1、動物細胞和植物細胞培養反響器動植物細胞培養與微生物細胞培養有很大的不同。動植物細胞培養與微生物細胞培養有很大的不同。動物細胞培養與微生物培養區別：動物細胞培養與微生物培養區別： 動物細胞無細胞壁，且大多數哺乳動物細胞附著在固體或半固體的表動物細胞無細胞壁，且大多數哺乳動物細胞附著在固體或半固體的表面才能生長；對營養要求嚴格，除氨基酸、維生素、鹽類、葡萄糖或半乳糖面才能生長；對營養要求嚴格，除氨基酸、維生素、鹽類、葡萄糖或半乳糖外，還需有血清。動物細胞對環境敏感，包括外，還需有血清。動物細胞對環境敏感，包括pH、溶氧、溫度、剪切應力都比、溶氧、溫度、剪切應力都比微生物有更嚴的要求，一般須嚴格的監

2、測和控制。微生物有更嚴的要求，一般須嚴格的監測和控制。植物細胞培養與微生物培養區別：植物細胞培養與微生物培養區別： 植物細胞對營養要求較動物細胞簡單。但由于植物細胞培養一般要求在高植物細胞對營養要求較動物細胞簡單。但由于植物細胞培養一般要求在高密度下才能得到一定濃度的培養產物，以及植物細胞生長較微生物要緩慢，長時密度下才能得到一定濃度的培養產物，以及植物細胞生長較微生物要緩慢，長時間的培養對無菌要求及反應器的設計也提出特殊的要求。間的培養對無菌要求及反應器的設計也提出特殊的要求。動植物、微生物細胞的培養比較動植物、微生物細胞的培養比較微生物動物細胞植物細胞大小(直徑,m)1-1010-1001

3、0-100懸浮生長可以多數細胞需附著表面才能生長可以，但易結團，無單個細胞營養要求簡單非常復雜較復雜生長速率快，倍增時間0.5-5小時慢，倍增時間15-100小時慢，倍增時間24-74小時代謝調節內部內部、激素內部、激素環境敏感不敏感非常敏感能忍受廣泛范圍細胞分化無有有剪切應力敏感低非常高高傳統變異，篩選技術廣泛使用不常使用有時使用細胞或產物濃度 較高低低植物細胞培養：是指在離體條件下將愈傷組織或其他易分散的組織置于液體植物細胞培養：是指在離體條件下將愈傷組織或其他易分散的組織置于液體培養基中，將組織振蕩分散成游離的懸浮細胞，通過繼代培養使細胞增殖來培養基中，將組織振蕩分散成游離的懸浮細胞，通

4、過繼代培養使細胞增殖來獲得大量細胞群體的方法。獲得大量細胞群體的方法。第一節第一節 植物細胞培養反應器植物細胞培養反應器生產方式收獲時間紫草寧濃度（%干重）完整植物2-3年1-2植物細胞培養21天14表表1 1 植物細胞培養和從完整的植物生產紫草寧的比較植物細胞培養和從完整的植物生產紫草寧的比較1細胞培養液的特性細胞培養液的特性 植物細胞比微生物細胞大植物細胞比微生物細胞大50100倍，體積大約要膨大倍，體積大約要膨大105106倍，在培養倍，在培養液中所占體積可高達液中所占體積可高達4050%，而酵母一般只有，而酵母一般只有5%左右，培養過程中培養左右，培養過程中培養液的黏度可增大液的黏度可

5、增大30倍。倍。2植物細胞培養中的傳氧狀態植物細胞培養中的傳氧狀態 所有植物細胞都是好氧性的，但不需太高的傳氧速率。所有植物細胞都是好氧性的，但不需太高的傳氧速率。植物細胞由植物細胞由于體積較大，比表面積比微生物小得多，耗氧速率一般也比微生物小得多于體積較大，比表面積比微生物小得多，耗氧速率一般也比微生物小得多，如煙草細胞培養中最大值為，如煙草細胞培養中最大值為0.6mmol/g.h，而微生物則在，而微生物則在1.58 mmol/g.h。3. 培養液中植物細胞的特性培養液中植物細胞的特性 植物植物細胞比微生物細胞大；植物細胞通常以細胞數在細胞比微生物細胞大；植物細胞通常以細胞數在2-200之間

6、、直之間、直徑為徑為2mm左右的非均相集合細胞團方式存在；植物細胞左右的非均相集合細胞團方式存在；植物細胞纖維素細胞壁纖維素細胞壁抗剪切能抗剪切能力弱。力弱。 一、植物細胞培養的過程特點一、植物細胞培養的過程特點1、懸浮培養生物反應器、懸浮培養生物反應器l機械攪拌式反應器：機械攪拌式反應器：l非機械攪拌式（氣體攪拌式）反應器：非機械攪拌式（氣體攪拌式）反應器：2、固定化細胞生物反應器、固定化細胞生物反應器l填充床反應器：填充床反應器：l流化床反應器：流化床反應器：l膜反應器：膜反應器：二、植物細胞培養反應器二、植物細胞培養反應器大規模植物細胞培養反應器大規模植物細胞培養反應器1.1 機械攪拌式

7、反應器機械攪拌式反應器l機械攪拌式反應器是最傳統的微生物發酵裝置，同樣也可用于植物細機械攪拌式反應器是最傳統的微生物發酵裝置，同樣也可用于植物細胞懸浮培養。胞懸浮培養。l機械攪拌式反應器已成功地用于許多細胞的培養中，能夠獲得較高的溶氧系數，機械攪拌式反應器已成功地用于許多細胞的培養中，能夠獲得較高的溶氧系數，而且也具有反應器內的溫度、而且也具有反應器內的溫度、pHpH、 溶氧及營養物濃度較其他反應器更易溶氧及營養物濃度較其他反應器更易控制等優點；控制等優點；l但其缺點在于剪切力大，易對植物細胞造成較大損傷，對次級代謝產物的但其缺點在于剪切力大，易對植物細胞造成較大損傷，對次級代謝產物的合成也會

8、產生影響。能耗大。機械攪拌需要相對比較復雜的密封，這些密合成也會產生影響。能耗大。機械攪拌需要相對比較復雜的密封，這些密封使用不當容易產生泄漏造成染菌使細胞培養失敗。封使用不當容易產生泄漏造成染菌使細胞培養失敗。 1、懸浮培養生物反應器懸浮培養生物反應器反應器結構：反應器結構： 與微生物通風攪拌發酵罐相似與微生物通風攪拌發酵罐相似設計要點：設計要點： 要選用該類反應器，除需要篩選出抗剪切力的要選用該類反應器，除需要篩選出抗剪切力的細胞系外，對反應器結構進行適當改造，尤其細胞系外，對反應器結構進行適當改造，尤其是攪拌漿的結構和類型的改進，使其具有緩和是攪拌漿的結構和類型的改進，使其具有緩和的、但

9、又充分的攪拌效果。的、但又充分的攪拌效果。六葉羅式攪拌器實物圖六葉羅式攪拌器實物圖羅氏攪拌器：在較低的攪拌速度下有較好的混合效果。羅式攪拌器羅氏攪拌器：在較低的攪拌速度下有較好的混合效果。羅式攪拌器有六葉攪拌器和四葉攪拌器，一般常用六葉攪拌器。有六葉攪拌器和四葉攪拌器，一般常用六葉攪拌器。攪拌器的個數取決于反應器的高徑比，最低端的攪拌器離罐底的距離通常攪拌器的個數取決于反應器的高徑比，最低端的攪拌器離罐底的距離通常為反應器直徑的三分之一，第二個攪拌器與第一個攪拌器的距離約為攪拌為反應器直徑的三分之一，第二個攪拌器與第一個攪拌器的距離約為攪拌器直徑的器直徑的1.21.2倍，余此類推。倍，余此類推

10、。后來，有人使用錨式攪拌器和螺旋式攪拌器進行植物細胞的培養，也取后來，有人使用錨式攪拌器和螺旋式攪拌器進行植物細胞的培養，也取得了較好的效果。一般認為螺旋式攪拌器效果最優。得了較好的效果。一般認為螺旋式攪拌器效果最優。 錨式攪拌器和螺旋攪拌器植物細胞培養反應器錨式攪拌器和螺旋攪拌器植物細胞培養反應器 吸筒式攪拌器和帆式攪拌器也常用于植物細胞的懸浮培養中，其結構如下圖所吸筒式攪拌器和帆式攪拌器也常用于植物細胞的懸浮培養中，其結構如下圖所示。吸筒式攪拌器的結構原理在本章動物細胞培養反應器中會有詳細介紹，帆式攪示。吸筒式攪拌器的結構原理在本章動物細胞培養反應器中會有詳細介紹，帆式攪拌器結構相對簡單，

11、由四片較大的攪拌葉組成。這兩種攪拌在使用時轉速都不高，拌器結構相對簡單，由四片較大的攪拌葉組成。這兩種攪拌在使用時轉速都不高，一般在一般在30308080轉轉/ /分。分。 吸管式攪拌器和帆式攪拌器吸管式攪拌器和帆式攪拌器帶帆形攪拌器的連續灌注系統培養反應器攪拌槳是用尼龍絲編織帶制成帆形，攪拌軸用磁力驅動旋轉，轉攪拌槳是用尼龍絲編織帶制成帆形，攪拌軸用磁力驅動旋轉，轉速為速為2050r/min，氧氣通過插入溶液中的硅膠管擴散到培養液內，以維，氧氣通過插入溶液中的硅膠管擴散到培養液內，以維持培養液內一定的溶解氧水平持培養液內一定的溶解氧水平。1.2 非機械攪拌式反應器非機械攪拌式反應器l優點：優

12、點： 由于沒有活動的攪拌裝置，剪切力小，對細胞損傷小，而且容易實現長期由于沒有活動的攪拌裝置，剪切力小，對細胞損傷小，而且容易實現長期無菌培養。無菌培養。 l缺點：操作彈性小，低氣速時尤其在培養后期植物細胞密度較高時，混合效果較差。缺點：操作彈性小，低氣速時尤其在培養后期植物細胞密度較高時，混合效果較差。如果提高通氣量，又會產生大量泡沫，氣泡破裂時產生的剪切力會傷害正在生長的細如果提高通氣量，又會產生大量泡沫，氣泡破裂時產生的剪切力會傷害正在生長的細胞，因此只適用于對剪切力不敏感的細胞培養，此時一種較為有效的方法是添加消泡胞，因此只適用于對剪切力不敏感的細胞培養，此時一種較為有效的方法是添加消

13、泡劑。此外，對這類反應器缺乏足夠的經驗，放大過程也不如機械攪拌式反應器成熟。劑。此外，對這類反應器缺乏足夠的經驗，放大過程也不如機械攪拌式反應器成熟。通入空氣作通氣和攪拌的生物反應器，主要有鼓泡式反應器和氣升式通入空氣作通氣和攪拌的生物反應器，主要有鼓泡式反應器和氣升式反應器。反應器。鼓泡式反應器：細胞及培養液裝在反應器中，反應器的高徑比通常為鼓泡式反應器：細胞及培養液裝在反應器中，反應器的高徑比通常為46。氣體通過底部的氣體分配器鼓入，分散成氣泡沿著液體上升，同時攪氣體通過底部的氣體分配器鼓入，分散成氣泡沿著液體上升，同時攪動液體以增加傳質速率。一般在塔內設有擋板，以減少液體返混。為動液體以

14、增加傳質速率。一般在塔內設有擋板，以減少液體返混。為加強液體循環和傳遞反應熱，可設外循環管和塔外換熱器。加強液體循環和傳遞反應熱，可設外循環管和塔外換熱器。 2、固定化細胞生物反應器、固定化細胞生物反應器 固定化細胞培養技術是指通過利用化學或物理的方法，將細胞固定固定化細胞培養技術是指通過利用化學或物理的方法，將細胞固定在某一支撐物上，比如固體顆粒或者膜上，然后加以培養。用這種方法在某一支撐物上，比如固體顆粒或者膜上，然后加以培養。用這種方法進行細胞培養不僅減少了細胞受到剪切力傷害的可能性，而且由于細胞進行細胞培養不僅減少了細胞受到剪切力傷害的可能性，而且由于細胞固定在某種支撐物上，可以很容易

15、與培養液分開，既有利于細胞產物的固定在某種支撐物上，可以很容易與培養液分開，既有利于細胞產物的分離，又使細胞能夠反復培養利用，降低了生產成本。分離，又使細胞能夠反復培養利用，降低了生產成本。2.1 填充床反應器填充床反應器2.2 流化床生物反應器流化床生物反應器2.3 膜生物反應器膜生物反應器l優點：優點： 單位體積固定細胞量大。單位體積固定細胞量大。l缺點：缺點： 混合效率低，使必要的氧傳遞、混合效率低，使必要的氧傳遞、pHpH值、溫度值、溫度 的控制和產物的排泄很困難；的控制和產物的排泄很困難； 填充床中顆粒或支持物的破碎會阻塞液體流填充床中顆粒或支持物的破碎會阻塞液體流 動；動； 用于固

16、定的膠粒在高壓下容易變形，會導致用于固定的膠粒在高壓下容易變形，會導致 填充床阻塞。填充床阻塞。2.1 填充床反應器填充床反應器l填充床生物反應器中，細胞固定于支持物（膠填充床生物反應器中，細胞固定于支持物（膠粒、泡沫、金屬顆粒或相連的網）表面或內部粒、泡沫、金屬顆粒或相連的網）表面或內部，細胞固定支持物顆粒堆疊成床，培養基在床，細胞固定支持物顆粒堆疊成床，培養基在床層間流動，通過培養液流動實現混合和傳質。層間流動，通過培養液流動實現混合和傳質。2.2 流化床生物反應器流化床生物反應器l流化床生物反應器中，細胞包裹于膠粒、金屬或流化床生物反應器中，細胞包裹于膠粒、金屬或泡沫顆粒中成為固定化植物

17、細胞，通過培養液自泡沫顆粒中成為固定化植物細胞，通過培養液自下而上在反應器內的流動使固定化細胞呈流態化下而上在反應器內的流動使固定化細胞呈流態化懸浮狀態，培養液與植物細胞充分接觸，混合程懸浮狀態，培養液與植物細胞充分接觸，混合程度高，傳質傳熱效果好。度高，傳質傳熱效果好。l流化床生物反應器缺點在于：流化床生物反應器缺點在于： 剪切力和顆粒碰撞會破壞固定化細胞；剪切力和顆粒碰撞會破壞固定化細胞； 流體動力學復雜使其放大困難。流體動力學復雜使其放大困難。2.3 膜生物反應器膜生物反應器l膜式反應器是近年來生物反應器研究的重要領域，也是近年來廣泛使用的一種固膜式反應器是近年來生物反應器研究的重要領域

18、，也是近年來廣泛使用的一種固定化反應器。膜固定化是采用具有一定孔徑和選擇透性的膜固定植物細胞。營養定化反應器。膜固定化是采用具有一定孔徑和選擇透性的膜固定植物細胞。營養物質可以通過膜滲透到細胞中，細胞產生的次級代謝產物通過膜釋放到培養液中。物質可以通過膜滲透到細胞中，細胞產生的次級代謝產物通過膜釋放到培養液中。l膜生物反應器最常用的是中空纖維和螺旋式卷繞反應器。膜生物反應器最常用的是中空纖維和螺旋式卷繞反應器。 中空纖維反應器：中空纖維反應器： 中空纖維是用聚礬或聚丙烯制成。管壁的厚度約中空纖維是用聚礬或聚丙烯制成。管壁的厚度約5075um，直徑，直徑200um，管，管壁是半透膜，能夠透過各種

19、營養物質，但是細胞卻不能穿過。壁是半透膜，能夠透過各種營養物質，但是細胞卻不能穿過。 一個培養筒內由數千根中空纖維組成，然后封存在特制的圓筒內，這一個培養筒內由數千根中空纖維組成，然后封存在特制的圓筒內，這樣就形成了樣就形成了2個空間，纖維管內為個空間，纖維管內為“內室內室”，管間隙為，管間隙為“外室外室”。 細胞固定在中空纖維外壁和反應器外殼內壁之間，或者說，細胞填充在反應細胞固定在中空纖維外壁和反應器外殼內壁之間，或者說，細胞填充在反應器內，多束中空纖維從中穿過器內，多束中空纖維從中穿過 。營養物質從中空纖維流過，通過中空纖維膜滲透。營養物質從中空纖維流過，通過中空纖維膜滲透到細胞層中。到

20、細胞層中。 （細胞保留在管外，基質走管內）（細胞保留在管外，基質走管內）螺旋式卷繞反應器：在兩層平板膜中間夾著一層細胞，然后將夾著細胞的兩層螺旋式卷繞反應器：在兩層平板膜中間夾著一層細胞，然后將夾著細胞的兩層平板膜卷繞成螺旋狀。在卷繞過程中，膜與膜之間用支撐物隔開一定的空間，平板膜卷繞成螺旋狀。在卷繞過程中，膜與膜之間用支撐物隔開一定的空間，細胞營養液被引入到這個空間里，其中的一部分通過膜進入細胞層，維持細胞細胞營養液被引入到這個空間里，其中的一部分通過膜進入細胞層，維持細胞生長，細胞的代謝產物也通過膜滲透到營養液中，被下游過程回收。生長，細胞的代謝產物也通過膜滲透到營養液中，被下游過程回收。

21、 1、貼壁培養：大多數動物細胞在離體培養條件下都需要附著在帶有適量、貼壁培養：大多數動物細胞在離體培養條件下都需要附著在帶有適量正電荷的固體或半固體的表面上才能正常生長，細胞一經貼壁就迅速正電荷的固體或半固體的表面上才能正常生長，細胞一經貼壁就迅速鋪展，然后開始有絲分裂，并很快進入對數生長期。一般數天后就鋪鋪展，然后開始有絲分裂，并很快進入對數生長期。一般數天后就鋪滿培養表面，并形成致密的細胞單層。滿培養表面，并形成致密的細胞單層。第二節第二節 動物細胞培養反應器動物細胞培養反應器一、動物細胞培養方法：一、動物細胞培養方法：貼壁的單核細胞貼壁的單核細胞使用過的舊瓶子培養使用過的舊瓶子培養BHK

22、21 細胞細胞時細胞更容易發生脫落，而使用新瓶時細胞更容易發生脫落，而使用新瓶子進行培養時細胞能良好生長。子進行培養時細胞能良好生長。l最初采用滾瓶培養。最初采用滾瓶培養。lVan Wezel 在在1967年開發了一種微載體系統年開發了一種微載體系統培養壁依賴性細胞。培養壁依賴性細胞。l微載體是直徑為微載體是直徑為60250um的微珠。的微珠。l細胞貼附于微載體上，懸浮于培養基中，逐細胞貼附于微載體上，懸浮于培養基中，逐漸生長成單層，具有單層培養和懸浮培養的漸生長成單層，具有單層培養和懸浮培養的優點。優點。玻璃微珠玻璃微珠制備微載體的材料主要有：制備微載體的材料主要有： 葡聚糖葡聚糖（DEAE

23、-Sephadex A50及及A25） 塑料塑料 明膠明膠 玻璃玻璃 纖維素纖維素2、懸浮培養：少數懸浮生長型動物細胞在離體培養時不需要、懸浮培養：少數懸浮生長型動物細胞在離體培養時不需要 附著物，懸浮于培養液中即可良好生長。適用于一些來源附著物，懸浮于培養液中即可良好生長。適用于一些來源 于血液、淋巴組織的細胞，許多腫瘤細胞以及某些轉化細于血液、淋巴組織的細胞，許多腫瘤細胞以及某些轉化細 胞等非貼壁依賴性細胞胞等非貼壁依賴性細胞 。 動物細胞的懸浮培養是在微生物發酵的基礎上建立起動物細胞的懸浮培養是在微生物發酵的基礎上建立起 來的，但由于動物細胞沒有細胞壁，不能耐受劇烈攪拌和來的，但由于動物

24、細胞沒有細胞壁，不能耐受劇烈攪拌和 通氣時產生的剪切力，因而又與經典的發酵不同。通氣時產生的剪切力，因而又與經典的發酵不同。小規模懸浮培養小規模懸浮培養懸浮培養瓶懸浮培養瓶3、固定化培養：是指采用吸附（固體吸附劑）、共價貼附（與固、固定化培養：是指采用吸附（固體吸附劑）、共價貼附（與固相載體結合）、共價交連（用試劑處理使細胞間形成橋而絮結相載體結合）、共價交連（用試劑處理使細胞間形成橋而絮結）、包埋（將細胞包埋在多孔材料內）等方法將細胞固定在支）、包埋（將細胞包埋在多孔材料內）等方法將細胞固定在支持物上，或將細胞嵌入微囊或高分子聚合物的網絡中進行培養持物上，或將細胞嵌入微囊或高分子聚合物的網絡

25、中進行培養。該方法對貼壁依賴性細胞與非貼壁依賴性細胞均適用。該方法對貼壁依賴性細胞與非貼壁依賴性細胞均適用。二、細胞培養的操作方式二、細胞培養的操作方式l1、分批式操作、分批式操作l2、流加式操作、流加式操作l3、半連續式操作、半連續式操作l4、連續操作、連續操作l5、灌注培養、灌注培養灌注培養灌注培養1通氣攪拌式細胞培養反應器通氣攪拌式細胞培養反應器 通氣攪拌式動物細胞培養反應器顧名思義就是既有機械攪拌又有通氣裝通氣攪拌式動物細胞培養反應器顧名思義就是既有機械攪拌又有通氣裝置，是在微生物發酵反應器基礎上改進的一類細胞培養反應器，適用于懸浮置，是在微生物發酵反應器基礎上改進的一類細胞培養反應器

26、，適用于懸浮細胞的培養或者生長在微載球的貼壁細胞培養。機械攪拌和通氣形式的不同細胞的培養或者生長在微載球的貼壁細胞培養。機械攪拌和通氣形式的不同產生了各種各樣的通氣攪拌反應器。其中比較典型的是籠式通氣攪拌反應器。產生了各種各樣的通氣攪拌反應器。其中比較典型的是籠式通氣攪拌反應器。三、動物細胞大規模培養反應器三、動物細胞大規模培養反應器1.1 籠式通氣攪拌器籠式通氣攪拌器l氣泡用絲網隔開，避免在向培養基通氣時損傷細胞。同時在采用微載體系統培養氣泡用絲網隔開，避免在向培養基通氣時損傷細胞。同時在采用微載體系統培養時，微載體不會被由于通氣所產生的泡沫滯留在氣液界面中。時，微載體不會被由于通氣所產生的

27、泡沫滯留在氣液界面中。籠式攪拌器剖面圖籠式攪拌器剖面圖l優點：優點：避免向培養基直接通氣時氣泡損傷細胞，避免向培養基直接通氣時氣泡損傷細胞，剪切力小。剪切力小。沒有移動部件，沒有移動部件，密封好。密封好。l缺點：缺點：氧傳遞系數小氧傳遞系數小，不能滿足高密度細胞的耗氧要求；氣路系統不能就地滅，不能滿足高密度細胞的耗氧要求；氣路系統不能就地滅菌。菌。 反應器適用范圍反應器適用范圍 懸浮培養：非貼壁依賴性細胞和貼壁于微載體的貼壁細胞。懸浮培養：非貼壁依賴性細胞和貼壁于微載體的貼壁細胞。2氣升動物細胞培養反應器氣升動物細胞培養反應器與微生物發酵及植物細胞培養的反應器結構相同。與微生物發酵及植物細胞培

28、養的反應器結構相同。優點：優點：l結構簡單，避免使用軸承而造成細胞培養的污染；結構簡單，避免使用軸承而造成細胞培養的污染；l傳質性能好，尤其是氧的傳遞效率高；傳質性能好，尤其是氧的傳遞效率高；產生的湍動溫和，剪切力小，循環量大，使細胞營養成分均布于培養基中。產生的湍動溫和，剪切力小，循環量大，使細胞營養成分均布于培養基中。氣升式反應器結構示意圖氣升式反應器結構示意圖 1 1培養液上升區培養液上升區 2 2培養液下降區培養液下降區 3 3氣液氣液分配板分配板 4 4液體上升口液體上升口 5 5氣體導入口氣體導入口 6 6液體引入口液體引入口 7 7氣液分離區氣液分離區 8 8導流筒導流筒 9 9

29、液體導入區液體導入區3中空纖維細胞培養反應器中空纖維細胞培養反應器l培養筒纖維管內為培養筒纖維管內為“內室內室”，灌流無血清培養液供細胞生長，管間，灌流無血清培養液供細胞生長，管間隙為隙為“外室外室”，接種細胞就貼附于，接種細胞就貼附于“外室外室”的管壁上，并吸取從的管壁上，并吸取從“內室內室”滲透來的營養，迅速生長繁殖。滲透來的營養，迅速生長繁殖。l由于細胞分泌物的分子量大而無法透過半透膜到由于細胞分泌物的分子量大而無法透過半透膜到“內室內室”，只能留在，只能留在“外室外室”不斷被濃縮，當收集產物時，只要把管間不斷被濃縮，當收集產物時，只要把管間“外室外室”的總出口打開就可獲取產的總出口打開

30、就可獲取產物。而代謝物由于分子量小，可以從管壁滲透到物。而代謝物由于分子量小，可以從管壁滲透到“內室內室”，最后從，最后從“內室內室”總出口排出，不會對總出口排出，不會對“外室外室”的細胞產生毒害作用。的細胞產生毒害作用。一種中空纖維細胞培養反應器結構示意圖一種中空纖維細胞培養反應器結構示意圖 1中空纖維束；中空纖維束； 2（2）反應器外殼；反應器外殼；3（3）中空纖維束固定板；中空纖維束固定板； 4（4）中空纖維內腔進出口；中空纖維內腔進出口；5（5）中空纖維外表面進出口；中空纖維外表面進出口； 6（6）密封板密封板 l用途：用途： 即可培養懸浮生長細胞，又可培養貼壁依賴性細胞。即可培養懸浮

31、生長細胞，又可培養貼壁依賴性細胞。4微囊培養系統微囊培養系統l美國美國Damon Biotech 公司創建。公司創建。l微囊技術：把生物活性物質、完整的活細胞或組織包在薄的半透膜中。微囊技術：把生物活性物質、完整的活細胞或組織包在薄的半透膜中。l微囊的制備：微囊的制備： 在無菌條件下，將活性細胞或生物活性成分懸浮在在無菌條件下，將活性細胞或生物活性成分懸浮在1.4%海藻酸鈉溶液海藻酸鈉溶液中；中； 通過特制的成滴器將含有細胞的懸液形成一定大小的小滴，滴入通過特制的成滴器將含有細胞的懸液形成一定大小的小滴，滴入CaCl2中，中，形成內含活性細胞或生物活性成分的凝膠小珠；形成內含活性細胞或生物活性成分的凝膠小珠； 再用半透膜材料包被，形成堅韌多孔可通透的外膜再用半透膜材料包被，形成堅韌多孔可通透的外膜; 重新液化膠化物使其流出，活性細胞或生物活性成分則留在多孔膜內