1、試驗動物生物安全第1頁/10/10試驗動物中心2醫(yī)學試驗動物學主講：王曉斌聯(lián)絡 方式MAIL:15481341第2頁引 言試驗動物：指經(jīng)人工喂養(yǎng)、繁育，對其攜帶微生物及寄生蟲實施控制，遺傳背景明確或者起源清楚，應用于科學研究、教學、生產(chǎn)和檢定以及其它科學試驗動物。如大白鼠、小白鼠、裸鼠、豚鼠、家兔、比格犬、恒河猴、小型豬等。第3頁KM小鼠C57小鼠裸 鼠SD大鼠新西蘭兔Hartely豚鼠第4頁引 言試驗用動物試驗動物野生動物觀賞動物經(jīng)濟動物第5頁試驗動物是從事科學研究、教學、生產(chǎn)、檢定主要支撐條件，廣泛應用于醫(yī)藥研發(fā)、教學試驗、生物檢定等方面。試驗動物為人類健康和社會

2、進步作出了巨大貢獻。引 言第6頁引 言全國一年繁殖試驗動物約1300萬只，實際用量在1000萬只左右。試驗動物在生產(chǎn)、使用過程中，存在感染、繁殖病原體可能以及向環(huán)境擴散危險，對人和環(huán)境產(chǎn)生生物安全問題。 第7頁引 言1999年北京某試驗室曾發(fā)生試驗人員感染流行性出血熱事件。事件起因就是操作人員被攜帶病毒試驗動物抓咬傷而受感染引發(fā)。第8頁引 言長春市某高校中藥系試驗室發(fā)生學生感染流行性出血熱事件，76名學生中有10名學生受感染。整個事件起因也是因為試驗操作過程中被動物抓咬傷而造成。第9頁引 言3月法國食品衛(wèi)生安全署(Afssa)科學家，在試驗室中對動物病體進行試驗研究時。意外感染致命性炭疽病菌，

3、受感染5名人員被緊急隔離至醫(yī)院監(jiān)控以及治療。 第10頁引 言 試驗動物生物安全已引發(fā)國、內(nèi)外高度重視。我國實施新版試驗動物國家標準，其中要求：試驗用大小鼠等級提升到SPF級;年北京市試驗動物管理條例，修改和增加了試驗動物生物安全方面內(nèi)容;20第二屆北京試驗動物科學國際論壇上，日本國立大學生物安全委員會委員長佐藤浩教授提出，生物安全已成為試驗動物研究中不容忽略主要原因。 第11頁試驗動物生物安全是對試驗動物可能產(chǎn)生潛在風險或現(xiàn)實危害防范和控制。由試驗動物造成各種風險和危害包含： 生產(chǎn)和使用試驗動物中各個步驟，如試驗動物引種、保種、繁育、運輸、進出口，使用試驗動物(包含感染和非感染試驗動物)進行動

4、物試驗、從事科研活動等過程中試驗動物造成各種危害。 引 言第12頁試驗動物生物安全條件與保障國家、地方法律、法規(guī)合格試驗動物與設施嚴格、標準化操作廢棄物正確處理引 言第13頁國家或地方試驗動物主要法規(guī)、標準1、試驗動物管理條例（1988）2、試驗動物質量管理方法（修訂版）（） 3、試驗動物許可證管理方法（試行）（國家：、江蘇省：）4、試驗動物種子中心管理方法5、省級試驗動物質量檢測機構技術審查準則第14頁國家或地方試驗動物主要法規(guī)、標準6試驗動物微生物等級及監(jiān)測7試驗動物寄生蟲等級及監(jiān)測8試驗動物環(huán)境及設施9哺乳類試驗動物遺傳質量控制10試驗動物配合飼料通用質量標準11試驗動物配合飼料衛(wèi)生標準

5、第15頁國家或地方試驗動物主要法規(guī)、標準 試驗動物生產(chǎn)許可證 第16頁 試驗動物使用許可證 國家或地方試驗動物主要法規(guī)、標準第17頁國家或地方試驗動物主要法規(guī)、標準江蘇省試驗動物管理條例：第四章： 生物安全與試驗動物福利第二十二條 試驗動物發(fā)生傳染性疾病時，從事試驗動物生產(chǎn)、使用單位和個人應該及時采取隔離、預防控制辦法，預防動物疫情擴散，同時匯報當?shù)匦竽莲F醫(yī)主管部門、動物防疫監(jiān)督機構；當發(fā)生人畜共患病時，還應該馬上匯報當?shù)丶膊☆A防控制機構。 第18頁試驗動物分為四級：一級為普通級；二級為清潔級；三級為無特定病原體（SPF）級；四級為無菌級（包含悉生動物）。當前比格犬、恒河猴、小型豬等大動物多為

6、普通級，大、小鼠、裸鼠均為清潔級、SPF以上，豚鼠、家兔等現(xiàn)有普通級，又有清潔級、SPF級。試驗動物設施分為三級：一級為普通系統(tǒng)；二級為屏障系統(tǒng)；三級為隔離系統(tǒng)。試驗動物及其設施等級第19頁隔離系統(tǒng)(Insulation system) 是以隔離器(Isolator)為主體及其從屬裝置組成喂養(yǎng)系統(tǒng)。用作喂養(yǎng)無菌動物和已知菌動物。 屏障系統(tǒng)(Barrier system) 這是清潔級、SPF級動物生產(chǎn)或試驗設施。人、試驗動物、飼料、飲水、墊料、空氣及其它物品均需進行嚴格微生物控制。 普通系統(tǒng)(Open system) 只能進行普通級試驗動物生產(chǎn)與試驗。試驗動物及其設施等級第20頁試驗動物及其設施

7、等級不一樣等級動物及其設施：必須由省級試驗動物監(jiān)測機構監(jiān)測合格，發(fā)放“試驗動物質量監(jiān)測保合格證或設施合格證”。試驗中所用動物必須為質量合格動物。第21頁試驗動物及其設施等級隔離環(huán)境以隔離器(Isolator)為主體及其從屬裝置組成喂養(yǎng)系統(tǒng)。用作喂養(yǎng)無菌動物和已知菌動物。潔凈度到達一百級。第22頁試驗動物及其設施等級隔離環(huán)境動物設施主要指標潔凈度：100級（空氣三級過濾后，加隔離器）溫 度：生產(chǎn)設施為20-26，試驗設施為20-25日溫差：生產(chǎn)4，試驗3相對濕度：40-70%壓強梯度：100-150Pa換氣次數(shù)：20-50次/h；氣流速度：0.1-0.2m/s落下菌數(shù)：0個/皿;氨濃度：14ng

8、/m3第23頁屏障環(huán)境 主要用于進行SPF級、清潔級大鼠、小鼠、裸鼠等小動物試驗（配置喂養(yǎng)室及操作室）。屏障系統(tǒng)(Barrier system) 這是喂養(yǎng)SPF動物設施。人、試驗動物、飼料、飲水、墊料、空氣及其它物品均需進行嚴格微生物控制。送入空氣需經(jīng)初、中、高效三級過濾，潔凈度到達10000級，飼料、飲水、墊料經(jīng)滅菌后方可使用。試驗動物及其設施等級第24頁屏障系統(tǒng)通行路線圖第25頁在屏障設施內(nèi)一切操作要實施嚴格微生物控制，因為屏障系統(tǒng)內(nèi)要長久喂養(yǎng)SPF動物,保持不被污染，而人員、物品要經(jīng)常出入,其中人員又不能徹底滅菌,所以人是最大可能污染源，所以，對人員要求要尤其嚴格，要有嚴密操作細則。第2

9、6頁試驗動物及其設施等級屏障環(huán)境（正壓）動物設施主要指標潔凈度：10000級（空氣經(jīng)過初、中、高效三級過濾）溫 度：生產(chǎn)設施為20-26，試驗設施為20-25日溫差： 生產(chǎn)4，試驗3相對濕度：40-70%壓強梯度：20-50Pa換氣次數(shù)：10-20次/h；氣流速度：0.1-0.2m/s落下菌數(shù)：3個/皿;氨濃度：14ng/m3第27頁試驗動物及其設施等級屏障環(huán)境動物試驗設施設備第28頁試驗動物及其設施等級屏障環(huán)境動物試驗設施設備第29頁 試驗動物及其設施等級屏障環(huán)境動物試驗設施設備第30頁普通環(huán)境 主要用于進行兔、貓、狗、猴等大動物試驗喂養(yǎng)（配置喂養(yǎng)室及操作室）。試驗動物及其設施等級第31頁試

10、驗動物及其設施等級普通環(huán)境動物設施主要指標潔凈度：-溫 度：生產(chǎn)設施為16-28，試驗設施為16-26日溫差： 試驗4相對濕度：40-70%壓強梯度：-換氣次數(shù)：8-10次/h；氣流速度：0.1-0.2m/s落下菌數(shù)：30個/皿;氨濃度：14ng/m3第32頁試驗動物及其設施等級普通環(huán)境動物試驗設施設備第33頁試驗動物及其設施等級普通環(huán)境動物試驗設施設備第34頁 包括傳染性、中毒性、放射性、致癌性、致突致畸及致死性試驗等應在有特殊要求生物安全試驗室中（負壓）進行，應依據(jù)生物安全防護要求進行建筑或改造，按照相關要求執(zhí)行。WHO將動物生物安全試驗室分為四級：動物生物安全試驗室一級(ABSL-1)

11、動物生物安全試驗室二級(ABSL-2) 動物生物安全試驗室三級(ABSL-3) 動物生物安全試驗室四級(ABSL-4) 試驗動物及其設施等級第35頁試驗動物及其動物試驗操作試驗動物生產(chǎn)生物安全： 試驗動物生產(chǎn)過程中，對試驗動物可能造成各種風險和危害防范和控制。 試驗動物生產(chǎn)，包含試驗動物引種、保種、繁育、運輸、進出口等過程。 定時進行嚴格微生物指標監(jiān)測。第36頁試驗動物引種：試驗動物種子起源于國家試驗動物保種中心，遺傳背景清楚，質量符合國家標準。 試驗動物保種和繁育：必須由國家或行業(yè)主管部門認可單位進行。試驗動物及其動物試驗操作第37頁適合用于SPF/無菌動物喂養(yǎng)或運輸試驗動物運輸：運輸試驗動

12、物時，所使用轉運工具和籠器具，應該符合所運試驗動物微生物和環(huán)境質量控制標準。不一樣品種、品系、性別和等級試驗動物，不得在同一籠盒內(nèi)混合裝運。試驗動物及其動物試驗操作第38頁試驗動物及其動物試驗操作試驗動物使用生物安全：動物及喂養(yǎng)要求:1、引進動物進行試驗必須具備試驗動物質量合格證,試驗前隔離檢疫1-6天。2、堅持衛(wèi)生消毒制度：定時對動物室、操作室和喂養(yǎng)用具進行消毒。3、喂養(yǎng)管理人員要定時做健康檢驗。第39頁試驗操作要求：動物試驗人員試驗操作過程中做好防護，穿戴好工作衣、帽、口罩、手套;嚴格按標準操作規(guī)程進行。 試驗動物及其動物試驗操作第40頁試驗動物及其動物試驗操作屏障環(huán)境標準操作規(guī)程SPF級

13、動物試驗室管理責任SPF級動物試驗室工作人員職責SPF級動物試驗室人員進出標準操作規(guī)程SPF級動物試驗室物品進出標準操作規(guī)程SPF級動物試驗室動物進出標準操作規(guī)程使用SPF級動物試驗室標準操作規(guī)程SPF級試驗動物購置標準操作規(guī)程SPF級試驗動物接收和檢疫標準操作規(guī)程第41頁試驗動物及其動物試驗操作屏障環(huán)境標準操作規(guī)程SPF級動物試驗室試驗動物飼料、飲水、墊料管理標準操作規(guī)程SPF級試驗動物抓取和保定標準操作規(guī)程SPF級試驗動物逃脫處理標準操作規(guī)程SPF級試驗動物死亡和傷病處理標準操作規(guī)程高壓蒸汽滅菌器使用與維護標準操作規(guī)程傳遞窗使用與維護標準操作規(guī)程渡槽使用與維護標準操作規(guī)程第42頁試驗動物及

14、其動物試驗操作屏障環(huán)境標準操作規(guī)程SPF動物室照明及紫外線設備使用與維護標準操作規(guī)程消毒滅菌方法標準操作規(guī)程SPF動物試驗室日常管理標準操作規(guī)程屏障系統(tǒng)日常衛(wèi)生與消毒標準操作規(guī)程空調(diào)凈化系統(tǒng)使用與維護標準操作規(guī)程SPF動物試驗室凈化標準操作規(guī)程SPF級動物試驗室內(nèi)環(huán)境監(jiān)控標準操作規(guī)程SPF級動物試驗室試驗動物籠子標識標準操作規(guī)程第43頁試驗動物及其動物試驗操作普通環(huán)境標準操作規(guī)程普通級試驗動物設施管理責任標準操作規(guī)程使用普通動物試驗室標準操作規(guī)程試驗動物重新進入普通級動物室標準操作規(guī)程普通級試驗動物、飼料、飲水、墊料購置及管理普通級動物室人員保健和安全標準操作規(guī)程普通級動物室試驗動物接收標準操

15、作規(guī)程普通級動物室試驗動物和物資進出管理標準操作規(guī)程普通動物室抓取動物標準操作規(guī)程第44頁試驗動物及其動物試驗操作普通環(huán)境標準操作規(guī)程普級級試驗動物逃脫、死亡和傷病處理標準操作規(guī)程進入普通級動物試驗室內(nèi)人員管理標準操作規(guī)程普通級動物室環(huán)境監(jiān)控標準操作規(guī)程普通級動物室籠具和其它輔助設備管理標準操作規(guī)程普通級動物室環(huán)境衛(wèi)生管理標準操作規(guī)程普通級動物室試驗動物籠子標識標準操作規(guī)程試驗用Beagle狗喂養(yǎng)標準操作規(guī)程試驗用兔喂養(yǎng)標準操作規(guī)程試驗用豚鼠喂養(yǎng)標準操作規(guī)程第45頁試驗動物及其動物試驗操作 不一樣品種、不一樣等級和互有干擾動物試驗，不得在同一試驗間進行喂養(yǎng)，同一起源、相同品種、品系而用于不一樣

16、試驗目標動物試驗喂養(yǎng)，標準上也不得在同一試驗間進行。 不得將普通級動物帶進屏障環(huán)境中進行試驗，如將試驗動物帶離屏障環(huán)境進行試驗，須經(jīng)過嚴格包裝、滅菌處理，不然不得再帶回屏障環(huán)境中進行喂養(yǎng)、試驗。第46頁試驗動物及其動物試驗操作在進行試驗時，為了不損傷動物健康，不影響觀察指標，并預防被動物咬傷，首先要限制動物活動，使動物處于平靜狀態(tài)。試驗人員必須掌握合理抓取固定方法,掌握熟練動物試驗操作技術。第47頁試驗動物及其動物試驗操作 試驗動物誤傷處理試驗動物咬傷救治在傷口上方扎止血帶，然后用高猛酸鉀或雙氧水沖洗傷口，并用5石炭酸或硝酸燒灼腐蝕傷處。傷口若比較大或自己不好處理，最好去醫(yī)院處理。 同時二十四

17、小時內(nèi)到防疫站注射疫苗（如狂犬疫苗、流行性出血熱疫苗，等）。 第48頁標本處理： 動物血液及組織標本馬上按試驗要求進行分離、凍存或固定等處理后存放。動物試驗標本及廢棄物處理第49頁動物試驗標本及廢棄物處理試驗動物使用各種廢棄物可按醫(yī)療廢物分類目錄進行對應分類，并嚴格按照醫(yī)療廢物管理條例要求進行處理。依據(jù)試驗動物使用廢棄物特征可分為感染性廢棄物：如被動物血液、體液污染物品 病理性廢棄物：試驗動物尸體等廢棄物 損傷性廢棄物：廢棄銳器。 藥品性廢棄物：變質或者被污染廢棄藥品 化學性廢棄物：含有毒性、腐蝕性、易燃易爆性 廢棄化學物品第50頁動物試驗標本及廢棄物處理試驗動物使用廢棄物搜集將試驗動物使用廢

18、棄物分置于動物廢棄物專用包裝物、或者容器內(nèi)。分類搜集。盛裝試驗動物使用廢棄物每個包裝物、容器外表面應該有警示標識，注明：單位、日期、類別等。廢棄物經(jīng)包裝、密封后存放于暫時貯存設施，不得露天存放；暫時貯存時間不得超出天，由醫(yī)療廢棄物處理專門機構統(tǒng)一運輸、處理。第51頁動物試驗標本及廢棄物處理試驗動物使用廢棄物暫時貯存設施、設備要求：遠離人員活動區(qū)和生活垃圾存放場所，方便試驗動物使用廢棄物運輸人員及運輸工具、車輛出入。有嚴密封閉辦法，設專（兼）職人員管理，預防非工作人員接觸動物廢棄物。有防滲漏、防雨水沖刷、防陽光直射、防蚊蠅、防蟑螂、防盜以及預防兒童接觸等安全辦法。易于清潔和消毒。第52頁動物試驗

19、標本及廢棄物處理如需暫時貯存病理性廢棄物，則應該具備低溫貯存或者防腐條件。設有顯著動物廢棄物警示和“禁止吸煙、飲食”標識。病原體感染性動物試驗廢棄物，需經(jīng)過高壓或消毒液初步處理后再分裝搜集、再統(tǒng)一由醫(yī)療廢棄物處理專門機構運輸后深入處理。第53頁1、人畜共患病毒性疾病：流行性出血熱、埃博拉病毒感染、馬堡病毒疾病、淋巴性脈絡叢腦膜炎病毒感染、靈長類痘病毒病、麻疹、雞新城疫、A型肝炎、猴免疫缺點綜合征、狂犬病、流感、節(jié)肢動物攜帶性病毒感染。2、人畜共患立克次氏體病：Q熱、貓抓熱。附：主要人畜共患病第54頁附：主要人畜共患病3、人畜共患細菌性疾病： 李斯特菌、猴結核病、鸚鵡熱、鼠咬熱、鼠疫、布氏桿菌病

20、、鉤端螺旋體病、沙門氏菌病、志賀氏菌病、腸炎耶森氏菌病。4、人畜共患病原蟲性疾病：弓形蟲病、黎形蟲病、隱孢子蟲病、阿米巴原蟲病、大腸纖毛蟲病。第55頁 1、病原體：漢坦病毒。 傳染源帶病毒黑線姬鼠和褐家鼠，試驗大鼠也偶然傳輸。 2、傳輸路徑污染塵埃飛揚形成氣溶膠吸入感染。帶病毒血、尿污染人皮膚破損處，也使人患病。（一）流行性出血熱（腎綜合征出血熱HFRS）第56頁3、易感者人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔。4、癥狀潛伏期14天；動物無顯著癥狀；人感染后出現(xiàn)高熱、出血、休克、腎功效受損和循環(huán)衰竭，嚴重者死亡。（一）流行性出血熱（腎綜合征出血熱HFRS）第57頁（二）淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎1、傳染源淋巴細

21、胞性脈絡叢腦膜炎病毒。帶病毒野小鼠或試驗小鼠為傳染源。2、傳輸路徑帶病毒小鼠分泌物、排泄物污染，吸血昆蟲傳輸，胎盤垂直傳輸。第58頁3、易感者人、小鼠、猴、豚鼠、大鼠、地鼠、兔、狗、雞等。4、癥狀人感染后表現(xiàn)類似流感樣癥狀，有三種表現(xiàn)：大腦型、內(nèi)臟型、遲發(fā)型。（二）淋巴細胞性脈絡叢腦膜炎第59頁試驗動物福利 動物福利（animal welfare）是指人為提供給動物對應物質條件和采取行為方式，確保動物在健康舒適狀態(tài)下生存，使動物處于生理和心理愉快感受狀態(tài)。 1822年，英國“人道主義者”馬丁提出禁止虐待動物議案，這項法案就叫馬丁法（Martin Act）。第60頁試驗動物福利到了19世紀末開始以后，試驗動物福利成了人們關注焦點，各個國家相關法律和條款相繼頒布。美國聯(lián)邦政府1966年頒布動物福利法，正是在這種