實(shí)驗(yàn)六細(xì)胞凝集反應(yīng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)凝集素提取方法,掌_第1頁(yè)
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1、 實(shí)驗(yàn)六實(shí)驗(yàn)六 細(xì)胞凝集反應(yīng)細(xì)胞凝集反應(yīng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康?學(xué)習(xí)凝集素提取方法,掌握凝集素促使細(xì)胞凝集的原理,觀察紅細(xì)胞凝集現(xiàn)象。二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 細(xì)胞質(zhì)膜是由蛋白質(zhì)不同程度鑲嵌在脂雙層中所形成的動(dòng)態(tài)流動(dòng)結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)和脂類分子又與寡糖鏈結(jié)合為糖蛋白和糖脂分子,糖蛋白和糖脂分子伸至細(xì)胞表面的分枝狀寡糖鏈在質(zhì)膜表面形成細(xì)胞外被(又稱為糖萼)。許多研究結(jié)果表明:細(xì)胞間的分子識(shí)別、細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化、免疫反應(yīng)和腫瘤發(fā)生等均與細(xì)胞外被(分枝狀寡糖鏈)有關(guān)。 凝集素(1ectin)凝集素是一類可逆結(jié)合特異糖基的蛋白質(zhì),能與細(xì)胞外被的寡糖鏈相連接,使細(xì)胞發(fā)生凝集。 加入與凝集素互補(bǔ)的糖分子可以抑

2、制細(xì)胞間的凝集反應(yīng)。三、實(shí)驗(yàn)用品三、實(shí)驗(yàn)用品 1、 器材:顯微鏡、托盤天平、載玻片若干、5mL注射器、滴管2支、離心管2支。 2、 試劑:PBS緩沖液:稱取NaCl 7.2g、Na2HP04 1.48g、KH2P04 0.43g、加蒸餾水,定容至l000 ml 中,調(diào)pH值到7.2。 3、材料: 土豆塊莖 雞血四、實(shí)驗(yàn)方法四、實(shí)驗(yàn)方法 2% 雞紅細(xì)胞懸液制備 以無(wú)菌方法抽取兔子耳緣靜脈血液(5mL注射器用1%肝素溶液浸潤(rùn))1mL,用生理鹽水洗5次,每次3000 r/min,離心5 min,最后按沉淀壓積的紅細(xì)胞體積用生理鹽水配成2紅細(xì)胞懸液 。 稱取土豆去皮塊莖2g,切成小塊加10 mL PBS緩沖液,浸泡2h(浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素)載玻片上滴一滴土豆凝集素 再滴一滴2紅細(xì)胞液(充分混勻)充分混勻) 靜置20 min 低倍顯微鏡下觀察血球凝集現(xiàn)象 以以PBSPBS液加液加2 2血細(xì)胞懸液作為對(duì)照實(shí)驗(yàn),低倍顯微鏡下觀察血細(xì)胞懸液作為對(duì)照實(shí)驗(yàn),低倍顯微鏡下觀察 五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告

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