1、精選優質文檔-傾情為你奉上室內質量控制標準操作程序(SOP-22)1目的：了解并控制實驗室檢測的精密度的變化2適用范圍：核酸擴增熒光定量檢測，使用Line-Gene基因擴增儀實驗室3操作人：* *4操作：4.1自制室內質控品：a) 自制室內質控品來自臨床收集的已知HBV陽性血清大約（1×104-6拷貝），每收到一份凍存于-20。收集到約35ml時，取出樣品，置室溫復融。將各管倒入無菌帶蓋的小三角燒瓶中充分混勻。b) 將以上的混合血清，以每管120ul，分裝于0.5ml離心管內，分裝若干管。剩余血清根據廢物處理及生物防護操作程序處理。c) 將上述取約23管裝一小袋，其余20管裝一小袋。

2、共分成若干小代。23管一小袋置于-20冰箱，其余置于-70超低溫冰箱保存，用完一小袋，就從-70轉移1小袋到-20冰箱備用。4.2基線測定及計算RCV：在準備開展質控工作當月的第一天取上述23管中的三管復溶，隨病人標本一起測定，第二天取兩管復溶，隨病人標本一起測定，以后每天隨病人標本測定一管，20天后計算各項目的測定結果的 _ x、s、cv此處的cv即Rcv。RCV的計算公式：其中 _ x為RCV測定中所得23份結果的均值。表示總和。n表示結果的份數,n-1為自由度。4.3繪制RCV圖a) 計算 _ x+ 2S、_ x- 2S 、 _ x+ 3S、_ x- 3S 并在質控圖的縱坐標上標出 _

3、x、_ x±2S、_ x±3S的位置，并將其具體值標在左側標尺上。b)用紅線筆畫出 _ x±2S線，用藍筆畫出 _ x±3S線，即成一張“空圖”。還應填齊圖紙上方的各項，如：實驗項目、質控品來源及批號、起止日期、主要儀器等，還應填上RCV中測定所得的X、S、CV，測定過程中的特殊情況，（附圖2）。4.4室內質控：a)根據上述質控圖，取一小袋上述血清作下月及以后的質控，每次實驗時隨病標本測定一管。b)在圖紙下方“日期”的上一行相應的日期欄內將“測定值”按原始記錄填入，邊填寫邊核對。注意數據順序應嚴格按照實際操情況，不得顛倒。未做測定的天數在圖上留出空格，因

4、為這樣可以真實反應情況，便于分析誤差原因。c)畫出每個檢測值所對應的圖點。4.5室內質控圖的使用方法：4.5.1描點a) 圖中_ x線為靶線，_ x±2s為警告線，_ x±3s為失控線。對于同一批號的質控血清不論使用幾個月，其質控圖均不變化。只要將圖紙上方的“起止日期”項填入每個月的實際起止日期即可。b) 每天將該批號質控血清按有關規定程序復融隨同病人的標本同時檢測。將“日期”、“測定值”和“操作者”如實記錄在圖下方的相應位置，并按前面的方法畫出圖上的對應點，用直線將該點與前一天的點連接起來。c) 月底計算當月全部質控血清檢測結果的 _ x、s、cv，并進行圖形分析和小結，

5、將質量控制圖存入質控資料檔案。4.5.2圖形分析：失控的判斷標準：將質控品隨日常標本共同處理并將質控品結果如實記錄做好的RCV圖中描點。a)若結果在_ x±2S線內，報告可發出。b)若結果在 _ x±2S線外和 _ x±3S線以內或出現連續6點以上在一側等規律變化，應向有關負責人反映并積極尋找原因，但當天檢測結果可以發出。d) 若結果在 _ x +3S線以外，則為失控，應立即報告有關負責人訊速查找原因.e) 并將失控情況、必要時復測標本，然后方可發報告。并將失控情況、查找過程及處理結果等詳細記錄登記。4.5.3通過觀察圖形的規律變化進行誤差分析，消除誤差來源a)

6、曲線漂移：提示有系統誤差，準確度發生了一次性的向上或向下改變。這種變化往往是由一個新的情況引起的。如更換不同批號的試劑，啟用新批號的質控血清、操作規程人員的變換等。在找原因時應重點注意“漂移”前的發生了哪些變動性的因素。b) 趨勢性的變化：向下或向上的趨勢表明準確度發生了漸漸的變化。這種變化往往是由于一個逐漸改變的因素造成的。如質控血清的降解，試劑效價的降低等。c) 連續多點分布在靶值同一則：目前，一般認為質控血清的檢測結果連續6 天以上出現在靶值同一則，則應迅速查找原因，爭取盡快使之回復圍繞在靶值隨機分布的狀態。因為按照統計學的原理，由純隨機誤差情況造成的這種可能性很小。連續6天以上出現在靶

7、值同一則的可能性小于1.5%.因此凡出現連續6天以上出現在靶值同一則者均可能性存在非隨機誤差因素。如果與靶值偏離不大，不會給臨床使用帶來太大影響時，一般化驗報告可以照常填發。d) 其它規律性變化：（周期性等）。4.5.4通過圖形的資料對比進行誤差分析，消除誤差來源a) 每個月的月底將該月的全部質控血清檢測結果的 _ x和s與該測定的 _ x和s進行比較。如 _ x發生了變化，說明準確度發生了變化提示有非隨機誤差存在。如果當月s不同則表明檢測的精密度發生了變化。b)將使用同一批號的質控血清的CT值的_ x和s按月份列出。如果 _ x逐月上升， 則應考慮保存不當造成的試劑效價降低或質控血清本身出現

8、降解。如果各月份 _ x 基本一致而s 逐月加大，則主要提示常規工作的精密度下降，應重點從操作、管理上找原因。c)在數年中，把每個月的CV和失控規律列成表，可用作檢測質量的歷史回顧和趨勢性分析。4.6失控后的處理：4.6.1分析原始數據及初步估計失控原因：發生失控時，對同批實驗檢測的全部原始數據結合近期室內質控圖和平時經驗進行分析，估計失控原因的大體方向。4.6.2對具體檢測過程進行回顧性分析，分析有無特殊情況出現。4.6.3通過選擇性復查進一步分析判斷失控原因，決定處理辦法。選擇性復查時應包括下述樣品，以便一次性找出原因，及時發出報告:a)失控時使用的質控血清。b)重新打開一瓶相同批號的質控

9、血清。c)失控時使用的標準品。d)重新打開一瓶相同批號的標準品。e) 少數幾個病人標本（最好選擇已知病情近期曾做過該項目的病人標本）通過對復查結果的分析，找到失控原因，制定相應的解決方案，使實驗室重新在控并將失控情況、原因和解決方案在檔案中詳細記錄（見表22）。4.7該程序的變動程序：本標準操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經下述人員批準簽字：檢驗科主任、室技術負責人。起 草 人批 準 人生 效 日 期年 月 日表22 臨床基因擴增檢驗實驗室PCR實驗室室內質量控制失控原因及糾正措施記錄日期檢測項目操作人失控現象原因分析糾正結果審核人專心-專注-專業附圖2 室內質控記錄圖檢