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1、人類性染色質(zhì)標(biāo)本的制人類性染色質(zhì)標(biāo)本的制作與觀察作與觀察 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康囊弧⒘私庖弧⒘私釾染色質(zhì)的不同檢測(cè)方法及意義。染色質(zhì)的不同檢測(cè)方法及意義。二、掌握二、掌握X染色質(zhì)的形態(tài)特點(diǎn)。染色質(zhì)的形態(tài)特點(diǎn)。三、初步掌握顯微鏡下三、初步掌握顯微鏡下X染色質(zhì)的識(shí)別方法染色質(zhì)的識(shí)別方法實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理人類性染色質(zhì)人類性染色質(zhì)(sex chromatin boby)是在間期)是在間期細(xì)胞核中染色體的異染色質(zhì)部分顯示出來(lái)的一種細(xì)胞核中染色體的異染色質(zhì)部分顯示出來(lái)的一種特殊結(jié)構(gòu),其包括特殊結(jié)構(gòu),其包括X染色質(zhì)和染色質(zhì)和Y染色質(zhì)。染色質(zhì)。Lyon假說(shuō)假說(shuō):英國(guó)遺傳學(xué)家:英國(guó)遺傳學(xué)家Mary Lyon 在在196
2、1年年首先提出了上述首先提出了上述X染色體失活假說(shuō),即染色體失活假說(shuō),即Lyon假說(shuō)假說(shuō)其要點(diǎn)是:雌性哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)只有一條其要點(diǎn)是:雌性哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)只有一條X染染色體有活性,另一條失活并固縮,后者在間期細(xì)色體有活性,另一條失活并固縮,后者在間期細(xì)胞表現(xiàn)為性染色質(zhì);失活發(fā)生在胚胎的早期;胞表現(xiàn)為性染色質(zhì);失活發(fā)生在胚胎的早期;失活是隨機(jī)的,即失活的失活是隨機(jī)的,即失活的X染色體既可來(lái)自父染色體既可來(lái)自父親也可來(lái)自母親,但一個(gè)細(xì)胞某條親也可來(lái)自母親,但一個(gè)細(xì)胞某條X旦失活,旦失活,由該細(xì)胞繁衍而來(lái)的子細(xì)胞都具有同一條失活的由該細(xì)胞繁衍而來(lái)的子細(xì)胞都具有同一條失活的X染色體。染色體。 劑量補(bǔ)償效
3、應(yīng)劑量補(bǔ)償效應(yīng):使細(xì)胞核中具有兩份或兩份以上基因:使細(xì)胞核中具有兩份或兩份以上基因的個(gè)體和只有一份基因的個(gè)體出現(xiàn)相同表型的遺傳效的個(gè)體和只有一份基因的個(gè)體出現(xiàn)相同表型的遺傳效應(yīng)。應(yīng)。 對(duì)于性染色體來(lái)講,包括人類在內(nèi)的哺乳動(dòng)物雌對(duì)于性染色體來(lái)講,包括人類在內(nèi)的哺乳動(dòng)物雌性個(gè)體的每一體細(xì)胞中有兩條性個(gè)體的每一體細(xì)胞中有兩條X染色體,所以在染色體,所以在X染色染色體上的基因劑量有兩份,而雄性個(gè)體只有一條體上的基因劑量有兩份,而雄性個(gè)體只有一條 X染色染色體,基因劑量只有一份。劑量補(bǔ)償效應(yīng)使體,基因劑量只有一份。劑量補(bǔ)償效應(yīng)使 X連鎖性狀連鎖性狀的表現(xiàn)在雌雄個(gè)體之間并無(wú)不同。的表現(xiàn)在雌雄個(gè)體之間并無(wú)不
4、同。1932年美國(guó)遺傳年美國(guó)遺傳學(xué)家學(xué)家H.J.馬勒首先在果蠅中發(fā)現(xiàn)了這種效應(yīng),并把它馬勒首先在果蠅中發(fā)現(xiàn)了這種效應(yīng),并把它看作是維持雌雄兩性生物基因表達(dá)的一致所特有的一看作是維持雌雄兩性生物基因表達(dá)的一致所特有的一種遺傳效應(yīng)。種遺傳效應(yīng)。 器材器材:染色缸,顯微鏡,載玻片,鑷子,滴管,:染色缸,顯微鏡,載玻片,鑷子,滴管,擦鏡紙等。擦鏡紙等。 試劑試劑:乙醇,甲醇,冰乙酸,流堇染料,乙醚,:乙醇,甲醇,冰乙酸,流堇染料,乙醚,香柏油,甲醇冰乙醇固定液等。香柏油,甲醇冰乙醇固定液等。 材料材料:帶有毛囊的發(fā)根。:帶有毛囊的發(fā)根。 實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)材料 實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟1、取材取材 取取2 3根頭發(fā)
5、,要帶有完整的毛囊組織。根頭發(fā),要帶有完整的毛囊組織。2、軟化與涂片軟化與涂片 加加1滴滴40%醋酸軟化毛囊,醋酸軟化毛囊,5 10min后,刮下毛囊,棄發(fā)干,涂片后,刮下毛囊,棄發(fā)干,涂片1cm2大小,烘大小,烘干。干。3、固定固定 加固定液加固定液2 3滴,晾干。滴,晾干。4、水解水解 放入放入5N HCL中中10min,自來(lái)水沖洗,自來(lái)水沖洗2min,稍干后染色。稍干后染色。5、染色染色 加入數(shù)滴流堇染液,染色加入數(shù)滴流堇染液,染色10 15min沖洗,晾干。沖洗,晾干。6、觀察計(jì)數(shù)觀察計(jì)數(shù) 在顯微鏡下觀察并計(jì)數(shù)。在顯微鏡下觀察并計(jì)數(shù)。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)1、染料要現(xiàn)用現(xiàn)配。、染料要現(xiàn)用現(xiàn)配。2、要正確使用顯微鏡,避免損傷顯微鏡。、要正確使用顯微鏡,避免損傷顯微鏡。3、計(jì)數(shù)時(shí)要注意避開(kāi)干擾因
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