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文檔簡介

1、免疫組織化實驗前準 免疫組織化實驗前準 ,0.01M 脫蠟復苯中。10min10min。脫蠟后,將組織切片逐級放入無水乙醇、95%、85%,75%,50%5min。5minPBS緩沖液中孵5min。抗原修氫溶液于切片上,濕盒孵育 10min。用 PBS 3 次,每次 5min0.01M 免疫反 第二天,移去一抗后,用 PBS 洗兩次,每次 10min.擦去切片周圍多余的液 免疫反 第二天,移去一抗后,用 PBS 洗兩次,每次 10min.擦去切片周圍多余的液 化學染去除切片上多余的 PBS,滴加新鮮配制的 DAB 工作液,濕盒孵育,在顯微鏡PBS DAB 5min3 次。酸 中分化數秒。再次進

2、行水洗切片。脫水封此過程剛好和復水相反,首先進行50%乙醇處理5 min ,然后依次浸泡在75%, 85%,95%5min,最后置于二甲苯中進行透明化處理兩次,10min1滴中性樹膠,蓋上結果觀半定量分Image Pro PlusImage-Pro File,打開實驗組和對照組的結。點擊 Measure。CalibrationDensityOptical選擇圖中最亮的一點。在 Incident Level 中輸入與其最接近的整十數,點擊 ok。MeasurCont/ SelectMeasure,選擇測量對象。選中Area(面積)和IOD(累積光密度點擊 OK。SelectMeasure,選擇測量對象。選中Area(面積)和IOD(累積光密度點擊 OK。 ,在CountSize窗口,點擊View,在 疑問解Doctor A,最近做免疫組化的結果非特異性染色都很深,該怎么解決呢Miss Q,非特異性染色是在做免疫組化中經常性組分與抗體的結合。DAB 。Do

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