1、HPV分型在宮頸癌檢測工作中意義v宮頸癌成為發展中國家婦女健康和生命的“頭號殺手頭號殺手”v宮頸癌的發病趨于年輕化，發病年齡一般在40-60歲v2006年世界衛生組織指出：如不采取措施，未來10年內因子宮頸癌導致的死亡病例將上升25% 宮頸癌宮頸癌中國關注v 宮頸癌預防已納入國家醫改、重大公共衛生項目和十一五國家重大支撐計劃宮頸癌與宮頸癌與HPVHPV昨日回眸宮頸癌與宮頸癌與HPVHPV昨日回眸宮頸癌成為目前癌癥中： HPV HPV病毒學 HPV HPV基因結構HPV16早期區（早期區（E E區）區）含含6 6個基因，個基因，是維持病毒復制是維持病毒復制、編碼病毒蛋白、編碼病毒蛋白、維持細胞內

2、病、維持細胞內病毒高拷貝數的基毒高拷貝數的基因因晚期區（晚期區（L L區）區）含兩個結構蛋白最保守的區域長控制區（長控制區（LCRLCR）E6 E6 通過抑制p53p53而阻斷凋亡E7E7 通過抑制pRB使細胞周期失控E2E2：負性調節E6和E7，維持凋亡和細胞周期的調控。病毒整合時會破壞E2基因的結構，導致失活E4E4：結合并破壞中表層細胞角蛋白網，形成中表層細胞的挖空外觀L2:L2:次要衣殼蛋白抗體主要識別位點L1: L1: 主要衣殼蛋白，疫苗研發的主要成分 HPV HPV病毒分類 以病毒基因組中L1L1區區DNADNA同源性同源性作為分類依據：n 屬：L1L1區區DNADNA同源性在同源

3、性在60%60%以下以下L1L1區區DNADNA同源性介于同源性介于60%70%60%70%L1L1區區DNADNA同源性介于同源性介于7171%89%89%L1L1區區DNADNA同源性介于同源性介于9090%98%98%L1L1區區DNADNA同源性大于同源性大于98%98% HPV HPVHPV分型 HPV HPV型別分布 HPV HPV型別分布HPV引發的癌癥 HPV HPVHPVHPV與宮頸癌與宮頸癌感染途徑HPVHPV與宮頸癌與宮頸癌HPV的入侵病毒通過皮膚或粘膜的微創口進入表層，然后感染基底層或副基底層細胞，并以附加體的形式在宿主細胞核內復制。病毒的復制依賴于上皮細胞的分化，在基

4、底層上層細胞中開始復制，在表皮細胞中裝配，當這些表皮細胞脫落時，在皮膚表面可發現病毒顆粒。HPVHPV與宮頸癌與宮頸癌細胞、組織的改變一過性一過性HPV感染感染持續性持續性HPV感染感染正常宮正常宮頸頸感染感染清除清除HPV 感染感染演進演進消退消退癌前病癌前病變變癌癌浸浸潤潤 HPVHPV與宮頸癌與宮頸癌影響因子n 多個性伴侶多個性伴侶n 口服避孕藥口服避孕藥n HIVHIV、STISTI感染感染n 免疫缺陷免疫缺陷n 多產、密產多產、密產n 吸煙等吸煙等宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查篩查現狀宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查篩查對象v 所有女性應在有性生活所有女性應在有性生活3 3年開始做宮頸癌篩查年開始

5、做宮頸癌篩查 （最晚不超過（最晚不超過2121歲）歲） 2009.1 NCCN子宮頸癌篩查臨床實踐指南 2003衛生部宮頸癌篩查及早診早治指南v 高危婦女人群高危婦女人群：多個性伴侶、性生活過早、HIV/HPV感染、免疫功能低下、衛生條件差/性保健知識缺乏的婦女v 決定妊娠的婦女決定妊娠的婦女宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查技術的發展1943年巴氏涂片應用于宮頸癌的篩查1988年TCT應用于宮頸癌的篩查2003年高危HPV(HC2)應用于宮頸癌的篩查(輔助)2004年中國指南HPV+TCT為最佳宮頸癌篩查手段2007年歐洲EUROGIN 推薦HPV作為宮頸癌篩查首選手段2011年HPV分型檢測是國際公

6、認最重要的宮頸癌篩查手段2005年IARC/WHO推薦HPV檢測可以用于宮頸癌篩查2006年HPV分型檢測（凱普）應用于宮頸癌篩查宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查巴氏涂片的應用v 對婦女健康作出很大貢獻v 局限性: 取樣誤差 / 制片誤差 / 讀片誤差v 敏感性差、假陰性率高（2%50%）、假陽性率高、漏診多v 可重復性差，受閱片人主觀影響正常高度病變HSIL低度病變LSIL癌變Cancer宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查TCT的應用v 準確性97%v 敏感度低，尤其是腺體病變v 重復性差重復性差，沒有改變傳統的閱片方式，與人為主觀因素相關宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查HPV DNA檢測細胞學檢測細胞學檢測HPV

7、DNAHPV DNA檢測檢測對細胞形態改變的檢查手段對病原體檢查手段針對結果，評估臨床階段針對病因，評估發病風險敏感性相對稍低敏感性高方法不易質控方法易于質控宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查有充足的證據表明：HPV DNA檢測可作為子宮頸癌的初篩手段，并可以降低子宮頸癌的發病率和死亡率。-IARC/WHO，2005HPV檢測為首選宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查HPV+TCT的應用歐洲生殖道感染和腫瘤組織（歐洲生殖道感染和腫瘤組織（EUROGIN)2007EUROGIN)2007年提出的宮頸癌篩查方案年提出的宮頸癌篩查方案宮頸癌的篩查宮頸癌的篩查HPV分型的應用HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應用v HPVH

8、PV分型檢測用于分型檢測用于區分一過性感染或持續性感染區分一過性感染或持續性感染HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應用v HPVHPV分型檢測用于分型檢測用于區分單一感染或多重感染區分單一感染或多重感染n 早期的文獻報道，HPV的多重感染與宮頸癌直接相關n 現在越來越多的報道發現，HPV的多重感染與宮頸癌之間，不存在顯著性的關系n 不同型別的致癌風險不同不同的高危型促進LSIL向SCC轉變的能力有差異。 HPV16，18 的致宮頸癌風險性大于其他高危型HPV。HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應用v HPVHPV分型檢測用于分型檢測用于陰道鏡適應征陰道鏡適應征HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應用v

9、 HPVHPV分型檢測用于分型檢測用于陰道鏡適應征陰道鏡適應征n 20092009年，美國陰道鏡和宮頸病理學會（年，美國陰道鏡和宮頸病理學會（ASCCPASCCP）發布了）發布了HPV HPV 基因分型基因分型檢測指南，明確指出檢測指南，明確指出: 30: 30婦女，細胞學未見上皮內病變和惡性細胞婦女，細胞學未見上皮內病變和惡性細胞，; ;其他其他HPVHPV高危型，則在高危型，則在1212個月后重復個月后重復HPV HPV DNADNA檢測和細胞學檢查。檢測和細胞學檢查。（American Society for Colposcopy and American Society for Col

10、poscopy and Cervical Pathology, 2009Cervical Pathology, 2009）n 20102010年，年，楊英捷、趙健、畢蕙等人的研究數據表明，等人的研究數據表明，HPV31HPV31、3333的致癌的致癌風險也很高，建議風險也很高，建議HPV31HPV31、3333直接行陰道鏡檢測直接行陰道鏡檢測HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應用v HPVHPV分型檢測用于分型檢測用于ASCUSASCUS分層管理分層管理 NCCN 子宮頸癌篩查臨床實踐指南 (源自英文版V12009)指出：對發生在成年人的ASC-US&LSIL有3個可供選擇的方案，可選擇

11、HPV-DNA檢測將患者分流、6個月復查細胞學或立即陰道鏡檢查。n 直接陰道鏡檢查或多點病理活檢，引起創傷和過度診治（40-60%）n 重復細胞學檢查，有25%失訪率，此外復檢會增加病人經濟及精神負擔n HPV檢測：為目前的最優方法。HPV檢測陰性，可列入常規篩查人群；如HPV檢測陽性，則考慮配合陰道鏡檢查HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應用v HPVHPV分型檢測用于分型檢測用于宮頸病變的隨訪宮頸病變的隨訪 宮頸病變治療后失敗失敗的主要原因是同一基因型同一基因型HPVHPV的持續性感染的持續性感染n 社會因素：家族性遺傳n 特性：宮頸解剖結構HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應用v HPVHP

12、V分型檢測用于分型檢測用于宮頸病變的隨訪宮頸病變的隨訪HPVHPV分型檢測分型檢測臨床應用v HPVHPV分型檢測用于分型檢測用于指導疫苗的開發指導疫苗的開發n 針對衣殼蛋白（針對衣殼蛋白（L1L1）的）的IgGIgG和和IgAIgA中和抗體在病毒感染的早期較為重要中和抗體在病毒感染的早期較為重要-預防性疫預防性疫苗苗n 針對早期基因（針對早期基因（E6/E7E6/E7）的細胞免疫反應對最終清除病毒可能更為重要）的細胞免疫反應對最終清除病毒可能更為重要-治療性疫苗治療性疫苗n 根據不同地區根據不同地區HPVHPV型別的流行情況，開發有針對性的疫苗型別的流行情況，開發有針對性的疫苗34檢測原理凱普凱普HPV21HPV21分型分型v PCRPCR，Polymerase Chain Reaction（聚合酶鏈式反應）v 導流雜交技術導流雜交技術（凱普自主創