1、1 生物制生物制2主要內容主要內容 一、生物制品定義一、生物制品定義二、生物制品種類二、生物制品種類三、生物制品的基本屬性和特點三、生物制品的基本屬性和特點四、生物制品的管理四、生物制品的管理五、生物制品五、生物制品GMP現場檢查要點現場檢查要點3一、生物制品定義一、生物制品定義 生物制品生物制品( (Biological Products)是應用普通的或以基因工程、細胞工程、蛋白質工程、發酵工程等生物技術獲得的微生物、細胞及各種動物和人源的組織和液體等生物材料制備，用于疾病預防、治療和診斷的藥品。4二、生物制品分類二、生物制品分類 按生物制品的組成和性質可分為按生物制品的組成和性質可分為:

2、:n疫苗（疫苗（VaccinesVaccines）n抗毒素及免疫血清抗毒素及免疫血清(Antitoxin and Antisera)(Antitoxin and Antisera)n血液制品（血液制品（Blood ProductsBlood Products）n細胞因子和重組細胞因子和重組DNADNA產品（產品（Cytokines and Cytokines and Recombinant DNA ProductsRecombinant DNA Products）n診斷制品診斷制品(Diagnostic Reagents)(Diagnostic Reagents)n其他制品其他制品5細菌類疫苗

3、細菌類疫苗 由細菌、螺旋體或其衍生物制備而成，包括：由細菌、螺旋體或其衍生物制備而成，包括：n減毒活疫苗：卡介苗、人用炭疽和人用鼠疫減毒活疫苗：卡介苗、人用炭疽和人用鼠疫疫苗等疫苗等n滅活疫苗：霍亂菌體疫苗、鉤端螺旋體疫苗滅活疫苗：霍亂菌體疫苗、鉤端螺旋體疫苗等等n重組重組DNADNA疫苗：重組瘧疾疫苗、重組幽門螺疫苗：重組瘧疾疫苗、重組幽門螺桿菌疫苗等桿菌疫苗等6病毒類疫苗病毒類疫苗 由病毒、衣原體、立克次體或其衍生物制備由病毒、衣原體、立克次體或其衍生物制備而成，包括：而成，包括：n減毒活疫苗：乙型腦炎減毒疫苗、麻疹疫苗、減毒活疫苗：乙型腦炎減毒疫苗、麻疹疫苗、風疹疫苗等風疹疫苗等n滅活疫

4、苗：乙型腦炎滅活疫苗、出血熱疫苗、滅活疫苗：乙型腦炎滅活疫苗、出血熱疫苗、狂犬疫苗等狂犬疫苗等重組重組DNADNA疫苗：重組乙肝疫苗等疫苗：重組乙肝疫苗等7聯合疫苗聯合疫苗 由兩種或兩種以上疫苗抗原原液配制而成由兩種或兩種以上疫苗抗原原液配制而成的具有多種免疫原性的疫苗。的具有多種免疫原性的疫苗。 例如：例如： 吸附百白破聯合疫苗吸附百白破聯合疫苗 麻腮風三聯疫苗麻腮風三聯疫苗 8抗毒素及免疫血清抗毒素及免疫血清 由特定抗原免疫的動物血清而制備由特定抗原免疫的動物血清而制備 主要產品：主要產品： 白喉抗毒素白喉抗毒素 破傷風抗毒素破傷風抗毒素 抗狂犬病血清等抗狂犬病血清等9血液制品血液制品 由

5、健康人的血漿或特異免疫人血漿分離、由健康人的血漿或特異免疫人血漿分離、提純或由重組技術制成的血漿蛋白組分或血細提純或由重組技術制成的血漿蛋白組分或血細胞組分制品胞組分制品 。 主要產品：主要產品：人血白蛋白人血白蛋白 人免疫球蛋白人免疫球蛋白 人凝血因子等人凝血因子等 10免疫調節劑免疫調節劑 由健康人血細胞增殖、分離、提純或由健康人血細胞增殖、分離、提純或 由重組技術制成的多肽類或蛋白類制劑。由重組技術制成的多肽類或蛋白類制劑。 主要產品：干擾素主要產品：干擾素(IFN)(IFN) 白細胞介素白細胞介素(IL)(IL) 集落刺激因子集落刺激因子(CSF) (CSF) 紅細胞生成素紅細胞生成素

6、 (EPO)(EPO)等等 11診斷制品診斷制品 由特定抗原、抗體或有關生由特定抗原、抗體或有關生物物質制成的用于體外診斷疾病的試劑或試物物質制成的用于體外診斷疾病的試劑或試劑盒，如傷寒、副傷寒等細菌的診斷菌液，劑盒，如傷寒、副傷寒等細菌的診斷菌液，沙門氏菌屬診斷血清等。沙門氏菌屬診斷血清等。 由抗原制成的用于體內診斷由抗原制成的用于體內診斷疾病的試劑，如卡介苗純蛋白衍生物（疾病的試劑，如卡介苗純蛋白衍生物（BCG-BCG-PPDPPD）、標記的單克隆抗體等。）、標記的單克隆抗體等。 12其他制品其他制品 由有關生物材料或特定方法制成由有關生物材料或特定方法制成的，上述的，上述5 5類產品以外

7、的生物制品，如類產品以外的生物制品，如變態反應原、微生態制劑、重組變態反應原、微生態制劑、重組DNADNA產品、基因治療產品、單克隆抗體制產品、基因治療產品、單克隆抗體制劑、某些細胞治療制劑等。劑、某些細胞治療制劑等。13生物制品按用途分類生物制品按用途分類 疫苗疫苗、類毒素、類毒素、被動免疫制劑被動免疫制劑 免疫學診斷試劑、基因診斷試劑、免疫學診斷試劑、基因診斷試劑、 生化試劑生化試劑 血液制劑、細胞因子制劑、酶和激素、血液制劑、細胞因子制劑、酶和激素、 特異性抗體特異性抗體、非特異性免疫治療制劑、非特異性免疫治療制劑、 基因及細胞治療制品等基因及細胞治療制品等 14預防類生物制品預防類生物

8、制品減毒活疫苗與滅活疫苗的比較減毒活疫苗與滅活疫苗的比較減毒活疫苗減毒活疫苗滅活疫苗滅活疫苗注射一次即可有效注射一次即可有效接種后似自然感染，接種后似自然感染，形成完整免疫形成完整免疫可多種抗原混合制成多價疫可多種抗原混合制成多價疫苗苗抗原性穩定抗原性穩定經過滅活處理不會污染其它經過滅活處理不會污染其它病原病原可提純抗原，加入佐劑增加可提純抗原，加入佐劑增加免疫效果免疫效果抗原不穩定，滅活即抗原不穩定，滅活即失效失效易污染其它病原易污染其它病原一般需注射一般需注射23次才明顯有次才明顯有效效一般僅產生體液免疫一般僅產生體液免疫抗原要求量大，制造工藝較抗原要求量大，制造工藝較繁瑣繁瑣15三、生物

9、制品的基本屬性和特點三、生物制品的基本屬性和特點（一）（一） 其起始材料均為生物活性物質；生物制品生產加工全過程是生物學過程，是無菌操作過程；有些生物制品的生產過程是有毒或有菌的過程;生物制品多為蛋白質或多肽類物質，分子量較大，并具有復雜的分子結構, 較不穩定，易失活，易被微生物污染，易被酶解破壞。16三、生物制品的基本屬性和特點三、生物制品的基本屬性和特點（二）（二）其質量控制和質量檢定是采用生物學分析方法，其效價或生物活性檢定有其變異性；生物制品原材料、中間品、成品、運輸、貯存、甚至使用保持在“冷鏈”系統中；特別是預防制品使用對象不是病人，而是健康人群；生物制品的質量控制實行生產全過程監控

10、; 生產現場檢查時要充分考慮這些特點17四、生物制品的管理生物制品國家管理生物制品國家管理6 6項基本職能項基本職能 1完整的疫苗和生物制品審批程序和審批標準的法規文件； 2審批結論要以實驗和臨床試驗數據為依據； 3國家質控當局對疫苗和生物制品出廠銷售實行國家批簽發制度； 4要有對疫苗和生物制品進行質量評價的法定的實驗檢定機構和實驗實施； 5對生物制品生產企業實施GMP定期檢查； 6對生物制品有效性和不良反應進行上市后檢測。18生物制品實行國家批簽發生物制品實行國家批簽發 藥品管理法實施辦法中規定，國家對所規定的生物制品實行國家批簽發制度。 國家批簽發國家藥品監督管理部門授權國家藥品檢定機構，

11、對所規定的生物制品，在出廠前或進口時，按批進行審查和簽發，凡審查或檢定不合格的不允許銷售或者進口。19生物制品國家批簽發分為三種類型生物制品國家批簽發分為三種類型一、僅對某種制品每批的批記錄摘要進行審查，符合要求發給批簽發證；二、審查批記錄摘要 對部分批次制品進行抽檢檢定、審查和檢定符合要求發給批簽發證；三、審查批記錄摘要 批批檢定，審查和批批檢定符合要求發給批簽發證。20菌種篩選#種子批的#建立及檢定菌種接種#原液合并半成品*配置殺 菌原液收獲#擴大培養原液保存分 裝*包 裝檢 定圖圖- 細菌疫苗工藝流程及環境區域劃分示意圖細菌疫苗工藝流程及環境區域劃分示意圖21毒種篩選#種子批的#建立及檢

12、定毒種接種#培養細胞原液合并半成品*配置病毒滅活病毒的收獲過濾 #擴大細胞培養病毒原液保存分 裝*包 裝檢 定圖圖- 病毒疫苗工藝流程及環境區域劃分示意圖病毒疫苗工藝流程及環境區域劃分示意圖原代細胞的制備或傳代細胞復蘇減毒活疫苗22細菌和病毒類疫苗質控要點細菌和病毒類疫苗質控要點 1所有原輔材料符合中國藥典或中國生物制品主要原輔料質量標準； 2采用強毒菌株（鼠疫、霍亂、炭疽等）、芽胞菌和強毒病毒株，應有專用生產操作間，專用生產設備及隔離實施，操作人員應有安全防護設施； 3所用生產的菌株或病毒株，要建立原始種子批、主代種子批、生產種子批三級種子批系統；病毒疫苗生產用細胞也要建立上述三級細胞庫系統

13、； 4菌苗及疫苗原液、中間品合并、分離、純化等每道加工工序后均要做無菌試驗和鑒別試驗；23細菌和病毒類疫苗質控要點細菌和病毒類疫苗質控要點 5細菌類及病毒類的滅活疫苗，加入滅活劑后，必須要做活菌或活毒試驗，確保徹底滅活； 6原材料、半成品及成品，應按現行中國生物制品規程相關標準進行檢定； 7對制品的安全、效價或免疫力試驗等項目檢定所用實驗動物應符合清潔級； 8從起始材料直至使用，全過程，必須無菌操作，制品28保存； 9生物制品生產用水均為注射用水。24血漿合并病毒滅活精 洗滅菌除熱原低溫乙醇法超濾濃縮入 庫外包材血漿內包材圖圖- 血液制品工藝流程及環境區域劃分示意圖血液制品工藝流程及環境區域劃

14、分示意圖除菌過濾*分 裝*包 裝粗 洗25 血液制品質量控制要點血液制品質量控制要點 1生產用具，經過嚴格清洗、去熱原處理、滅菌處理； 2原料血漿要經過乙肝、丙肝、艾滋、梅毒、ABO定型診斷試劑檢測合格，-20以下保存； 3生產工藝采用低溫乙醇法分部提取各組份；工藝中應有去除/滅活病毒工藝步驟； 4原液、半成品、成品符合現行中國生物制品規程相應標準； 5所用血源檢測和成品檢測的乙肝、丙肝、艾滋、梅毒等檢測的試劑均為國家批批檢定試劑。26細胞復蘇擴大培養大罐培養粗純擴大培養發酵粗純接種滅菌除熱原精洗粗洗內包材菌種細胞種子原液除菌過濾除菌過濾配制及除菌過濾分裝包裝入庫外包裝圖圖- 重組產品工藝流程

15、及環境區域劃分示意圖重組產品工藝流程及環境區域劃分示意圖原核表達真核表達27 重組重組DNADNA產品質量控制要點產品質量控制要點 1生產用工程菌株或工程細胞株要建立原始種子批、主代種子批、生產種子批系統，定期進行質粒穩定性檢查； 2發酵用培養基應不含抗生素，生產用細胞培養液應不含血清和抗生素； 3發酵培養過程中應根據工藝要求控制其培養溫度、pH、溶氧、輔料及培養時間； 4根據其工藝要求，通過初步純化和高度純化達到規定質量要求； 5重組產品的原液，應做：蛋白質含量、比活性、純度、效價、高效液相色譜法、分子量、外源性DNA殘留含量、宿主蛋白殘留含量、等電點；28重組重組DNADNA產品質量控制要

16、點產品質量控制要點 6半成品及成品應按現行中國生物制品規程相關標準進行檢定； 7工程菌株應進行菌落形態、革蘭氏染色、抗生素的抗性、電鏡檢查、生化反應、表達量、質粒酶切圖譜等檢查； 8工程細胞應進行外源因子（細菌、真菌、支原體、病毒）檢查、致病性實驗、細胞鑒別試驗、表達量測定等； 9重組DNA產品生產，必須按其生產所用工程菌株或工程細胞株、將原核細胞系與真核細胞系徹底分離分別進行生產。29五、生物制品五、生物制品GMPGMP檢查要點檢查要點保護環境和操作者防止交叉污染，嚴格分區，獨立空調局部負壓盡可能一個產品、一個車間徹底消毒和清場嚴格動物使用及動物管理環境溫度301強毒與弱毒“強毒”系指生物制

17、品生產及檢定用細菌株及病毒株，其致病力強，傳染性強，感染的機率高，感染后癥狀較重，可危及生命健康，甚至引起傳染病爆發流行的細菌菌株及病毒株。“弱毒”系指生物制品生產及檢定用細菌株及病毒株，經過天然或人工改造方法，去除或封閉其毒力因子，使其致病力減弱，一般不引起感染或發病的細菌菌株及病毒株。強毒株與弱毒株，不允許混放在一起，其生產及檢定操作場所須嚴格分開，并有專用設備。生物制品生物制品GMPGMP認證檢查要點認證檢查要點312死毒與活毒“活毒”是制備滅活疫苗的第一階段或減毒活疫苗生產時，將生產用細菌或病毒株進行大規模培養制備，其生產過程和生產場所、生產設備、器材含有大量活的細菌或活的病毒生物體，

18、稱之為“活毒”。“死毒”是制備滅活疫苗時，第一階段生產出大量活細菌或或病毒后，到第二階段，對活生物體加入一定量甲醛或適宜滅活劑，將全部細菌或病毒殺死，稱之為“死毒”。“活毒”與“死毒”的生產場所、生產設備及器材，須嚴格分開。生物制品生物制品GMPGMP認證檢查要點認證檢查要點323“脫毒前”與“脫毒后”“脫毒前”系指破傷風梭狀菌、白喉桿菌繁殖培養時，生產大量破傷風毒素及白喉毒素，對人體有致病性，這一階段為“脫毒前”。“脫毒后”系指毒素中加入一定量甲醛或適宜脫毒劑，將毒素去掉毒性，不再具有致病性，仍保留其抗原性和免疫原性，稱之為“脫毒后”。“脫毒前”與“脫毒后”的生產場所、生產設備及器材須嚴格分

19、開。生物制品生物制品GMPGMP認證檢查要點認證檢查要點334血液制品、抗血清、人和動物組織制備的制品，其生產所用的原材料為人血漿、動物免疫血清、人和動物器官、組織及組織液等，均含有大量的人和動物的異種蛋白質或細胞活性物質，具有較強的致敏原物質，不經過相應處理和加工，可致人體過敏反應或血清病。因此，血液制品、抗血清、人和動物組織生產制備制品時，須有專用生產場所、生產設備及器材，不可與其他生物制品混用。生物制品生物制品GMPGMP認證檢查要點認證檢查要點345芽孢菌制品，系用炭疽桿菌、破傷風梭菌、肉毒梭菌等含有芽孢菌來生產制備的制品，芽孢菌是微生物對外周環境抵抗力最強的生命單位。芽孢菌在自然界可

20、存活數十年及百年之久，100可耐受2小時以上，在70酒精中存活20年，低溫和干燥對其毫無作用。生產芽孢菌制品的生產場所、生產設備和器材須專用，與其他制品生產嚴格分開。生物制品生物制品GMPGMP認證檢查要點認證檢查要點356卡介苗與結核菌制品生產場所，必須嚴格分開，其生產設備、器材、生產用菌種必須專用，不能混用。1930年德國Lubeck地方，給251名嬰兒誤用結核菌液，而不是減毒的卡介苗，造成72名嬰兒死亡，病死率為28.68，有142名嬰兒感染結核，感染率為56.5，稱之為“Lubeck疫苗接種事故”。生物制品生物制品GMPGMP認證檢查要點認證檢查要點367衛生部衛藥第11號文中國醫學微生物菌毒種保藏管理辦法，規定一類、二類菌種和毒種為“強毒微生物”。一類：鼠疫桿菌、霍亂弧菌、天花病毒（已消滅）、黃熱病毒、馬腦炎病毒、猴皰疹病毒等。二類：布氏菌、炭疽桿菌、肉毒梭菌、麻風桿菌、結核分枝桿菌等。狂犬病毒（街毒）、流行性出血熱病毒、登革熱病毒、甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、艾滋病病毒等。生物制品生物制品GMPGMP認證檢查要點認證檢查要點378強毒操作區空氣潔凈特殊要求必須設置氣閘和緩沖區；與其他區域分開，自成一區；通過兩道連鎖門，更衣進入；在生物安全柜內操作；操作區有高壓滅菌設備；相對操作區外部保持相對負壓，相對壓強-30Pa-40Pa，緩沖相對壓強-15Pa-20Pa。生物