自誘導TB培養基Terrific Broth_第1頁
自誘導TB培養基Terrific Broth_第2頁
自誘導TB培養基Terrific Broth_第3頁
全文預覽已結束

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、Word文檔 自誘導TB培養基Terrific BrothAutoinductive Terrific Broth產品基本信息 產品名稱：自動誘導TB培育基；自動誘導超級肉湯英文名稱：Autoinductive Terrific Broth；Terrific Broth - Auto Induction Medium培育基類型：加富培育基級別：for microbiology品牌：GRiSP產品名目號：GCM19.0500產品規格：500g產品外觀：米色均一粉末。滅菌后顏色與澄清度：琥珀色透亮溶液。保存條件：密封，2-25C保存。留意事項：避開攝入、吸入、皮膚接觸。 產品描述： 自動誘導超級肉

2、湯(Autoinductive Terrific Broth)也稱自動誘導TB培育基，用于Lac啟動子驅動的大腸桿菌重組蛋白表達，無需添加IPTG。自誘導TB培育基能夠獲得高細胞密度，蛋白表達率高出IPTG誘導過程好幾倍。 工作原理： Terrific Broth 由LB培育基改進而來，目的是獲得高密度細胞。E. coli在該培育基中生長速度快于其在LB培育基或 2x YT肉湯中的生長速度。使用TB培育基還可以獲得高產量質粒DNA和重組蛋白。 通常，外源蛋白在細菌中表達時常使用IPTG誘導的啟動子，如Lac啟動子。當細胞密度達到抱負值時，通過向培育基中加入IPTG的方法誘導蛋白表達。使用這個自

3、動誘導培育基，不再需要監測細胞密度和添加IPTG。葡萄糖作為半乳糖操縱子的阻遏因子阻擋細菌利用-乳糖，而被優先代謝，促進高密度生長。一旦培育基中的葡萄糖被耗盡（通常發生在對數期的后期），乳糖被-半乳糖苷酶轉換成異乳糖（葡萄糖-1,6-半乳糖），而后者作為IPTG誘導型啟動子的誘導劑，引起乳糖阻遏子從與DNA結合的位點上釋放，啟動重組蛋白的表達。對于DE3基因型的E.coli中，異乳糖使T7lac啟動子去阻遏，并誘導lacUV5啟動子表達T7 RNA聚合酶。通過這種方式，在細菌培育物生長到某一特定點時蛋白表達自發開頭，去掉了監測細胞密度（OD600）和添加IPTG這兩個步驟。與傳統IPTG誘導的蛋白表達過程相比，使用自動誘導培育基極大地便利和簡化了試驗流程。另外還便于多克隆分析，如藍白斑篩選。該培育基中含有抱負比例的葡萄糖和-乳糖作為碳源和能量來源。胰蛋白胨供應氮源、維生素、礦物質和氨基酸，這些養分成分是細胞生長所必需的。酵母提取物是豐富的B族維生素來源。Studier salts為細菌細胞的生長供應最佳的生理環境。 配方與配制方法 Tryptone12.0 gYeast Extract24.0 g-乳糖2.0 g葡萄糖0.5 gStudier鹽17.05 gFinal pH7.0 0.2 1. 稱取55.55g 脫水培育基粉末，用1L去離子水加熱溶解。2. 煮沸1min。3.

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論