1、課時跟蹤檢測(四十一)基因工程基礎對點練考綱對點夯基礎1下列關于基因工程的敘述，錯誤的是()A目的基因和受體細胞均可來自動、植物或微生物B限制性核酸內切酶和DNA連接酶是兩類常用的工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原無生物活性D載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細胞和促進目的基因的表達解析：基因工程中的目的基因來源于自然界中的含有目的性狀的一切生物，可以是動物、植物，也可以是真菌、細菌，還可以是人等；在基因工程中獲取目的基因以及將目的基因和載體結合構建基因表達載體必須使用同一種限制酶進行切割，以獲得相同的黏性末端，在DNA連接酶的作用下，將目的基因和載體連接，構建基因表達載體

2、；人的胰島素原基因可以在大腸桿菌體內得以表達，但是由于大腸桿菌是原核生物，沒有內質網、高爾基體等細胞器的加工，故其合成的胰島素原不具有胰島素的功能，即沒有生物活性；作為標記基因是為了檢測并篩選含重組DNA的細胞，但對于目的基因的表達沒有影響。答案：D2關于蛋白質工程的說法，正確的是()A蛋白質工程是在分子水平上對蛋白質分子直接進行操作B蛋白質工程能生產出自然界中不曾存在過的新型蛋白質分子C對蛋白質的改造是通過直接改造相應的mRNA來實現的D蛋白質工程的流程和天然蛋白質合成的過程是相同的解析：蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規律及其與生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進

3、行改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類的生產和生活的需求。由于基因決定蛋白質，因此，要對蛋白質的結構進行設計改造，還必須從基因入手。與基因工程不同，蛋白質工程能生產出自然界中不曾存在過的新型蛋白質分子。答案：B3下列有關生物技術安全性和倫理問題的觀點，不合理的是()A對于轉基因技術，我們應該趨利避害，理性看待B我國禁止生殖性克隆和治療性克隆C我國不發展、不生產、不儲存生物武器，并反對其擴散D對于基因檢測應該保護個人遺傳信息隱私權答案：B4在DNA的粗提取實驗過程中，對DNA提取量影響較小的是()A使雞血細胞在蒸餾水中充分破裂，釋放出DNA等核物質B攪拌時要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動C在析出D

4、NA黏稠物時，要緩緩加入蒸餾水，直至黏稠物不再增多D要用冷酒精沉淀DNA，甚至可將混合液再放入冰箱中冷卻解析：A項的做法是為了充分釋放出核中的DNA分子，使進入濾液中的DNA盡量的多；C項是讓DNA充分沉淀，保證DNA的量；D項的道理同C項；而B項的操作并不能使DNA增多或減少。答案：B提能強化練考點強化重能力5(經典高考題)北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白具有11個氨基酸的重復序列，該序列重復次數越多，抗凍能力越強，下圖是獲取轉基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關敘述正確的是()A過程獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序B將多個抗凍基因編碼區依次相連形成能表達的新基因，不能

5、得到抗凍性增強的抗凍蛋白C過程構成的重組質粒缺乏標記基因，需要轉入農桿菌才能進行篩選D應用DNA探針技術，可以檢測轉基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其完全表達解析：過程獲得的目的基因已不含非編碼區和內含子，因此不能用于比目魚基因組測序，A錯誤。多個抗凍基因編碼區依次相連形成的新基因表達的是多個抗凍蛋白的重復序列，而不是抗凍蛋白中11個氨基酸的重復序列，因此不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白，B正確。導入農桿菌是為了擴增和更易導入番茄細胞，C錯誤。DNA探針技術不能檢測基因是否完全表達，目的基因的完全表達應該檢測表達產物蛋白質，D錯誤。答案：B6如圖為某種質粒的簡圖，小箭頭所指分別為限制性核酸內切酶

6、EcoR、BamH的酶切位點，P為轉錄的啟動部位。已知目的基因的兩端有EcoR、BamH的酶切位點，受體細胞為無任何抗藥性的原核細胞。下列有關敘述，正確的是()A將含有目的基因的DNA與質粒分別用EcoR酶切，在DNA連接酶作用下，生成由兩個DNA片段之間連接形成的產物有兩種BDNA連接酶的作用是將酶切后得到的黏性末端連接起來，形成一個重組質粒時形成兩個磷酸二酯鍵C為了防止目的基因反向粘連和質粒自行環化，酶切時可選用的酶是EcoR和BamHD能在含青霉素的培養基中生長的受體細胞表明該目的基因已成功導入該細胞解析：如果將含有目的基因的DNA與質粒分別用EcoR酶切，則酶切后二者的黏性末端相同，在

7、DNA連接酶作用下，生成由兩個DNA片段之間連接形成的產物有三種，只有一種符合基因工程的需求；DNA連接酶的作用是將酶切后的目的基因和質粒的黏性末端連接起來形成重組質粒，該過程形成4個磷酸二酯鍵；為了防止目的基因和質粒自行環化，酶切時可選用的酶是EcoR和BamH，這樣切割后得到的DNA片段兩側的黏性末端不同；由于受體細胞為無任何抗藥性的原核細胞，因此能在含青霉素的培養基中生長的原因，可能是受體細胞成功導入了目的基因，也可能是只導入了不含目的基因的空載體。答案：C7(江蘇鎮江丹徒高級中學高三試題)小鼠雜交瘤細胞表達的單克隆抗體用于人體試驗時易引起過敏反應，為了克服這個缺陷，可選擇性擴增抗體的可

8、變區基因(目的基因)后再重組表達。下列相關敘述正確的是()A設計擴增目的基因的引物時不必考慮表達載體的序列B用PCR方法擴增目的基因時必須知道基因的全部序列CPCR體系中一定要添加從受體細胞中提取的DNA聚合酶D一定要根據目的基因編碼產物的特性選擇合適的受體細胞解析：設計擴增目的基因的引物時要考慮表達載體相關序列，從而保證目的基因能與表達載體相連接及正常表達，A錯誤；只要設計出目的基因的引物，接下來即可自動進行，而不必知道其全部序列，B錯誤；PCR技術需要特殊的耐高溫的DNA聚合酶，從細胞內提取的DNA聚合酶不耐高溫，C錯誤；根據目的基因的編碼產物要選擇特定合適的受體細胞，從而保證目的基因能表

9、達出所需產物，D正確。答案：D8(江蘇南京高三模擬試題)根據某基因上游和下游的堿基序列，設計合成了用于該基因PCR的兩段引物(單鏈 DNA)。引物與該基因變性DNA(單鏈DNA)結合為雙鏈DNA的過程稱為復性。下圖是兩引物的Tm(引物熔解溫度，即50%的引物與其互補序列形成雙鏈DNA分子時的溫度)測定結果，下列敘述錯誤的是()A通常引物1和引物2不能有堿基互補配對關系B兩引物分別是子鏈延伸的起點，并可以反復利用C若兩引物的脫氧核苷酸數相同，推測引物2的GC含量較高D復性所需溫度與時間，取決于引物的長度、堿基組成及其濃度等因素解析：通常引物1和引物2不能有堿基互補配對關系，以免二者結合，A項正確

10、；兩引物參與子鏈，不能反復利用，B項錯誤；若兩引物的脫氧核苷酸數相同，引物2的熔解溫度較高，推測GC含量較高，C項正確；結合以上分析可知，復性所需溫度與時間，取決于引物的長度、堿基組成及其濃度等因素，D項正確。答案：B大題沖關練綜合創新求突破9(靖江模擬)許多大腸桿菌的質粒上含有lacZ基因，其編碼的產物半乳糖苷酶在Xgal和IPTG存在的條件下，可以產生藍色沉淀，使菌落呈現藍色，否則菌落呈現白色?；蚬こ讨谐＠迷撛韽膶胭|粒的受體細胞中篩選出真正導入重組質粒的細胞，過程如圖所示。請據圖回答下列問題：(1)基因工程中，構建基因表達載體的目的是_。(2)限制酶EcoR 的識別序列和切割位點是

11、GAATTC，Sma的識別序列和切割位點是CCCGGG。圖中目的基因被切割下來和質粒連接之前，需在目的基因的右側連接相應的末端，連接的末端序列是_，連接過程中需要的基本工具是_。(3)轉化過程中，大腸桿菌應先用_處理，使其處于能吸收周圍DNA的狀態。(4)菌落顏色為白色的是_，原因是_。(5)菌落中的目的基因是否表達，可采用的檢測辦法是_。解析：(1)基因工程中，構建基因表達載體的目的是使目的基因在受體細胞中穩定存在，能遺傳給后代，并表達和發揮作用。(2)根據限制酶EcoR和Sma的識別序列、切割位點和圖解判斷，圖中目的基因被切割下來和質粒連接之前，需在目的基因的右側連接相應的末端，連接的末端

12、序列是TTAA，連接過程中需要的基本工具是DNA連接酶。(3)轉化過程中，大腸桿菌應先用Ca2處理，使其處于能吸收周圍DNA的狀態。(4)由于lacZ標記基因區插入外源基因后被破壞，不能表達出半乳糖苷酶，故菌落為白色菌落。(5)可采用抗原抗體雜交的辦法檢測菌落中的目的基因是否表達。答案：(1)使目的基因在受體細胞中穩定存在，能遺傳給后代，并表達和發揮作用(2)TTAADNA連接酶(3)Ca2(4)菌落lacZ標記基因區插入外源基因后被破壞，不能表達出半乳糖苷酶，故菌落為白色(5)抗原抗體雜交10(江西新余四中高三段考理科綜合)科學家將人的生長激素基因與pBR322質粒進行重組，得到的重組質粒導

13、入牛的受精卵，使其發育為轉基因牛，再通過細胞工程培育為轉基因克隆牛。pBR322質粒含有兩個抗生素抗性基因和5個限制酶切點(如圖2)。將重組質粒導入大腸桿菌，并成功地在大腸桿菌中得以表達。請據圖回答問題。(1)圖1中顯示的人的生長激素基因是通過人工合成的，圖中過程需要的酶是_。該過程所依據的堿基互補配對原則是_(用字母和箭頭表示)。(2)圖1中的mRNA是從人體的_細胞中獲取。(3)重組質粒形成與否需要鑒定和篩選，方法是將重組質粒的DNA分子導入大腸桿菌，通過含抗生素的培養基進行培養，觀察大腸桿菌的生長、繁殖情況進行判斷，如圖3所示：如果受體菌在培養基A上能生長、繁殖形成菌落，而不能在培養基B

14、上生長、繁殖，則使用限制酶a的切點是圖2中的_，即目的基因插入了_中。如果受體菌在培養基A上不能生長、繁殖形成菌落，而在培養基B上能生長、繁殖，則使用限制酶a的切點是圖2中的_，即目的基因插入了_中。如果受體菌在培養基A和培養基B上都能生長、繁殖形成菌落，則使用限制酶a的切點是圖2中的_。解析：(1)根據圖1分析，目的基因是通過mRNA逆轉錄形成的，需要逆轉錄酶的催化；RNA中的堿基是A、U、C、G，DNA中的堿基是A、T、C、G，所以配對方式是AT、UA、GC、CG。(2)根據題意，生長激素基因是目的基因，該基因表達產物由垂體細胞分泌，所以需要從垂體細胞中提取相應的mRNA。(3)根據題意，

15、受體菌能在含青霉素的培養基上生存，不能在含四環素的培養基上生存，所以限制酶切點位于四環素基因內部，由圖可知，是切點3、4、5。根據題意，受體菌不能在含青霉素的培養基上生存，能在含四環素的培養基上生存，所以限制酶切點位于抗氨芐青霉素基因內部，由圖可知，是切點1。根據題意，受體菌能在含青霉素的培養基上生存，也能在含四環素的培養基上生存，所以這兩個基因都沒有被破壞，由圖可知，是切點2。答案：(1)逆轉錄酶ATUAGCCG(2)垂體(3)切點3或切點4或切點5抗四環素基因切點1抗氨芐青霉素基因切點211(廣西柳州市高三模擬考試理綜)如圖是從酵母菌中獲取某植物需要的某種酶的基因的流程，結合所學知識及相關

16、信息回答下列問題：(1)圖中cDNA文庫_基因組文庫(選填“大于”或“等于”或“小于”)。(2)過程提取的DNA需要_的切割，B過程是_過程。(3)為在短時間內大量獲得目的基因，可用的技術是_，其原理是_。(4)目的基因獲取之后，需要進行_，其組成必須有_及標記基因等，此步驟是基因工程的核心。(5)將該目的基因導入某雙子葉植物細胞，常采用的方法是_，其能否在此植物體內穩定遺傳的關鍵是_，可以用_技術進行檢測。解析：(1)基因組文庫包含某種生物所有的基因，部分基因文庫包含某種生物的部分基因。如：cDNA文庫。(2)過程是獲取目的基因，需要限制酶切割，B過程是由mRNA獲取DNA過程，是反轉錄過程。(3)PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術，其原理是DNA復制。(4)基因表達載體的構建是基因工程的核心，目的是使目的基因在受體細胞中穩定存