1、高考生物一輪專題復(fù)習(xí)現(xiàn)代高考生物一輪專題復(fù)習(xí)現(xiàn)代生物科技專題基因工程講義生物科技專題基因工程講義種類種類Ecoli DNA連接酶連接酶T4DNA連接酶連接酶來(lái)源來(lái)源大腸桿菌大腸桿菌_功能特功能特性性只能將雙鏈只能將雙鏈DNA片段片段互補(bǔ)的互補(bǔ)的_連接連接起來(lái)起來(lái)“縫合縫合”兩種末端，但兩種末端，但連接平末端之間的效率連接平末端之間的效率_ 作用作用將雙鏈將雙鏈DNA片段片段“縫合縫合”起來(lái)，恢復(fù)被限制酶起來(lái)，恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的切開的兩個(gè)核苷酸之間的_T4噬菌體噬菌體黏性末端黏性末端較低較低磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目限制酶限制酶DNA連接酶連接酶DNA聚合酶聚合酶解旋酶

2、解旋酶作用底物作用底物DNA分子分子DNA分子片段分子片段脫氧核苷酸脫氧核苷酸DNA分子分子作用部位作用部位磷酸二磷酸二酯鍵酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵堿基對(duì)堿基對(duì)間的氫鍵間的氫鍵形成產(chǎn)物形成產(chǎn)物黏性末端黏性末端或平末端或平末端形成重組形成重組DNA分子分子新的新的DNA分子分子形成單鏈形成單鏈DNA類型類型步驟步驟檢測(cè)內(nèi)容檢測(cè)內(nèi)容方法方法分分子子檢檢測(cè)測(cè)第一步第一步轉(zhuǎn)基因生物的轉(zhuǎn)基因生物的DNA上上是否插入了目的基因是否插入了目的基因_(DNA和和DNA之間之間)第二步第二步目的基因是否轉(zhuǎn)錄出目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了了mRNA_(DNA和和mRNA之間之間)第三步第三步目的基因是

3、否目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)翻譯成蛋白質(zhì)_個(gè)體生物學(xué)個(gè)體生物學(xué)水平鑒定水平鑒定抗蟲或抗病接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性抗蟲或抗病接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性以及抗性的程度以及抗性的程度DNA分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)分子雜交技術(shù)抗原抗體雜交技抗原抗體雜交技術(shù)術(shù)從基因文庫(kù)中獲取從基因文庫(kù)中獲取人工合成人工合成方方法法從基因組文從基因組文庫(kù)中獲取庫(kù)中獲取從部分基因文庫(kù)，如從部分基因文庫(kù)，如cDNA文庫(kù)中獲取文庫(kù)中獲取化學(xué)合化學(xué)合成法成法反轉(zhuǎn)反轉(zhuǎn)錄法錄法過過程程生物種類生物種類植物細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)感受態(tài)

4、細(xì)胞法感受態(tài)細(xì)胞法受體細(xì)胞受體細(xì)胞 體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵受精卵原核細(xì)胞原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化過程過程將目的基因插入將目的基因插入到到Ti質(zhì)粒的質(zhì)粒的TDNA上上農(nóng)農(nóng)桿菌桿菌導(dǎo)入植物導(dǎo)入植物細(xì)胞細(xì)胞整合到受整合到受體細(xì)胞的染色體體細(xì)胞的染色體DNA上上表達(dá)表達(dá)將含有目的基將含有目的基因的表達(dá)載體因的表達(dá)載體提純提純?nèi)÷讶÷?受受精卵精卵)顯微注顯微注射射受精卵發(fā)受精卵發(fā)育育獲得具有獲得具有新性狀的動(dòng)物新性狀的動(dòng)物 處理細(xì)胞處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載重組表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)體與感受態(tài)細(xì)胞混合胞混合感受感受態(tài)細(xì)胞吸收態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子分子項(xiàng)目項(xiàng)目蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程基因工程基因工程區(qū)區(qū)別別過過程

5、程預(yù)期蛋白質(zhì)功能預(yù)期蛋白質(zhì)功能設(shè)計(jì)設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)推推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列酸序列獲取目的基因獲取目的基因構(gòu)建構(gòu)建基因表達(dá)載體基因表達(dá)載體將目將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測(cè)與目的基因的檢測(cè)與鑒定鑒定實(shí)實(shí)質(zhì)質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)需的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所特性，以獲得人類所需的生物類型或生物需的生物類型或生物產(chǎn)品產(chǎn)品結(jié)結(jié)果果可生產(chǎn)自然界沒有的蛋可生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)白質(zhì)只能生產(chǎn)自然界已有只能生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)的蛋白質(zhì)聯(lián)系聯(lián)系蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出來(lái)的第蛋白質(zhì)工程是在基