1、藥物非臨床安全評價關鍵技術藥物非臨床安全評價關鍵技術毒理學毒理學研究研究一般藥理一般藥理急性毒性急性毒性試驗試驗長期毒性長期毒性試驗試驗過敏性過敏性試驗試驗溶血性溶血性試驗試驗局部局部刺激性刺激性致突變試驗致突變試驗（遺傳毒性）（遺傳毒性）生殖毒性生殖毒性試驗試驗藥物依賴藥物依賴性試驗性試驗致癌試驗致癌試驗毒理學研究毒理學研究急性毒性研究：是指動物一次或急性毒性研究：是指動物一次或24 24 小時內多次給予小時內多次給予受試物后，一定時間內所產生的毒性反應。受試物后，一定時間內所產生的毒性反應。動物種屬：急性毒性試驗應采用至少動物種屬：急性毒性試驗應采用至少兩種兩種哺乳動物，哺乳動物，根據藥物

2、的特點，可選用一種根據藥物的特點，可選用一種嚙齒類動物嚙齒類動物加一種加一種非非嚙齒類動物嚙齒類動物進行試驗。進行試驗。給藥途徑：應至少包括給藥途徑：應至少包括臨床擬用途徑臨床擬用途徑和一種能使原和一種能使原型藥物較型藥物較完全進入循環的途徑完全進入循環的途徑（如靜脈注射）。如（如靜脈注射）。如果臨床擬用途徑為靜脈給藥，則僅此一種途徑即可。果臨床擬用途徑為靜脈給藥，則僅此一種途徑即可。急性毒性試驗常用試驗方法急性毒性試驗常用試驗方法最大耐受量法最大耐受量法最大給藥量法最大給藥量法半數致死量法半數致死量法固定劑量法固定劑量法上下法（階梯法，序貫法上下法（階梯法，序貫法) )近似致死劑量法近似致死

3、劑量法毒理學研究毒理學研究長期毒性長期毒性: :實驗動物長期反復給藥引起的毒性效應實驗動物長期反復給藥引起的毒性效應目的：目的： 發現受試物可能引起的發現受試物可能引起的臨床不良反應臨床不良反應，包括不良反應，包括不良反應的性質、程度、量效和時效關系、可逆性等；的性質、程度、量效和時效關系、可逆性等； 判斷受試物反復給藥的判斷受試物反復給藥的毒性靶器官或靶組織毒性靶器官或靶組織； 推測臨床試驗的推測臨床試驗的起始劑量起始劑量和重復用藥的和重復用藥的安全范圍安全范圍； 提示臨床試驗中需重點監測的提示臨床試驗中需重點監測的安全性指標安全性指標； 對毒性作用強、毒性癥狀發生迅速、安全范圍小的化對毒性

4、作用強、毒性癥狀發生迅速、安全范圍小的化合物，長期毒性研究還可以為臨床試驗中的合物，長期毒性研究還可以為臨床試驗中的解毒或解救措施解毒或解救措施提提供參考。供參考。試驗動物試驗動物1 1、試驗動物種屬或品系的選擇、試驗動物種屬或品系的選擇長期毒性研究一般采用兩種試驗動物，一種為嚙齒類，另一種長期毒性研究一般采用兩種試驗動物，一種為嚙齒類，另一種 為非嚙齒類。為非嚙齒類。 對受試物的生物轉化與人體相近；對受試物的生物轉化與人體相近； 對受試物敏感；對受試物敏感； 已有大量歷史對照數據。已有大量歷史對照數據。通常以通常以大鼠大鼠和和BeagleBeagle犬犬或或猴猴作為長期毒性研究的試驗動物。某

5、作為長期毒性研究的試驗動物。某些特殊結構的受試物應選用特殊種屬或品系的動物進行長期毒些特殊結構的受試物應選用特殊種屬或品系的動物進行長期毒性研究。鼓勵在長期毒性研究前采用體外試驗體系對試驗動物性研究。鼓勵在長期毒性研究前采用體外試驗體系對試驗動物的種屬或品系進行選擇。的種屬或品系進行選擇。毒理學研究毒理學研究給藥劑量：給藥劑量： 長期毒性研究一般至少設長期毒性研究一般至少設高、中、低高、中、低三個劑量給藥組和一三個劑量給藥組和一個個賦形劑對照組賦形劑對照組，必要時還需設立正常對照組或陽性對照組。，必要時還需設立正常對照組或陽性對照組。 高劑量原則上應使動物產生高劑量原則上應使動物產生明顯的毒性

6、反應明顯的毒性反應。 低劑量原則上應高于同種動物藥效學試驗的有效劑量或預低劑量原則上應高于同種動物藥效學試驗的有效劑量或預期臨床治療劑量的等效劑量，并不使動物出現毒性反應。期臨床治療劑量的等效劑量，并不使動物出現毒性反應。 中劑量應在高劑量和低劑量之間設立。中劑量應在高劑量和低劑量之間設立。毒理學研究毒理學研究 給藥途徑：原則上應與給藥途徑：原則上應與臨床用藥途徑臨床用藥途徑一致一致 給藥頻率：原則上長期毒性研究中動物應給藥頻率：原則上長期毒性研究中動物應每天每天給藥給藥，給藥期限，給藥期限超過超過3 3個月個月的藥物的藥物每周至少應給藥每周至少應給藥6 6天天。特殊類型的受試物由于其毒性特點

7、和臨床給藥。特殊類型的受試物由于其毒性特點和臨床給藥方案等原因，應根據具體藥物的特點設計給藥頻率。方案等原因，應根據具體藥物的特點設計給藥頻率。毒理學研究毒理學研究過敏反應概念過敏反應概念: : 過敏反應又稱變態反應，是指機體受同一抗原再刺激后過敏反應又稱變態反應，是指機體受同一抗原再刺激后產生的一種表現為組織損傷或生理功能紊亂的特異性免疫反產生的一種表現為組織損傷或生理功能紊亂的特異性免疫反應，是異常或病理性免疫反應。應，是異常或病理性免疫反應。毒理學研究毒理學研究溶血性試驗概念溶血性試驗概念: : 觀察受試物是否引起溶血和紅細胞凝聚等反應。觀察受試物是否引起溶血和紅細胞凝聚等反應。分類分類

8、: : 免疫和非免疫溶血免疫和非免疫溶血. .有體內溶血試驗和體外溶血試驗有體內溶血試驗和體外溶血試驗 某些注射劑型，由于含有溶血成分如某些注射劑型，由于含有溶血成分如皂甙皂甙或物理、化或物理、化學及生物等方面的原因，注入血管后可產生溶血作用；也學及生物等方面的原因，注入血管后可產生溶血作用；也有些注射劑中因含有有些注射劑中因含有鞣質鞣質等雜質成分，注入血管后可產生等雜質成分，注入血管后可產生血細胞凝聚，引起血液循環功能障礙等不良反應；另外，血細胞凝聚，引起血液循環功能障礙等不良反應；另外，有些對免疫系統有影響的藥物，也會因免疫反應引起免疫有些對免疫系統有影響的藥物，也會因免疫反應引起免疫性溶

9、血。性溶血。 凡是注射劑和可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血反凡是注射劑和可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血反應的其他藥物制劑均應進行溶血性試驗。應的其他藥物制劑均應進行溶血性試驗。毒理學研究毒理學研究局部刺激性試驗：局部刺激性試驗： 指非口服給藥制劑給藥后對給藥部位產生的可逆性炎癥指非口服給藥制劑給藥后對給藥部位產生的可逆性炎癥反應。刺激性試驗是觀察動物的血管、肌肉、皮膚、粘膜等反應。刺激性試驗是觀察動物的血管、肌肉、皮膚、粘膜等部位接觸受試物后是否引起紅腫、充血、滲出、變性或壞死部位接觸受試物后是否引起紅腫、充血、滲出、變性或壞死等局部反應。等局部反應。毒理學研究毒理學研究致突變（遺傳毒性）試

10、驗概念：致突變（遺傳毒性）試驗概念： 研究受試物對生物遺傳結構的損害作用及規律研究受試物對生物遺傳結構的損害作用及規律目的目的: : 檢測受試物能否引起檢測受試物能否引起DNADNA損傷損傷, ,研究其遺傳毒作用研究其遺傳毒作用的特點及對人類的潛在危害的特點及對人類的潛在危害毒理學研究毒理學研究遺傳毒性主要研究內容：遺傳毒性主要研究內容： Ames Ames試驗試驗: :鼠傷寒沙門氏菌回復突變試驗鼠傷寒沙門氏菌回復突變試驗 微核試驗微核試驗 染色體畸變試驗（染色體畸變試驗（CHLCHL細胞、人外周血）細胞、人外周血） MLA(L5178Y) MLA(L5178Y)毒理學研究毒理學研究生殖毒性試

11、驗概念：生殖毒性試驗概念： 評價受試物對生殖和發育的毒性試驗評價受試物對生殖和發育的毒性試驗目的：目的： 研究受試物對哺乳動物生殖發育的任何有害影響研究受試物對哺乳動物生殖發育的任何有害影響, ,并并將研究結果與所有其它毒理將研究結果與所有其它毒理/ /藥理資料聯系起來藥理資料聯系起來, ,推測對人推測對人可能造成的生殖危險可能造成的生殖危險毒理學研究毒理學研究生殖毒性試驗主要研究內容：生殖毒性試驗主要研究內容：1.1.生育力和早期胚胎發育毒性試驗生育力和早期胚胎發育毒性試驗(段段) )2.2.胚胎胚胎- -胎體毒性試驗胎體毒性試驗( (致畸試驗致畸試驗,段段) )3.3.出生前和出生后發育毒

12、性試驗出生前和出生后發育毒性試驗( (圍生期毒性試驗圍生期毒性試驗,段段) )毒理學研究毒理學研究致癌試驗：致癌試驗： 用來確定受試物對試驗動物的致癌性用來確定受試物對試驗動物的致癌性, ,劑量劑量- -反應關系反應關系及誘發腫瘤的靶器官及誘發腫瘤的靶器官主要研究內容主要研究內容(ICH)(ICH)：小鼠和倉鼠小鼠和倉鼠18-2418-24個月個月大鼠大鼠24-3024-30個月個月替代試驗替代試驗毒理學研究毒理學研究藥物依賴性試驗主要研究內容：藥物依賴性試驗主要研究內容： 身體依賴性試驗身體依賴性試驗 自然戒斷試驗自然戒斷試驗 替代試驗替代試驗 催促試驗催促試驗 誘導試驗誘導試驗 精神依賴性

13、試驗精神依賴性試驗SFDASFDA對中藥申報資料的毒理學要求對中藥申報資料的毒理學要求中藥申報資料說明：中藥申報資料說明：過敏性、溶血性和局部刺激性、依賴性等：根據過敏性、溶血性和局部刺激性、依賴性等：根據藥物給藥途徑及制劑特點提供相應的制劑安全性試驗資藥物給藥途徑及制劑特點提供相應的制劑安全性試驗資料。具有依賴性傾向的新藥，應提供藥物依賴性試驗資料。具有依賴性傾向的新藥，應提供藥物依賴性試驗資料。（特別注意料。（特別注意中藥注射液中藥注射液）致突變試驗：如果處方中含有無致突變試驗：如果處方中含有無法定標準的藥材法定標準的藥材，或來源于或來源于無法定標準藥材的有效部位無法定標準藥材的有效部位，

14、以及，以及用于育齡人用于育齡人群并可能對生殖系統產生影響的新藥群并可能對生殖系統產生影響的新藥（如避孕藥、性激（如避孕藥、性激素、治療性功能障礙藥、促精子生成藥保胎藥或有細胞素、治療性功能障礙藥、促精子生成藥保胎藥或有細胞毒作用等的新藥），應報送毒作用等的新藥），應報送致突變試驗資料致突變試驗資料。生殖毒性試驗：用于生殖毒性試驗：用于育齡人群并可能對生殖系統產生影響育齡人群并可能對生殖系統產生影響的的新藥（如避孕藥、性激素、治療性功能障礙藥、促精子生成藥、保新藥（如避孕藥、性激素、治療性功能障礙藥、促精子生成藥、保胎藥以及致突變試驗陽性或有細胞毒作用等的新藥），應根據具胎藥以及致突變試驗陽性或

15、有細胞毒作用等的新藥），應根據具體情況提供相應的生殖毒性研究資料。體情況提供相應的生殖毒性研究資料。致癌試驗：新藥在長期毒性試驗中發現致癌試驗：新藥在長期毒性試驗中發現有細胞毒作用有細胞毒作用或者對或者對某些某些臟器組織生長有異常促進作用臟器組織生長有異常促進作用的以及的以及致突變試驗結果為陽性致突變試驗結果為陽性的的必須提供致癌試驗資料及文獻資料。必須提供致癌試驗資料及文獻資料。對于對于“注冊分類注冊分類1”1”的未在國內上市銷售的從植物、動物、的未在國內上市銷售的從植物、動物、礦物等中提取的有效成分及其制劑，礦物等中提取的有效成分及其制劑，當有效成分或其代謝產物與已當有效成分或其代謝產物與

16、已知致癌物質有關或相似知致癌物質有關或相似、預期連續用藥、預期連續用藥6 6個月以上個月以上或或治療慢性反復治療慢性反復發作性疾病發作性疾病而需經常間歇使用時，必須提供致癌性試驗資料。而需經常間歇使用時，必須提供致癌性試驗資料。 傳統中藥復方制劑的主治病證在傳統中藥復方制劑的主治病證在國家中成藥標準中國家中成藥標準中沒有收載沒有收載，有下列情況之一者需提供毒理試驗資料：一是含，有下列情況之一者需提供毒理試驗資料：一是含有法定標準中標示有毒性及現代毒理學證明有毒性的藥材；有法定標準中標示有毒性及現代毒理學證明有毒性的藥材；二是含有十八反、十九畏的配伍禁忌。二是含有十八反、十九畏的配伍禁忌。 中藥

17、、天然藥物和化學藥品組成的復方制劑應當提中藥、天然藥物和化學藥品組成的復方制劑應當提供中藥、天然藥物和化學藥品間藥效、毒理相互影響（增效、供中藥、天然藥物和化學藥品間藥效、毒理相互影響（增效、減毒或互補作用）的比較性研究試驗資料減毒或互補作用）的比較性研究試驗資料 改變劑型時，如果生產工藝有質的改變，申報資料改變劑型時，如果生產工藝有質的改變，申報資料應當提供新制劑與原制劑在制備工藝、劑型、質量標準、穩應當提供新制劑與原制劑在制備工藝、劑型、質量標準、穩定性、藥效學、臨床等方面的對比試驗及毒理學的研究資料。定性、藥效學、臨床等方面的對比試驗及毒理學的研究資料。現場核查的實施及關注的重要環節現場

18、核查的實施及關注的重要環節 根據注冊分類確定需要做的藥理毒理資料根據注冊分類確定需要做的藥理毒理資料 查看研究報告是否齊全查看研究報告是否齊全 如系委托研究需查看委托合同如系委托研究需查看委托合同 毒理研究需要查看注冊分類和毒理研究需要查看注冊分類和GLPGLP依從性要求依從性要求為人用藥品注冊目的而進行的非臨床安全性評價：為人用藥品注冊目的而進行的非臨床安全性評價：單次給藥毒性試驗單次給藥毒性試驗多次給藥毒性試驗多次給藥毒性試驗生殖毒性試驗生殖毒性試驗遺傳毒性試驗遺傳毒性試驗致癌性試驗致癌性試驗局部毒性試驗局部毒性試驗免疫原性試驗免疫原性試驗依賴性試驗依賴性試驗一般藥理試驗一般藥理試驗毒代動

19、力學研究毒代動力學研究具有放射性物質的安全性試驗具有放射性物質的安全性試驗具有生物危害性的安全性試驗具有生物危害性的安全性試驗現場核查的實施及關注的重要環節現場核查的實施及關注的重要環節現場核查的實施及關注的重要環節：現場核查的實施及關注的重要環節： 查有無試驗方案查有無試驗方案 查實施過程有無按方案實施及研究報告是否真實反應了研究結果查實施過程有無按方案實施及研究報告是否真實反應了研究結果 供試品：來源，批號，成份、規格、活性、濃度、配制記錄、有效期限供試品：來源，批號，成份、規格、活性、濃度、配制記錄、有效期限 動物信息：來源，發票復印件，數量動物信息：來源，發票復印件，數量 體外材料：細胞體外材料：細胞/ /菌株來源菌株來源 主要儀器設備：應該現場核對主要儀器設備：應該現場核對 研究結果與報告中數據的一致性，必要時抽取個體數據計算均數及研究結果與報告中數據的一致性，必要時抽取個體數據計算均數及SDSD現場核查的實施及關注的重要環節現場核查的實施及關注的重要環節 供試品信息：批號和第一次給藥時間，藥品的組方有效期供試品信息：批號和第一次給藥時間，藥品的組方有效期 配藥記錄：抽查配制過程有無誤差，核查出入是否平衡。配藥記錄：抽查配制過程有無誤差，核查出入是否平衡。 動物信息：動物接收時間和數據采集時間，回收動物的清洗期動物信息：動