1、藥 理 學(xué) 綜 合 設(shè) 計(jì) 性 實(shí) 驗(yàn)各位領(lǐng)導(dǎo)與老師: 根據(jù)藥理學(xué)的實(shí)驗(yàn)特點(diǎn)及現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)條件，初步擬定了個(gè)具有可行性的綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，開設(shè)對(duì)象主要為護(hù)理本科生，也適用于專科生。但具體開設(shè)的內(nèi)容還需各位領(lǐng)導(dǎo)與老師的商榷。 由于實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目比較復(fù)雜，每次實(shí)驗(yàn)所需課時(shí)均比較多，且單一教師輔導(dǎo)困難比較大，至少需要雙教師輔導(dǎo)（比如采血、插管、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備等），請(qǐng)各位領(lǐng)導(dǎo)與老師理解。課程設(shè)計(jì)：王 鵬基 礎(chǔ) 教 研 室2005年1月9日實(shí)驗(yàn)一 氯丙嗪的降溫作用（設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)，4學(xué)時(shí)）實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介：本實(shí)驗(yàn)使學(xué)生掌握實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)理論和方法（包括動(dòng)物選擇、實(shí)驗(yàn)分組、對(duì)照原則、處理因素的標(biāo)準(zhǔn)化等多方面知識(shí)），并通過觀察氯丙嗪的

2、降溫作用，掌握其降溫特點(diǎn)，聯(lián)系臨床應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)輔導(dǎo)：至少雙人輔導(dǎo)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹空莆諏?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)理論，通過觀察氯丙嗪的降溫作用，掌握其降溫特點(diǎn)，聯(lián)系臨床應(yīng)用。【實(shí)驗(yàn)器材】小鼠、注射器、體溫計(jì)、冰箱、氯丙嗪等?！緦?shí)驗(yàn)過程】一、首先介紹實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)理論（一）實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是科學(xué)研究計(jì)劃中關(guān)于研究方法與步驟的一項(xiàng)內(nèi)容，是實(shí)驗(yàn)研究所涉及的各項(xiàng)基本問題的合理安排。嚴(yán)密合理的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是順利進(jìn)行研究工作的保證，同時(shí)也能最大限度地減少實(shí)驗(yàn)誤差以獲得精確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)論，甚至可以使研究工作事半功倍。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三大要素，即處理因素、實(shí)驗(yàn)對(duì)象與實(shí)驗(yàn)效應(yīng)。1.處理因素(1)處理因素 實(shí)驗(yàn)中根據(jù)研究目的確定的由實(shí)驗(yàn)者人為施

3、加給受試對(duì)象的因素稱為處理因素，如藥物、某種手術(shù)等。一次實(shí)驗(yàn)涉及的因素不宜過多，否則會(huì)使分組增多，受試對(duì)象的例數(shù)增多，在實(shí)際工作中難以控制。但處理因素過少，又難以提高實(shí)驗(yàn)的廣度和深度。(2)明確非處理因素：非處理因素雖然不是我們的研究因素，但其中有些因素可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，產(chǎn)生混雜效應(yīng)，所以這些非處理因素又稱混雜因素。設(shè)計(jì)時(shí)明確了這些非處理因素，才能設(shè)法消除它們的干擾作用。(3)處理因素的標(biāo)準(zhǔn)化：處理因素在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)做到標(biāo)準(zhǔn)化，即保持不變，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)。如實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中處理因素是藥物時(shí)，則藥物的劑型、給藥途徑、質(zhì)量(成分、出廠批號(hào)等)必須保持不變。2.實(shí)驗(yàn)對(duì)象實(shí)驗(yàn)對(duì)象的選擇十分重

4、要，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有著極為重要的影響。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)主要實(shí)驗(yàn)對(duì)象包括整體動(dòng)物(正常動(dòng)物、麻醉動(dòng)物和病理模型)、離體器官、組織及細(xì)胞等。3.實(shí)驗(yàn)效應(yīng)實(shí)驗(yàn)效應(yīng)是指受試對(duì)象在處理因素作用后呈現(xiàn)的反應(yīng)或受到的影響，其具體表現(xiàn)形式是指標(biāo)。這些指標(biāo)包括計(jì)數(shù)指標(biāo)(或定性指標(biāo))和計(jì)量指標(biāo)(或定量指標(biāo))等。指標(biāo)的選定需符合特異性、客觀性、重復(fù)性、靈敏性、精確性、可行性等原則。 (二)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本原則為了提高研究效率，控制誤差和偏倚，藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)同其它科學(xué)研究一樣必須遵循三大基本原則，即對(duì)照、隨機(jī)和重復(fù)原則。1.對(duì)照原則對(duì)照是比較的前提。在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中存在許多影響因素，為消除無關(guān)因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，實(shí)驗(yàn)中必須

5、設(shè)立對(duì)照組。對(duì)照應(yīng)符合齊同可比的原則，除處理因素不同外，其他非處理因素盡量保持相同，從而使實(shí)驗(yàn)誤差盡可能縮小。如實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要求種屬、性別、年齡相同，體重相近；實(shí)驗(yàn)的季節(jié)、時(shí)間和實(shí)驗(yàn)室的溫度、濕度也要一致；操作的手法前后要相同等。根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究的目的和要求不同，可選用不同的對(duì)照形式，常用的對(duì)照形式有：空白對(duì)照(正常對(duì)照)、實(shí)驗(yàn)對(duì)照(陰性對(duì)照)、標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照(陽性對(duì)照)、自身對(duì)照、相互對(duì)照(組間對(duì)照)等。2.隨機(jī)原則即所研究總體中的每一個(gè)研究對(duì)象都有同等的機(jī)會(huì)被分配到各組中去，隨機(jī)的目的是將樣本的生物差異平均分配到各組。實(shí)驗(yàn)中凡可能影響結(jié)果的一切非研究因素都應(yīng)隨機(jī)化處理，使各組樣本的條件盡量一致，消除或減

6、小組間人為的誤差，從而使處理因素產(chǎn)生的效應(yīng)更加客觀，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為可靠。3.重復(fù)原則重復(fù)是指實(shí)驗(yàn)中受試對(duì)象的例數(shù)或?qū)嶒?yàn)次數(shù)要達(dá)到一定的數(shù)量，它包含有兩方面的意思：即重復(fù)性和重現(xiàn)性。若樣本量過少，可能把個(gè)別現(xiàn)象誤認(rèn)為普遍現(xiàn)象，把偶然或巧合事件當(dāng)作必然規(guī)律，其結(jié)論的可靠性差。如樣本過多，不僅增加工作難度，而且造成不必要的人力、財(cái)力和物力的浪費(fèi)。所以，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要對(duì)樣本大小作出科學(xué)的估計(jì)，以滿足統(tǒng)計(jì)處理的要求二、氯丙嗪的降溫作用設(shè)計(jì)部分：每臺(tái)面4只小鼠，體溫計(jì)1只，A、B兩種藥水（分別為氯丙嗪和生理鹽水）由同學(xué)們自己設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)分組、實(shí)驗(yàn)步驟，通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果來判斷A、B藥水各對(duì)應(yīng)的藥品并總結(jié)實(shí)驗(yàn)所用原

7、理，并掌握氯丙嗪的降溫特點(diǎn)。三、臨床護(hù)理聯(lián)系：氯丙嗪與阿司匹林在解熱方面的異同，聯(lián)系兩藥在臨床上的不同應(yīng)用?！緦?shí)驗(yàn)報(bào)告要點(diǎn)】編號(hào)體重給藥前肛溫藥物劑量低溫30min給藥后肛溫1234實(shí)驗(yàn)二 利尿藥的利尿作用（綜合性實(shí)驗(yàn)，4學(xué)時(shí)）實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介：本實(shí)驗(yàn)綜合了藥理學(xué)、外科學(xué)（固定、備皮、消毒、手術(shù)等）、護(hù)理學(xué)（靜脈注射法）及臨床病例分析等多學(xué)科多方面的知識(shí)實(shí)驗(yàn)輔導(dǎo)：至少雙人輔導(dǎo)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹砍醪秸莆胀饪剖中g(shù)和外科結(jié)的操作，觀察呋喃苯胺酸的利尿作用，并通過病例分析，聯(lián)系其臨床應(yīng)用?！緦?shí)驗(yàn)器材】白兔、注射器、導(dǎo)尿管、解剖臺(tái)、剪刀、呋喃苯胺酸【實(shí)驗(yàn)方法】1 外科基本操作：兔背位固定，耳靜脈麻醉后，備皮，局部消毒

8、后，剪開腹部皮膚和肌肉，找到膀胱，將膀胱剪一小口，插入導(dǎo)尿管，用線將膀胱與導(dǎo)尿管結(jié)扎在一起（外科結(jié)結(jié)扎），將原有尿液棄去后，收集尿液10min，記錄體積。2 經(jīng)兔耳靜脈注射呋喃苯胺酸1ml，連續(xù)收集尿液3次，每次10min，記錄體積，分析結(jié)果。觀察呋喃苯胺酸的利尿效果。3病例分析：a、急性水腫患者的搶救及護(hù)理。 b、高血壓患者或慢性心功能不全患者的搶救、治療與護(hù)理。 C、急性藥物中毒患者的搶救及護(hù)理。【實(shí)驗(yàn)報(bào)告要點(diǎn)】給藥前尿液體積給藥后尿液體積10min10min10min10min實(shí)驗(yàn)三 磺胺嘧啶半衰期的測(cè)定（綜合性實(shí)驗(yàn)，4學(xué)時(shí)）【實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介】本實(shí)驗(yàn)綜合了基礎(chǔ)藥理學(xué)、臨床藥理學(xué)、計(jì)算機(jī)、分析化

9、學(xué)、護(hù)理學(xué)等多方面的知識(shí)，為學(xué)生今后參與臨床藥物監(jiān)測(cè)（TDM）打下基礎(chǔ)?！緦?shí)驗(yàn)輔導(dǎo)】至少雙人輔導(dǎo)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹客ㄟ^磺胺嘧啶鈉(SD-Na)血濃測(cè)定實(shí)驗(yàn)，掌握臨床藥理藥物動(dòng)力學(xué)方面的一些基本操作方法，了解藥物時(shí)量關(guān)系曲線的變化及藥品說明書中涉及的一些主要參數(shù)，并為臨床藥物監(jiān)測(cè)（TDM）打下基礎(chǔ)?！緦?shí)驗(yàn)器材】白兔、注射器、試管、移液管、721分光光度計(jì)、肝素、0.5%亞硝酸鈉、20三氯醋酸、0.5%麝香草酚【實(shí)驗(yàn)原理】磺胺嘧啶鈉在酸性環(huán)境下其苯環(huán)上的氨基(NH2)離子化生成銨類化合物(NH3+)，與亞硝酸鈉發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽，該化合物在525 nm波長下比色，其光密度與藥物濃度成正比。 【實(shí)驗(yàn)

10、方法】1、取兔1只，靜脈注射1000 U/ml肝素1 ml/kg，并取空白血0.5 ml。對(duì)側(cè)耳緣靜脈注射20SD-Na 2 ml/kg，并準(zhǔn)確計(jì)時(shí)。分別于給藥后5、10、15、20、30、60和90 min自耳緣靜脈(注射肝素側(cè))取血0.5 ml。耳緣靜脈注射1000 U/ml肝素1 ml/kg，并取空白血0.5 ml。對(duì)側(cè)耳靜脈注射20SD-Na 2 ml/kg，并準(zhǔn)確計(jì)時(shí)。分別于給藥后5、10、15、20、30、60和90 min自耳緣靜脈(注射肝素側(cè))取血0.5 ml。將血0.2 ml與20三氯醋酸2 ml、蒸餾水3.8 ml混勻后，2500轉(zhuǎn)/分離心10 min。取上清3.0 ml，

11、先加0.5%亞硝酸鈉1.0 ml，再加0.5%麝香草酚2.0 ml，混勻，于721分光光度計(jì)525 nm波長處測(cè)定光密度值(OD525)，將光密度值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算SD-Na血藥濃度(mg/ml)。各樣本OD值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程求得值為SD-Na含量(mg)，除以血體積0.1 ml，即得SD-Na血藥濃度(mg/ml)。2. 藥時(shí)曲線及藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的計(jì)算：(1) 消除速率常數(shù)：K (min-1)= 2.303 B(2) 血漿半衰期：t1/2 (min) = 0.693/K(3) 初始濃度：C0 (mg/ml) = lg-1A(4) 表觀分布容積：Vd (ml/kg) = D0/C0 (

12、D0為給藥劑量) 3.臨床護(hù)理聯(lián)系：了解決定藥物給藥間隔的主要因素，保證臨床用藥的安全有效。了解藥物時(shí)量關(guān)系曲線的變化及藥品說明書中涉及的一些主要參數(shù)。實(shí)驗(yàn)四 普魯卡因的LD50測(cè)定（綜合性實(shí)驗(yàn)，4學(xué)時(shí)）【實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介】本實(shí)驗(yàn)綜合了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、計(jì)算機(jī)應(yīng)用、藥理學(xué)及毒理學(xué)等多方面的知識(shí)，為以后學(xué)生論文寫作和設(shè)計(jì)打下基礎(chǔ)?！緦?shí)驗(yàn)輔導(dǎo)】至少雙人輔導(dǎo)【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?通過實(shí)驗(yàn)，學(xué)習(xí)測(cè)定藥物L(fēng)D50的方法、步驟和計(jì)算方法，了解急性毒性試驗(yàn)的常規(guī)方法。【實(shí)驗(yàn)器材】 小鼠、注射器、普魯卡因溶液等?！緦?shí)驗(yàn)方法】 1、預(yù)試驗(yàn) 取小鼠810只，以2只為一組分成45組，選擇組距較大的一系列劑量，分別按組腹腔注射普魯卡

13、因溶液，觀察出現(xiàn)的癥狀并記錄死亡數(shù)，找出引起0%死亡率和100死亡率劑量的所在范圍（至少應(yīng)找出引起20%80%死亡率）。（參考劑量：LD100為250mg/kg, LD 0為 164mg/kg）。 2、正式試驗(yàn) 在預(yù)初驗(yàn)所獲得的0%和100%致死量的范圍內(nèi)，選用幾個(gè)劑量（一般選45個(gè)劑量），每組10只小鼠，動(dòng)物的體重和性別要均勻分配，完成動(dòng)物分組和劑量計(jì)算后按腹腔注射給藥。3、LD50測(cè)定中應(yīng)觀察紀(jì)錄的項(xiàng)目 實(shí)驗(yàn)要素：實(shí)驗(yàn)題目，實(shí)驗(yàn)日期，藥物的批號(hào)，動(dòng)物品系，來源，性別，體重，給藥方式及劑量、給藥時(shí)間等。 給藥后各種反應(yīng)：潛伏期，中毒現(xiàn)象，開始出現(xiàn)死亡的時(shí)間，末只死亡的時(shí)間，死前的現(xiàn)象，各組死亡的只數(shù)等。 尸解及病理切片：對(duì)死亡的小鼠及時(shí)進(jìn)行尸解，觀察內(nèi)臟的變化（心、肝、脾、肺、腎），記錄病變情況。若肉眼可見變化時(shí)則需進(jìn)行病理檢查。觀察結(jié)束時(shí)對(duì)全部存活動(dòng)物稱體重，尸解，同樣觀察內(nèi)臟病變與中毒死亡鼠比較。當(dāng)發(fā)現(xiàn)有病變時(shí)同樣進(jìn)行病理檢查，以比較中毒后病理變化及恢復(fù)情況。【實(shí)驗(yàn)結(jié)果