1、關(guān)于實(shí)驗(yàn)三死活細(xì)胞的鑒別第一張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)習(xí)并掌握死活細(xì)胞鑒別的原理及方法。2.能夠辨別死、活細(xì)胞。第二張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月二 實(shí)驗(yàn)原理死活細(xì)胞鑒別有許多不同的方法，其中最常用方法是臺(tái)盼藍(lán)染色排除法。其原理是：許多酸性染料不容易穿過活細(xì)胞的質(zhì)膜進(jìn)入胞內(nèi)，卻能滲入死亡的細(xì)胞內(nèi)，使其著色，以此來鑒別死活細(xì)胞。第三張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月熒光排除法活細(xì)胞具有較強(qiáng)的酯酶活性，可將二丙酸酯熒光素中的熒光素分解出來，從而使細(xì)胞發(fā)出強(qiáng)烈的黃綠色熒光，死亡細(xì)胞由于酯酶失活，不能分解二丙酸酯熒光素，不能發(fā)出熒光。第四張，PPT共十二

2、頁，創(chuàng)作于2022年6月染色排除法：染成藍(lán)色的為死細(xì)胞第五張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月三、試劑與器材1.材料：血細(xì)胞2.試劑：0.4臺(tái)盼藍(lán)溶液（生理鹽水配制）、PBS。3.器材：顯微鏡、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、載玻片、滴管等。第六張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.血細(xì)胞懸液的制備取一定量的新鮮血液加入20等份的PBS。2.染色制片取0.5ml細(xì)胞懸液放入干凈試管中，加入12滴臺(tái)盼藍(lán)染液，混合，2min后制成臨時(shí)裝片，鏡檢。第七張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月3.結(jié)果死細(xì)胞染成藍(lán)色，活細(xì)胞不著色。細(xì)胞計(jì)數(shù)：單位視野內(nèi)死細(xì)胞個(gè)數(shù)、活細(xì)胞個(gè)數(shù)。第八張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月第九張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞活力公式根據(jù)下式求細(xì)胞活力： 活細(xì)胞率（）（細(xì)胞總數(shù)-死細(xì)胞數(shù)）/細(xì)胞總數(shù)100第十張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年6月五、注意事項(xiàng)1.計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)多選擇幾個(gè)視野，以多個(gè)視野內(nèi)的平均值作為細(xì)胞的存活率。2.以臺(tái)盼藍(lán)排除法在倒置顯微鏡下計(jì)數(shù)死活細(xì)胞數(shù)目需注意染色時(shí)間。第十一張，PPT共十二頁，創(chuàng)作于2022年