1、植物組織培養期末復習題、填空題（每空。.5分）1.植物組織培養按培養對象分為一組織培養一、器官培養、胚胎培養、一細胞培養_、_原生質體培養等幾種類型2.在分離原生質體的酶溶液內，需要加入一定量的Cacb-2Ho和葡聚糖硫酸鉀其作用是保持原生質體膜的穩定，避免破裂.3 .1902年德國植物生理學家Haberlandt第一次提出植物Z田胞具有全能性的理論概念；1943年White提出植物細胞二全能性”學說，并出版了植物組織培養手冊，從而使植物組織培養成為一門新興的學科。4 .用烘箱迅速干燥洗凈后的玻璃器皿時溫度可以設在弱r的溫度范圍內，而若用它高溫干燥滅菌則需在150r的溫度下13小時；烘干植物材

2、料的溫度是也_C.5,細胞全能性是指植物的每個細胞都具有該植物的全部遺傳信息和形成完整植株的潛在一的能力。6. 1962年，Murashige和Skoog為培養煙草花葉細胞設計了_MS培養基，其特點是無機鹽濃度較高，且為較穩定的。7. 7.6-BA/NAA的高低決定了外植體的發育方向，比值低時促進_根_的生長，這時兌分化-占主導地位；比值高促進芽的生長，這時分化占主導地位.9.組織培養的特點是：無菌、-人工控制、離體10 .1962年印度Guha等人成功地培養毛葉曼陀羅花藥獲得一單倍體植株，這促進了花藥和花粉培養的研究。11 .在組織培養中，不耐熱的物質用過濾法滅菌，而培養基常用濕熱滅菌法滅菌

3、.15.13.在組織培養中，非洲菊是靠從生芽的方式進行繁殖的,而蝴蝶蘭是以a原球莖一的方式進行快繁的。在通過般以微莖尖培養脫毒時，外植體的大小應以成.苗率和脫毒率綜合確定，0.3-0.5mm帶1-2個葉原基為好。16 .原牛質體的分離有機械法一和酶解法一兩種方法17 .進行植物組織培養最基本的前提條件是一離體o18 .植物組織培養按培養過程中是否需要光，可分為一適光培養和一嗜光培養。20 .組織培養中有三大不易解決的問題，它們分別是黃化（污染）、褐化、玻璃化。21 .WZte培養基且風濃度低，適合生根培養。22 .在無毒苗的組織培養中，外植體的大小與其成活率成Mb，而與脫毒效果成一反比一

4、76;23 .一個已停止分裂的成熟細胞轉變為分生狀態，并形成未分化的愈傷組織的現象稱為“脫分化一”。25 .莖尖培養根據培養目的和取材大小可分為普通莖尖培養和莖尖分生組織.培養兩種類型。27 .愈傷組織的形態發生有器官發生和體細胞胚發生一兩種情況。28 .植物組織培養按培養的方式分為液體培養和固體一培養。29 .1960年，英國學者Cocking用一真菌纖維素酶酶解分離原生質體成功，從而創新原生質體的培養技術。30 .大多數植物組織培養的適宜溫度范圍是一2325一C,培養基的PH值是5.8_.32 .在組織培養中，ZT和GA必須用過濾法滅菌，而接種室空間采用紫外線照射，或一甲醛熏蒸法滅菌.33

5、 .不同的滅菌劑其滅菌的機理一般不一樣，次氯酸鈣和次氯酸鈉都是利用分解產生3離子（CI0）來殺菌的:升汞是靠汞離子一來達到滅菌目的。34 .幼胚培養時，其發育過程有早熟萌發、胚性發育、形成愈傷一三種方式。35 .植物的胚胎培養，包括胚胎培養、幼胚培養、一胚乳培養、胚珠培養以及子房的培養.38 .一個已停止分裂的成熟細胞轉變為分生狀態，并形成愈傷組織的現象稱為”脫分化39 .由胚乳培養可以獲得單一倍體植株，經秋水仙素處理可以獲得二倍體植株.40 .去除植物病毒的主要方法是一理化法一和組培法一兩種方法，當把二者結合起來脫毒效果最好.41 .花藥培養是一器官培養,花粉培養屬于一細胞培養，但二者的培養

6、目的一樣，都是要誘導花粉細胞發育成單倍體細胞，最后發育成一單倍體植株一.43.原牛質體的融合可實現本細胞的雜交，其融合的方式分為自然融合和人工誘導一兩類.二、不定選擇題（每小題2分）1,培養室里的濕度一般保持在_C_.A30-40%B50-60%C70-80%D80-90%2.下列不屬于生長素類的是AD。AKt；BIAA；CNAADZT3.影響培養基凝固程度因素有ABDA瓊脂的質量好壞；B高壓滅菌的時間；C高壓滅菌的溫度；D培養基的PH1.1. 性炭在組織培養中的作用有ABC。A吸附有毒物質；B減少褐變，防止玻璃化；C創造黑暗環境，增加培養基的通透性，利于根的生長；D增加培養基中的養分;5 .

7、下列具有細胞全能性的細胞是：ABCDoA成熟的老細胞；B幼嫩的組織細胞；C愈傷組織細胞D番茄的受精合子6 .第一次提出植物細胞具有全能性的理論概念的科學家是B:.Morel ； B Haberland ； CC Schleiden ；7.下列培 養基中一 C_無機鹽的濃度最低。匚 WhiteA MS培，養基；B B5培養基；C White培養基；N6培養基8 .高溫易被破壞分解的植物激素是AbDAIAA;BGA;CNAA;DZt9 .從單個細胞或一塊外植體形成典型的愈傷組織，大致經歷ACD三個時期。A誘導期；B潛伏期；C分化期；D分裂期10.卜列不屬于活性炭在組織培養中作用的是A吸附有毒物質；

8、B減少褐變，防止玻璃化；C創造黑暗環境，增加培養基的通透性，利于根的生長；D增加培養基中的養分;11 .下列不屬于細胞分裂素的植物激素是_BA6-BA；BNAACZt；DKt12 .植物組織培養的特點是ABC。A培養條件可人為控制；B生長周期短，繁殖率高；C管理方便；D產量大14.下列不屬于大量元素的鹽是_C_oANH4NO3BKNO3；CZnSO4.7H2O；DMgSO4.7H2O15 .下面屬于處于愈傷組織分裂期的特征是ABCDA細胞分裂加快B正在分裂的細胞體積小，內無液泡C細胞的核和核仁增至最大D細胞中的RNA含量減少，16 .在原生質體的培養中，滲透穩定劑的作用是：_人_A穩定原生質體

9、的形態而不使其被破壞B支持作用C提供營養D調節PH值17.能打破種子休眠，促進種子、塊莖、鱗莖等提前萌發的激素是：_ABAGABIAA；CNAADZt3.下列實驗中可能獲得單倍體植株的是_BCD。A小麥的莖尖培養；B番茄花藥培養；C玉米胚乳培養；D玉米花粉培養18.在組培條件下，花粉的發育大致有下列幾種途徑：cdA營養細胞發育途徑B生殖細胞發育途徑c營養細胞和生殖細胞同時發育途徑D花粉的均等分裂19.同一植株下列a部位病毒的含量最低.A葉片細胞；B莖尖生長點細胞；C莖節細胞；D根尖生長點細胞20 .第一次提出植物細胞具有全能性的理論概念的科學家是B：.AMorel；BHaberland；CSc

10、hleiden；DWhite21 .脫落酸（ABA需要用C法滅菌。A灼燒滅菌；B干熱滅菌；C過濾滅菌；D高壓濕熱滅菌；23 .下列實驗中可能獲得三倍體植株的是_C.A小麥的莖尖培養；B番茄花藥培養；C玉米胚乳培養；D玉米花粉培養24 .原生質體純化步驟大致有如下幾步：將收集到的濾液離心，轉速以將原生質體沉淀而碎片等仍懸浮在上清液中為準，一般以500r/min離心15min。用吸管謹慎地吸去上清液。將離心下來的原生質體重新懸浮在洗液中（除不含酶外，其他成分和酶液相同），再次離心，去上清液，如此重復三次。將原生質體混合液經篩孔大小為40100um勺濾網過濾，以除去未消化的細胞團塊和篩管、導管等雜質

11、，收集濾液。用培養基清洗一次，最后用培養基將原生質調到一定密度進行培養。一般原生質體的培養密度為104-106/ml。正確的操作步驟是：CAB（2XW3）CD25 .下列不屬于生長素類的植物激素是AD.AKtBIAACNAADABA26 .玉米素（ZT需要用_C衛滅菌.A灼燒滅菌B干熱滅菌C過濾滅菌D高壓濕熱滅菌三、判斷題（對的畫V、錯題畫“X”，并改正。每小題2分）1 .一個已分化的細胞若要表現其全能性，首先要經歷脫分化過程。2 .由胚乳培養獲得的三倍體植株，也一定要進行染色體倍數的檢查.V3 .一般來說，光照強度較強，幼苗容易徒長，而光照強度較弱幼苗生長的粗壯。4 .經過花藥培養所獲得的植

12、株都是單倍體。X5 .2,4-D可用0.1mol/L的HCI助溶，再加蒸儲水定容X6 .環境的相對濕度可以影響培養基的水分蒸發，一般要求80%90%的相對濕度。V7 .幼年細胞和組織比成年細胞和組織誘導愈傷組織容易.V8 .一般的說，PH值高于6.5時，培養基全變硬"氐于5時，瓊脂不能很好地凝固。V9 .在配制6-BA母液時，要先加少量的1mol的HCI溶解，再加蒸鐳水定容。V10 .未成熟胚較小、較嫩、顏色淺，不易培養；成熟胚較大、較硬、顏色較深，易培養.V11 .花器脫分化比莖葉容易；幼嫩的組織比成熟的老組織脫分化難。X12 .通過子房的培養，即可能得到單倍體植株，又可能得到二倍

13、體植株-V13 .在配制NAAS液時，要先加少量的1mol的HCI溶解，再加蒸儲水定容。X15 .環境的相對濕度過低會使培養基喪失大量水分，濕度過高時，易引起棉塞長霉，造成污染。V16 .White培養基無機鹽濃度低，適合生根培養。V17 .由性細胞發育而成的胚叫做胚狀體，而由體細胞發育而成的胚叫做合子胚.X18 .2，4-D可用0.1mol/L的NaOH或KOH助溶，而后加無菌水定容。V20 .二倍體細胞比單倍體細胞容易誘導愈傷組織.X21 .在MS的培養基成分中，MgSO4.7H2屬于微量元素.X22 .未成熟胚較小、較嫩、顏色淺，易培養；成熟胚較大、較硬、顏色較深，不易培養.X23 .固

14、體培養基可加進活性炭來增加通氣度，以利于發根。X24 .蘭花可以通過芽叢分離的組培途徑快繁，非洲菊通過原球莖增殖的途徑快繁.X25 .用于外植體、手、超凈臺等的表面消毒酒精濃度越大，消毒效果越好.X四、名詞解釋1.植物組織培養：是指在無菌和人工控制的環境條件下，利用適當的培養基，對離體的植物器官、組織、細胞及原生質體進行培養，使其再生細胞或完整植株的技術。2,細胞全能性：指每一個植物細胞都攜帶有該植物的全部遺傳信息，在適當條件下可表達出該細胞的所有遺傳信息，分化出植物有機體所有不同類型的細胞，形成不同類型的器官甚至胚狀體，直至形成完整植株的潛在能力。3 .脫分化：是指離體培養條件下生長的細胞、

15、組織或器官經過細胞分裂或不分裂逐漸失去原來的結構和功能而恢復分生狀態，形成無組織結構的細胞團或愈傷組織或成為未分化細胞特性的細胞的過程。4 .母液：在配制培養基之前，為了使用方便、簡化操作、用量準確，減少每次配藥稱量各種化學成分所花費的時間和誤差，常常將配制培養基所需無機大量元素、微量元素、鐵鹽、有機物、激素成分分別配制成比需要量大若干倍的濃縮母液5 .馴化：指外來植物通過改變其遺傳性狀以適應新環境的過程6 .外植體：把由活植物體上切取下來以進行培養的那部分組織或器官叫做外植體7 .愈傷組織培養：將一個細胞、一塊組織或一個器官的細胞，通過去分化形成愈傷組織，并在體外培養使之再分化成植株的技術。

16、8 .單細胞培養.：亦稱游離細胞培養(freecellculture)。是指酵母菌、細菌等單細胞生物的培養，或取多細胞生物體上的一個細胞的無菌培養。9 .滅菌：是指用物理或化學的方法殺滅全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽抱，使之達到無菌保障水平。10 .玻璃化現象：指試管苗的一種生長失調癥狀，當植物材料進行離體繁殖時，有些培養物的嫩莖、葉片往往會出現半透明狀和水漬狀，這種現象稱為玻璃化。其苗稱為玻璃化田。11 .無病毒苗：指不含該種植物主要危害病毒的苗木。12 .胚狀體：離體培養條件下，沒有經過受精過程，但是經過了胚胎發育過程所形成的胚狀類似物，此現象無論在體細胞培養還是生殖細胞培養中均

17、可以看到，因而統稱為體細胞胚或胚狀體。在離體植物細胞、組織或器官培養過程中，由一個或一些體細胞，經過胚胎發生和發育過程，形成與合子胚相類似的結構13 .細胞全能性：指植物的每一個細胞都攜帶有一完整的基因組，并具有發育成完整植株的潛在能力。14 指示植物：指示植物與被指示對象之間在全部分布區內保持聯系的稱為普遍指示植物：只在分布區的一定地區內保持聯系的則稱為地方指示植物。15 .消毒：消毒是指殺死病原微生物、但不一定能殺死細菌芽抱的方法。通常用化學的方法來達到消毒的作用。16 .植物生長物質：是指一些在低濃度下能調節植物生長發育的微量有機物。植物生長物質包括五大類被公認的植物激素和其他內源植物生

18、長調節物質。17 .單倍體：只含有配子體染色體組數的植株。18 .無菌操作：用于防止微生物進入人體組織或其它無菌范圍的操作技術稱為無菌操作19.脫分化：離體培養條件下生長的器官、組織、細胞，經過細胞分裂或不分裂而恢復分生狀態，形成無組織結構的細胞團或愈傷組織或成為未分化細胞特性的細胞過程。21 .花粉胚：花粉胚就是用花粉經過人工的組織培養而形成的幼胚，發育成的植株就只有正常胚一半的染色體組，所以由花粉胚發育成的植株不會產生種子。22 .褐變：飼料在加工過程中或長期貯存于濕熱環境下，其所含的氨基化合物如蛋白質、氨基酸及醛、酮等與還原糖相遇，經過一系列反應生成褐色聚合物的現象稱為褐變反應，簡稱褐變

19、。24 .指示植物法：25 .再分化：離體培養的植物細胞和組織可以脫分化狀態重新進行分化，形成另一種或幾種類型的細胞、器官、組織、甚至完整植株。26 .平板培養：亦稱平面培養。將瓊脂或明膠等凝膠狀固體培養基制成平面狀，然后在此平面上培養微生物或多細胞生物的細胞、組織或器官，這種培養稱為平板培養27 .次生代謝產物：植物中一大類并排植物生長發育所需的小分子化合物，其產生和分布通常有種屬、器官組織和生長發育期的特異性。次生產物在植物中的合成與分解過程稱為此生代謝。28 .人工種子：又稱合成種子，指植物離體培養中產生的胚狀體或不定芽，被包裹在含有養分和保護功能的人工胚乳和人工種皮中，從而形成能發芽出

20、苗的顆粒狀。五、簡答題1 .植物組織培養有哪些特點？答：植物組織培養的主要特點是采用微生物學的實驗手段來操作植物離體的器官、組織和細胞。特點：培養條件可人為控制植物生長周期短，繁殖系數高管理方便，不受季節環境條件影響，有利于工廠化生產和自動化控制。2 .培養基一般包括哪些基本成分？其作用是什么？如何配制？答：培養基的構成要素通常可分為：水分、無機鹽類、有機營養成分、植物生長調節物質、天然物質、Ph凝固劑等。水分是一切生物生命活動的物質基礎，是很多生物化學反應的原料和代謝產物。無機鹽類是構成植物細胞中核酸、蛋白質以及生物膜系統等必不可少的營養元素。有機營養成分為植物生命活動提供必不可少的碳源、氮

21、源、能源等物質。植物生長調節劑可以促進植物組織的脫分化和形成愈傷組織，還可以誘導不定芽、不定胚的形成。天然有機添加劑通常富含有機營養成分或生理活性物質。pH過高時，培養基會變硬；pH過低時，貝膨響培養基的凝固。凝固劑是在配制固體培養基時使用，使培養基凝固。其他添加物是有時為了減少外植體的褐變，需要向培養基中加入一些防止褐化的物質。3 .簡述愈傷組織細胞分化。4 .原生質體融合有哪幾種主要方法？答：植物原生質體最大特性是去掉細胞壁的裸細胞無論來源如何都具有彼此融合的能力1.自發融合2.誘發融合：a，NaNO處理b，高PH值一高濃度鈣離子處理c，聚乙二醇(PEG處理d，電融合3.化學融合5 .組織

22、培養中，pH值起什么作用？如果pH值過高或過低會有什么后果？6 .植物組織培養技術主要包括哪些環節？各環節的主要工作內容是什么？答：（1）培養基配置技術：包括培養基的選擇、母液配制、培養基配制、培養基滅菌。（2）培養材料制備滅菌技術：供體植物材料選擇、外植體的選擇和處理。（3）無菌接種技術：包括接種室的消毒、工作人員用工作服、口罩等的消毒、超凈工作臺的清潔與殺菌、操作工具的滅菌。（4）培養技術：主要是培養條件的控制，包括溫度、光照、濕度等各種物理環境條件及培養基組成、PH滲透壓等各種化學環境條件。7 .培養基、培養器皿和植物材料通常怎樣滅菌？答：1）培養基一般采用濕熱滅菌，如果培養基中的有些成

23、分高溫易分解，則可采用過濾滅菌。（2）培養器皿可采用濕熱滅菌或干熱滅菌。（3）植物材料一般采用藥劑浸泡滅菌，具體操作如下：A）外植體的預處理，對植物組織進行修整，去掉不需要的部分，并將外植體用流水沖洗干凈。B）用70%勺酒精浸潤材料30s左右。C）用滅菌劑浸泡滅菌，滅菌時不時攪動，使植物材料與滅菌劑有良好的接觸，若滅菌過程中加入數滴吐溫，則滅菌效果更好。D）植物材料用無菌水沖洗3-5次，以除去滅菌齊U。8 .由胚乳培養獲得的植株，是否一定要進行染色體倍數的檢查？為什么？9 .花藥培養產生的植株染色體倍性如何？其產生的原因是什么？10 .為什么對脫毒處理后產生的植株必須進行病毒鑒定？為什么已通過

24、病毒（特定病毒）鑒定的無病毒苗還須重復鑒定？11 .使用植物生長物質應注意些什么？12 .為什么幼胚比成熟胚培養要求的培養基成分復雜？13 .胚胎培養技術在育種工作中有哪些應用？14 .試比較花藥培養與花粉培養的異同。15 .簡述酶法分離原生質體的步驟.答：葉片表面消毒一去除表皮，將葉片切成小塊一葉碎片放入含有酶和滲透壓穩定劑的溶液中一搖床保溫培養一原生質體沉到培養皿底部一除去酶溶液一將原生質體移入CPW清洗一離心一清洗基質兩次一重懸浮于培養基16 .影響馬鈴薯莖尖培養脫毒的因素有哪些？17 簡述人工種子生產步驟？答：選取目標植物T從適合的外植體上誘導愈傷組織一將愈傷組織轉移到液體培養基一愈傷組織在液體培養基中增生擴大一愈傷組織轉移至無激素培養基T產生體細胞胚f包裹人工種皮f煉苗f溫室（大棚）播種f獲得目標植物18-愈傷組織的形態發生有哪兩種情況？并比較各自由此形成完整植株的不同。1、答