貼附。■當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。強(qiáng)調(diào)二：接觸抑制不死性細(xì)胞原代培養(yǎng)：

人們常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。

傳代培養(yǎng)：

當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞處于接觸抑制后,用胰蛋白酶處理,使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來,然后加入新的培養(yǎng)液,將細(xì)胞分離稀釋,并從原培養(yǎng)瓶內(nèi)轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),這個(gè)過程稱傳代培養(yǎng).（分瓶培養(yǎng)的過程）

細(xì)胞株：

傳代細(xì)胞一般能傳到40-50代，遺傳物質(zhì)一般不會(huì)發(fā)生改變，叫細(xì)胞株。

細(xì)胞系：

傳代50代以后不能再傳下去，部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，能連續(xù)傳代，獲得不死性，叫細(xì)胞系。

4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件（閱讀課本46頁）:1）無菌無毒的環(huán)境：適宜的溫度：人和哺乳動(dòng)物細(xì)胞最適溫度為36.5±0.5℃。適宜的酸堿度：PH：7.2-7.4液體合成培養(yǎng)基：（葡萄糖、氨基酸）、促生長因子、（水、無機(jī)鹽、微量元素）等；通常還需加入血漿、血清等天然成分。4）氣體環(huán)境：2）營養(yǎng)：3）溫度和pH：“95％空氣+5％CO2”的混合氣體培養(yǎng)箱。氧氣是細(xì)胞代謝必須的；CO2維持培養(yǎng)液的PH。對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具無菌處理；培養(yǎng)液中添加抗生素防止培養(yǎng)過程中污染；定期更換培養(yǎng)液以清除代謝產(chǎn)物，防止對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞造成危害。5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用（閱讀課本46-47頁）:1）蛋白質(zhì)生物制品的生產(chǎn)如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體2）基因工程技術(shù)中常用的受體細(xì)胞3）檢測(cè)有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性4）細(xì)胞的生理、藥理、病理研究

如用于篩選抗癌藥物復(fù)習(xí)回顧1、動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段？基礎(chǔ)技術(shù)？2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理？培養(yǎng)的材料取自？取材原因？3、動(dòng)物組織塊的處理？所用酶種類？使用該酶的目的？4、動(dòng)物單個(gè)細(xì)胞加入營養(yǎng)液制成？目的？5、動(dòng)物細(xì)胞生長的特點(diǎn)？原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)的區(qū)別？能無限增殖的細(xì)胞是？6、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件？O2與CO2的作用？抗生素的作用？營養(yǎng)成分？血清、血漿的作用？獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物細(xì)胞的全能性細(xì)胞群體植物體培養(yǎng)結(jié)果快速繁殖、培育無病毒植株等培養(yǎng)目的葡萄糖、動(dòng)物血清蔗糖、植物激素培養(yǎng)基特有成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基性質(zhì)細(xì)胞增殖原理動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較二、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物（閱讀課本47頁）1、概念：3、核移植分類：胚胎細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植（難度高）將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物2、原理：動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性克隆：指從一個(gè)共同的祖先，通過無性繁殖的方式產(chǎn)生出來的一群遺傳特性相同的DNA分子，細(xì)胞或個(gè)體。克隆包括三個(gè)層次

分子水平：如PCR擴(kuò)增DNA

細(xì)胞水平：如動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

個(gè)體水平：如克隆動(dòng)物克隆羊多利培育過程：黑面綿羊去核卵母細(xì)胞白面綿羊乳腺細(xì)胞核細(xì)胞核移植重組細(xì)胞電脈沖刺激早期重組胚胎胚胎移植另一頭綿羊的子宮妊娠、出生克隆羊多利供體受體代孕受體

◆取供體細(xì)胞傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞.為什么？◆用的是去核的減數(shù)第二次分裂中期細(xì)胞（MⅡ期）為什么？◆激活方法：◆激活目的：◆促融方法：電刺激◆胚胎移植至代孕受體內(nèi)

妊娠、分娩4、核移植流程供體：優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)奶牛受體：普通奶牛（卵母細(xì)胞的采集與培養(yǎng)）

1.體積大，易操作。2.含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營養(yǎng)條件。你認(rèn)為用上述體細(xì)胞核移植方法生產(chǎn)的克隆動(dòng)物，是對(duì)體細(xì)胞供體動(dòng)物進(jìn)行了100%的復(fù)制嗎？為什么？絕大部分DNA來自于供體細(xì)胞核，但其核外還有少量的DNA，即線粒體中的DNA是來自于受體卵母細(xì)胞。此外，即便動(dòng)物的遺傳基礎(chǔ)完全相同，但動(dòng)物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系，核供體動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不會(huì)完全相同，其形成的行為、習(xí)性也不可能和核供體動(dòng)物完全相同，從這一角度看，克隆動(dòng)物不會(huì)是核供體動(dòng)物100%的復(fù)制。5、體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景：①在畜牧業(yè)中可以加速家畜遺傳改良的進(jìn)程②保護(hù)瀕危物種③醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域生產(chǎn)醫(yī)用蛋白質(zhì)及組織器官的移植④了解胚胎發(fā)育和衰老過程；追蹤研究疾病的發(fā)展過程和治療疾病（性別）6、體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題看書P49-50頁在克隆羊多利的過程中，沒有運(yùn)用到下列哪項(xiàng)技術(shù)（