考馬斯亮藍(lán)法顯示細(xì)胞中的微絲_第1頁(yè)
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v目的要求v基本原理v實(shí)驗(yàn)用品v方法與步驟v實(shí)驗(yàn)結(jié)果v實(shí)驗(yàn)報(bào)告v掌握考馬斯亮藍(lán)的染色方法；v了解細(xì)胞內(nèi)微絲的分布。v細(xì)胞質(zhì)中錯(cuò)綜復(fù)雜的纖維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)稱為細(xì)胞骨架，主要包括微管、微絲和中間纖維。考馬斯亮藍(lán)R250是一種普通的蛋白染料，它可以使多種蛋白質(zhì)著色，由于有些細(xì)胞骨架纖維在該實(shí)驗(yàn)條件下不夠穩(wěn)定，有些類(lèi)型的纖維太細(xì)，在光學(xué)顯微鏡下無(wú)法分辨，因此我們看到的主要是微絲組成的張力纖維。張力纖維在體外培養(yǎng)細(xì)胞中普遍存在，與細(xì)胞的附著、維持扁平鋪展的形態(tài)有關(guān)。1器材：烘箱、青霉素小瓶、培養(yǎng)細(xì)胞飛片、水浴鍋、載玻片、蓋玻片。2試劑: 0.01mol/LPBS；M-緩沖液；1%TritonX-100/M緩沖液；0.2%考馬斯亮藍(lán)染液；3%戊二醛-PBS溶液；3實(shí)驗(yàn)材料：洋蔥內(nèi)表皮，培養(yǎng)細(xì)胞飛片v利用培養(yǎng)細(xì)胞為材料進(jìn)行骨架顯示時(shí),先從培養(yǎng)箱中取出培養(yǎng)細(xì)胞飛片,棄去培養(yǎng)液,加入PBS漂洗,加入1%TritonX-100/M-緩沖液處理15分鐘;洋蔥內(nèi)表皮中的微絲v繪圖表示微絲在細(xì)胞中的分布情況；v在實(shí)驗(yàn)中TritonX-100抽提起到了什么樣的作用？

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