1、金銀花葉制作綠茶工藝及主要功能性成分含量研究摘要：金銀花葉片有著與金銀花同樣的功效，以封丘金銀花葉片為原料，按綠茶制作工藝，探討金銀花葉制作綠茶方法；溫度作為影響綠茶品質的重要因素，設計不同溫度條件下制作的金銀花綠茶，用紫外-可見分光光度法和高效液相色譜法分別測定金銀花葉及綠茶的總黃酮和綠原酸含量，結果表明：金銀花葉制作綠茶后總黃酮和綠原酸含量相當可觀；結合金銀花葉綠茶的感官評價，建立金銀花葉綠茶制作工藝及理論數據；綜合開發利用金銀花，提高其經濟價值。關鍵詞：金銀花葉綠茶工藝綠原酸黃酮金銀花（學名：Lonicerajaponica）為忍冬科植物，具有清熱解毒1-2、抗菌消炎之功效，是最常用的中

2、藥之一。金銀花和葉都含綠原酸、黃酮類等有效成分，具有較為廣泛的抗菌消炎作用，金銀花葉中綠原酸含量稍低于花的含量，但葉中的總黃酮含量高于花的含量，表明金銀花葉片跟花有著同樣的功效3。文獻報道，金銀花葉粗提取物的抑菌效果與花粗提取物相同或高于花4。近年來，金銀花價格低迷，金銀花產量低，不易采摘，費時費力，且無法機械化生產，農民種金銀花積極性下降，甚至有些農民開始毀掉自己親手種的金銀花。因此綜合開發利用金銀花，提高其經濟價值，增加農民收入成為當務之急。經過多次去金銀花基地考察，發現金銀花葉產量大，資源非常豐富，金銀花每年需要3-4整形修剪，產生了大量的廢棄葉片；通過制茶工藝，制作出金銀花葉為原料的綠

3、茶，測其制茶后的功能性成分含量，結合外觀，顏色，口感等感官評價，找到最佳金銀花葉片制茶工藝，提高葉片利用率，增加農民經濟收入，提高種植金銀花的積極性。提高其經濟價值，獲得社會效益。材料與方法1.1 材料與處理2015年9月20日在新鄉市封丘縣陳固鎮金銀花種植基地，采集第三次整形修剪后的金銀花葉片。鮮葉采集后應及時攤放，厚度5cm左右,每隔2小時翻1次,攤放時間7小時左右，至葉質變軟，葉色由綠變暗綠，鮮葉減重率為10溢右時為宜。攤放后，葉質萎軟，韌性加大，殺青過程中茶汁不易外溢，又有利于鮮葉中原始香氣成分裂解,產生更多的芳香物質，從而提高成茶品質2。1.2 儀器與試劑茶葉滾筒殺青機（浙江上洋機械

4、有限公司）；茶葉揉捻機6CR-35（雷鋒茶葉機械廠）；雷鋒牌茶葉烘干機（雷鋒茶葉機械廠）；紫外可見分光光度計TU-1810;北京普析通用有限公司；安捷倫公司高效液相色譜儀agilent1200;高速萬能粉碎機FE-100，北京永光明醫療儀器廠；電子天平FA-2004,上海越平科學儀器有限公司。蘆丁標準品（中國藥品生物制品檢定所）；綠原酸標準品（中國藥品生物制品檢定所）；亞硝酸鈉，硝酸鋁，氫氧化鈉，無水乙醇都是分析純；自制高純水。1.3 金銀花葉綠茶制作工藝1.3.1 殺青：通過高溫破壞和鈍化鮮葉中的氧化酶活性，抑制鮮葉中的一系列酶的氧化，蒸發鮮葉部分水分，使葉片變柔軟，保持顏色翠綠，又便于揉捻

5、成型。滾筒殺青機預熱三分鐘；分別把殺青機調至260C、300C、340c經行殺青，根據葉片變化、顏色確定最佳殺青時間。1.3.2 回潮：殺青后的葉片放入整理箱加蓋回潮80min,使殺青后的葉片水分重新均勻分布。使茶葉質軟、好成形、折而不碎，保證美觀的條索。達到手握成團無脆聲，稍有彈性，葉質較柔軟，折梗不斷。1.3.3 揉捻：利用機械力使殺青葉在揉桶內受到推、壓、扭、和摩擦等多種力的相互作用形成緊結的條索。揉捻還使葉片細胞組織破碎，促使部分多酚類物質氧化，減少炒青金銀花葉茶的苦澀味，增加濃醇味。將葉片加入揉捻機，揉捻5min加葉片，葉片加滿后，揉捻20min加壓，揉捻50min。成條率90%U上

6、。1.3.4 攤涼：茶葉揉捻后均勻攤開，促使葉內水分分布均勻，為烘干打下基礎。1.3.5 烘干：干燥是綠白最后一道工序，也是決定品質的最后一關，干燥采用烘干機烘干。目的（1）利用高溫停止酶促氧化作用;（2）蒸發水分，緊縮茶條，使茶葉充分干燥，防止非酶促氧化，利于品質的相對固定，便于貯藏;（3）散失青臭氣，進一步提高和發展茶香。分別用3個溫度經行烘干，看品質口感及成分80c烘干-50min7攤涼包裝110c烘干-40min7攤涼包裝140c烘干-30min7攤涼包裝攤葉厚度1cm-2cm,烘干時間不超過60min。葉含水量控制在4%-6%,茶葉折梗即斷，手捻茶條成粉末，茶香明顯即可。1.4 利用

7、綠原酸、總黃酮含量和感官評價三個指標評價茶葉1.4.1 總黃酮含量測定1.4.1.1 金銀花葉溶液的制備：室溫陰干的金銀花葉片與80C、110C、140c條件下烘干的金銀花葉綠茶，分別編號樣品1,樣品2,樣品3,樣品4;粉粹成細粉，各精密稱定1.00g,分別置25ml塞錐形瓶中，加入60%L醇7液25mL浸712小時,超聲處理(60C,功率250W,頻率35kHz)1h,放冷，濾過定容到100ml容量瓶中，搖勻，作為金銀花供試品溶液。1.4.1.2 紫外-可見分光光度法測定金銀花及其葉中總黃酮的含量1.4.1.3對照品溶液的制備：精密稱取蘆丁對照品0.020g,加無水乙醇置水浴上微熱使其溶解，

8、放冷，加無水乙醇至100ml容量瓶中，搖勻配制成0.20mg/ml的對照品溶液備用。1.4.1.4標準曲線的制備：精密量取對照品溶液2.00,4.00,6.00,8.00,10.00mL分別置50mL量瓶中，各加高純水10.0mL;力口5%亞硝酸鈉溶液2.00mL,混勻，放置6min;力口10%肖酸鋁溶液2.00mL,搖勻，放置6min;加4圖氧化鈉試液20mL;再加水至刻度，搖勻，放置15min。空白對照直接加蒸儲水10ml,其余試劑同上至刻度。在510nm的波長處測定吸光度，以測定的吸光度(A)為縱坐標，濃度(C)為橫坐標，繪制標準曲線，得出回歸方程為Y=0.0119x-0.001,R2=

9、0.9999。-0y=0.011x-0.00R2=0.99951015202530354045濃度.5/oO,321OooO吸光度圖1黃酮標準曲線和線性關系1.4.2高效液相色譜法測定綠原酸含量1.4.2.1 色譜條件與系統適用性確定：采用乙睛-0.5%乙酸溶液-水（2：1:7）為流動相；檢測波長為327nm;色譜柱：美國Agilent公司的ZORBAXSB-C18流速0.8ml/min,進樣量10ul;柱溫20C。1.4.2.2 對照品溶液的制備：精密稱取綠原酸標準品0.005g,加70%甲醇定容于50ml棕色量瓶中，制成每1mL含100Hg的對照品儲備液（10C以下保存）。1.4.2.3

10、繪制標準曲線及測定：取綠原酸對照品溶液（100wgmL）0、0.40、0.80、1.20、1.60、2.00、2.40mL,置10mL棕色量瓶中，力口70獅醇適量，按上述色譜條件經0.22u有機濾膜分別注入進樣瓶進樣10wL,測定峰面積。以峰面積為縱坐標，綠原酸量（wg）為橫坐標,2繪制標準曲線。得出回歸萬程Y=30593x-38.049,R=0.9971。分別吸取1、2、3、4供試品溶液各2mL,經0.22u有機濾膜分別注入進樣瓶測定。圖2綠原酸標準曲線和線性關系2結果與分析2.1樣品總黃酮含量結果樣品重量（g）A含量（）樣品1（干葉）1g0.4620.39%樣品2(80C)1g0.3930

11、.33%樣品3(110C)1g0.3620.30%樣品4(140C)1g0.2210.19%表1樣品總黃酮含量2.2樣品綠原酸含量結果樣品質量保留時間（min）峰面積含量（衿樣品11g6.460693.5211.44%樣品21g6.455686.4501.42%樣品31g6.473609.9751.27%樣品41g6.478586.2381.22%表2樣品綠原酸含量2.3感官評價:湯色滋味樣品1綠，無條形綠苦味較強顯青氣味重樣品2色澤綠潤，條形緊湊綠散發輕微花香徽苦回甘樣品3色澤綠潤，條形緊湊綠香氣弱，略顯青氣滋味淡薄，白苦味樣品4黃綠，條形緊湊黃綠有焦糊氣味滋味淡薄不同工藝綠茶感官品質的比較

12、riAU34圖3綠原酸標品的HPLCffl譜V62.4結果表明：260c殺青一葉片變深褐色，失綠，水分含量高，葉片柔軟；溫度低。300c殺青一,葉片淺褐色，稍有綠色，柔軟，手握無脆聲，水分含量高；溫度稍低。340c殺青一,葉片鮮綠轉為翠綠，以鮮葉失去光澤，梗折不斷，葉片稍卷，葉緣干燥；溫度合適。80c烘干泡茶水清湯綠葉，口感稍苦，散發金銀花香氣。110c烘干泡茶水清湯綠葉，口感苦澀，有青草氣重。140c烘干泡茶葉片呈現褐色，茶湯褐色，口感微苦，微青草氣兼有焦糊氣。保留時間：綠原酸標品(6.472min)樣品1(6.460min)樣品2(6.455min)樣品3(6.473min)樣品4(6.4

13、78min),綠原酸標準品與4個樣品保留(出峰)時間一致，確定是綠原酸；根據總黃酮和綠原酸的含量，可以看出金銀花葉制茶后，總黃酮和綠原酸略微減少，可能是在采摘葉片后，儲運過程中的降解，制茶工藝未促進總黃酮和綠原酸的降解；在80c條件下烘干總黃酮和綠原酸含量較高，效果較好。3討論與結論按照：采摘鮮葉一殺青一回潮一揉捻一攤涼一烘干，制做金銀花葉綠茶。340c殺青效果最好，殺青后葉片翠綠，保證了綠茶顏色；回潮80分鐘手握成團無脆聲，稍有彈性，葉質較柔軟，折梗不斷；以110c條件下烘干泡茶清湯綠葉，口感較好、散發金銀花香氣是最佳效果；總黃酮和綠原酸含量在80c條件下烘干呈現最大值，并且含量相當可觀。綜

14、合因素，在340c殺青，80c下烘干，金銀花葉綠茶黃酮和綠原酸含量最高，顏色，口感最佳。制作出來的金銀花葉綠茶條形緊湊，顏色翠綠；沖泡出來的茶水清湯綠葉，香氣濃郁，湯色嫩綠清澈，葉底嫩勻肥厚明亮，有金銀花香味；亦有清熱解毒、抗菌消炎功效。本實驗將綠茶制作工藝與金銀花葉片結合起來，找到了最佳制茶工藝，收集每年3-4次整形修剪后的葉片，制成金銀花葉綠茶，提高的金銀花的附加值和葉片利用率，增加農民經濟收入，提高種植金銀花的積極性，獲得社會效益。參考文獻：1ShangXF,PanH,LiMX,etal.LonicerajaponicaThunb.:Ethnopharmacology,phytochemistryandpharmacologyofanim-portanttraditionalChinesemedicineJ.JournalofEthnopharmacology,2