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1、PCRS計(jì)引物時(shí)酶切位點(diǎn)的保護(hù)酶募核甘酸序列切割率%2hr20hrAccIGGTCGACC00CGGTCGACCG00CCGGTCGACCGG00AflIIICACATGTG00CCACATGTGG9090CCCACATGTGGG9090AscIGGCGCGCC9090AGGCGCGCCT9090TTGGCGCGCCAA9090AvaICCCCGGGG5090CCCCCGGGGG9090TCCCCCGGGGGA9090BamHICGGATCCG1025CGGGATCCCG9090CGCGGATCCGCG9090BglIICAGATCTG00GAAGATCTTC7590GGAAGATCTTCC2

2、590BssHIIGGCGCGCC00AGGCGCGCCT00TTGGCGCGCCAA5090BstEIIGGGT(A/T)ACCC010BstXIAACTGCAGAACCAATGCATTGG00AAAACTGCAGCCAATGCATTGGAA2550CTGCAGAACCAATGCATTGGATGCAT2590ClaICATCGATG00GATCGATC00CCATCGATGG9090CCCATCGATGGG5050EcoRIGGAATTCC9090CGGAATTCCG9090CCGGAATTCCGG9090HaeIIIGGGGCCCCAGCGGCCGCTTTGCGGCCGCAA9090909

3、09090HindIIICAAGCTTG00CCAAGCTTGG00CCCAAGCTTGGG1075KpnIGGGTACCC00GGGGTACCCC9090CGGGGTACCCCG9090MluIGACGCGTC00CGACGCGTCG2550NcoICCCATGGG00CATGCCATGGCATG5075NdeICCATATGG00CCCATATGGG00CGCCATATGGCG00GGGIIICAIAIGAAACCC00GGAATTCCAIAIGGAAIICC7590GGGAAIICCAIAIGGAAIICCC7590NheIGGCIAGCC00CGGCIAGCCG1025CIAGCIAG

4、CIAG1050NotIIIGCGGCCGCAA00AIIIGCGGCCGCIIIA1010AAAIAIGCGGCCGCIAIAAA1010AIAAGAAIGCGGCCGCIAAACIAI2590AAGGAAAAAAGCGGCCGCAAAAGGAAAA2590NsiIIGCAIGCAIGCA1090CCAAIGCAIIGGIICIGCAGII9090PacIIIAAIIAA00GIIAAIIAAC025CCIIAAIIAAGG090PmeIGIIIAAAC00GGIIIAAACC025GGGIIIAAACCC050AGCIIIGIIIAAACGGCGCGCCGG7590PstIGCTGCAGC

5、00TGCACTGCAGTGCA1010AACTGCAGAACCAATGCATTGG9090AAAACTGCAGCCAATGCATTGGAA9090CTGCAGAACCAATGCATTGGATGCAT00PvuICCGATCGG00ATCGATCGAT1025TCGCGATCGCGA010SacICGAGCTCG1010SacIIGCCGCGGC00TCCCCGCGGGGA5090SalIGTCGACGTCAAAAGGCCATAGCGGCCGC00GCGTCGACGTCTTGGCCATAGCGGCCGCGG1050ACGCGTCGACGTCGGCCATAGCGGCCGCG1075GAAScaI

6、GAGTACTC1025AAAAGIACIIII7575SmaICCCGGG010CCCCGGGG010CCCCCGGGGG1050TCCCCCGGGGGA9090SpeIGACTAGTC1090GGACTAGTCC1090CGGACTAGTCCG050CTAGACTAGTCTAG050SphIGGCATGCC00CATGCATGCATG025ACATGCATGCATGT1050StuIAAGGCCTT9090GAAGGCCTTC9090AAAAGGCCIIII9090XbaICTCTAGAG00GCTCTAGAGC9090TGCTCTAGAGCA7590CTAGTCTAGACTAG7590XhoICCTCGAGG00CCCTCGAGGG1025CCGCTCGAGCGG1075XmaICCCCGGGG00CCCCCGGGGG2575CCCCCCGGGGGG5090TCCCCCCGGGGGGA9090注釋?zhuān)? .如果要加在序列的5端，就在酶切位點(diǎn)識(shí)別堿基序列（紅色）

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