1、丹參酮對血管性癡呆模型大鼠學習記憶障礙的改善作用         11-03-25 14:58:00     作者：李林，陳姿亦,茹立強    編輯：studa20【摘要】  目的： 研究丹參酮對擬人類血管性癡呆(VD)模型大鼠學習記憶功能障礙的改善作用。方法： 采用改良的大腦中動脈栓塞(MCAO)致局灶性腦缺血(3 h)和再灌注(30min)法，建立VD樣學習記憶障礙的大鼠模型。實驗動物隨機分成VD模型組、丹參酮治療組、假造

2、模對照組和正常對照組等4組。采用定位航行和空間探索試驗測定大鼠的空間學習記憶功能。結(jié)果： (1) VD大鼠定位航行試驗的逃避潛伏期明顯延長;空間探索試驗的逃避潛伏期延長更明顯,而逃避頻率降低，與兩對照組比較有顯著性差異(P<0.01)。(2) 丹參酮治療后，VD大鼠定位航行試驗的逃避潛伏期縮短;空間探索試驗的逃避潛伏期縮短更明顯，而其安全逃避頻率有明顯提高。結(jié)論： (1) 本研究制成的VD樣學習記憶障礙的動物模型具有較好仿真人類VD的特點;水迷宮試驗?zāi)茌^真實地反映動物學習記憶功能。(2) 丹參酮對VD樣大鼠的學習記憶功能障礙具有一定的改善作用。 【關(guān)鍵詞】  丹參酮; 血管性癡

3、呆; 動物模型; 大腦中動脈栓塞; 水迷宮試驗; 學習記憶; 大鼠血管性癡呆(vascular dementia, VD)是由各種腦血管疾病引起的腦功能障礙，是一種獲得性智能損害綜合征1，為老年期癡呆的主要類型之一，其主要臨床表現(xiàn)以記憶、認知功能缺損為主，可伴有言語、運動、視空間和人格障礙。VD是唯一的一種可以預(yù)防的癡呆類型，早期積極防治具有可逆性。在導(dǎo)致VD的多種腦血管疾病中，以缺血性腦血管疾病為最多見。腦缺血再灌注后直接或間接損傷海馬等邊緣腦區(qū)神經(jīng)細胞，機體會啟動多種機制調(diào)控學習、記憶的功能活動。有報道，丹參酮A和B能縮小小鼠短暫的(急性)局灶性腦缺血的腦梗死灶體積，并可能有神經(jīng)保護作用2

4、，還能改善缺血再灌注損傷小鼠和東莨菪堿(抗膽堿藥)誘發(fā)的空間行為缺陷小鼠的學習記憶障礙3。因此，對VD的腦損傷機制及其防治已成為世界醫(yī)學領(lǐng)域聯(lián)合攻關(guān)、重點研究的項目。本研究采用改良的大腦中動脈栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)45致局灶性腦缺血再灌注法誘發(fā)VD大鼠模型，同時觀察丹參酮對其的治療作用，為探索人類VD的發(fā)病機制及其防治新措施提供實驗依據(jù)。1 材料和方法1.1 實驗動物與分組選用健康清潔二級SD雄性大鼠60只，體重(220±20)g，由華中科技大學同濟醫(yī)學院實驗動物學部提供。動物于專用實驗室內(nèi)分籠飼養(yǎng)，室溫(22±2

5、)，自由攝食和飲水。將大鼠隨機分為4組：VD模型組20只，丹參酮治療組20只，假造模對照組10只和正常對照組10只。1.2 主要試劑及儀器丹參酮，華中科技大學同濟醫(yī)學院臨床藥理學教研室惠贈;仿Morris水迷宮裝置，華中科技大學同濟醫(yī)學院神經(jīng)生物學系研制。1.3 造模方法根據(jù)Zealonga等45的MCAO法，稍加改進制作VD大鼠模型。大鼠造模前禁食(不禁水)12 h，以10%水合氯醛(0.35 g·kg-1)腹腔注射麻醉，常規(guī)皮膚消毒后解剖分離右側(cè)頸總動脈、頸內(nèi)動脈及頸外動脈，并掛上備用結(jié)扎線，電凝頸外動脈入腦分支和結(jié)扎其主干，分離頸內(nèi)動脈主干至翼腭動脈，并在其起始部位放置一動脈夾

6、。先將頸總動脈用動脈夾夾閉，再在頸外動脈殘端開0.2 mm切口，由切口處插入圓錐頭的尼龍線(直徑0.25 mm)，于入口處結(jié)扎尼龍線，然后松開頸內(nèi)動脈的動脈夾，輕推尼龍線沿頸內(nèi)動脈入顱(深度約為18 mm)，如此實現(xiàn)MCAO致腦局灶性缺血。隨后于腦缺血后3 h輕拉出外留尼龍線尾至結(jié)扎口處，如此實現(xiàn)大腦中動脈缺血再灌注(供血30min)造模。大鼠放回鼠籠中，保溫飼養(yǎng)。假造模對照組大鼠僅解剖分離上述動脈，不再作插線栓、結(jié)扎等處理。正常對照組大鼠不作任何處理。1.4 丹參酮治療造模后丹參酮治療組大鼠立即胃飼丹參酮，丹參酮按50 mg·kg-1·d-1溶于5 ml玉米油中灌胃6。兩對照組及VD模型組僅以等量玉米油灌胃。各連續(xù)14d，然后進行有關(guān)指標的檢測。1.5 造模動物神經(jīng)功能評定按照Zealonga等45級評分法，在造模大鼠清醒后立即進行動物神經(jīng)功能的評定。評分標準為：正常0分，對側(cè)肢體屈曲1分，拖鼠尾后拉時對側(cè)肢體無力2分，拖鼠尾后拉時向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈3分，自發(fā)向?qū)?cè)轉(zhuǎn)圈或傾倒4分。選取評分為2分及以上者入圍實驗。1.6 動物學習記憶功能的測試對每組實驗大鼠分別進行水迷宮學習記憶行為學測試78，選擇學習記憶行為“正常”的大鼠入圍實驗;大鼠MCAO再灌注后立即做水迷宮試驗鑒定動物模型。1.7 統(tǒng)計學處理所有的數(shù)據(jù)以x±s