1、藥物分析第六章芳酸類非甾體抗炎藥物的實際分析2結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)性質(zhì)性質(zhì)鑒別鑒別雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查含量測定含量測定體內(nèi)藥物分析體內(nèi)藥物分析3芳酸類非甾體藥物芳酸類非甾體藥物藥理作用：藥理作用：抗炎、抗風濕、止痛、 退熱、抗凝血應(yīng)用應(yīng)用：關(guān)節(jié)炎、發(fā)熱、各種慢性疼痛4分類分類水楊酸鄰氨基苯甲酸鄰氨基苯乙酸芳基丙酸吲哚乙酸苯并噻嗪甲酸5第一節(jié)第一節(jié) 典型藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)典型藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、典型藥物與結(jié)構(gòu)特點一、典型藥物與結(jié)構(gòu)特點 苯環(huán)苯環(huán)各種取代基各種取代基 羧基羧基游離、鹽、酯游離、鹽、酯 氨基氨基酰胺酰胺6水楊酸類水楊酸類COOHORR7典型藥物：典型藥物：8鄰氨基苯甲酸類鄰氨基苯甲酸類COOHHNRC

2、OOHHNCH3CH3甲芬那酸典型藥物：典型藥物：9鄰氨基苯乙酸類鄰氨基苯乙酸類HNRORO典型藥物：雙氯芬酸鈉典型藥物：雙氯芬酸鈉10芳基丙酸類芳基丙酸類HOCH3ORR典型藥物：布洛芬、酮洛芬、萘普生典型藥物：布洛芬、酮洛芬、萘普生11吲哚乙酸類吲哚乙酸類NRCOOHCH3R典型藥物：吲哚美辛典型藥物：吲哚美辛12苯并噻嗪甲酸類苯并噻嗪甲酸類SNOHNHROOOCH3典型藥物：吡羅昔康、美洛昔康典型藥物：吡羅昔康、美洛昔康13其他非甾體抗炎藥其他非甾體抗炎藥OHNSOOCH3NO2尼美舒利NCH3OHO對乙酰氨基酚14二、主要理化性質(zhì)二、主要理化性質(zhì)（一）酸性（一）酸性 游離羧基酸性較強游

3、離羧基酸性較強 芳酸芳酸芳取代脂肪酸芳取代脂肪酸 可用酸堿滴定法測定含量可用酸堿滴定法測定含量15（二）水解性（二）水解性 酯鍵、酰胺鍵能水解酯鍵、酰胺鍵能水解 水解產(chǎn)物可用于鑒別水解產(chǎn)物可用于鑒別 水解反應(yīng)可用于定量測定水解反應(yīng)可用于定量測定16（三）光譜特征（三）光譜特征 紅外：鑒別紅外：鑒別 紫外：鑒別、含量測定、均勻度、溶出度紫外：鑒別、含量測定、均勻度、溶出度（四）基團或元素特性（四）基團或元素特性 酚羥基、二苯甲酮、芳伯胺基、硫元素酚羥基、二苯甲酮、芳伯胺基、硫元素17第二節(jié)第二節(jié) 鑒別試驗鑒別試驗一、與三氯化鐵反應(yīng)一、與三氯化鐵反應(yīng) 1.水楊酸反應(yīng)水楊酸反應(yīng) 與三氯化鐵反應(yīng)生成紫

4、堇色配合物與三氯化鐵反應(yīng)生成紫堇色配合物 +FeCl3+H2OOHOHOOOOFeOH18注意：注意： 1.反應(yīng)條件：反應(yīng)條件：pH46 ，強酸性環(huán)境產(chǎn)物分解，強酸性環(huán)境產(chǎn)物分解 2.反應(yīng)靈敏，在稀溶液中進行反應(yīng)靈敏，在稀溶液中進行 3.不同藥物產(chǎn)物顏色略有差異不同藥物產(chǎn)物顏色略有差異 4.阿司匹林阿司匹林紫堇色紫堇色19+FeCl3NHCOCH3OH3NHCOCH3O-Fe3+3HCl2.酚羥基反應(yīng)酚羥基反應(yīng) 對乙酰氨基酚加三氯化鐵顯藍紫色對乙酰氨基酚加三氯化鐵顯藍紫色20二、縮合反應(yīng)二、縮合反應(yīng) 1.酮或醛結(jié)構(gòu)與肼基縮合酮或醛結(jié)構(gòu)與肼基縮合 OOCH3HONO2NO2HNNH2+H2SO4

5、ONCH3HOHNO2NNO221ArNH2HClNaNO2重氮鹽橙黃猩紅色萘酚OH-NH2R三、重氮化三、重氮化偶合反應(yīng)偶合反應(yīng) 芳香第一胺類鑒別反應(yīng)芳香第一胺類鑒別反應(yīng)具芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物具芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物 OH22 直接：對氨基水楊酸鈉、鹽酸普魯卡因、直接：對氨基水楊酸鈉、鹽酸普魯卡因、苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺苯佐卡因、鹽酸普魯卡因胺 間接：對乙酰氨基酚（撲熱息痛）、醋間接：對乙酰氨基酚（撲熱息痛）、醋氨苯砜、貝諾酯氨苯砜、貝諾酯 23四、氧化反應(yīng)四、氧化反應(yīng) 甲芬那酸甲芬那酸+硫酸硫酸+重鉻酸鉀重鉻酸鉀深藍色深藍色 棕綠色棕綠色 吲哚美辛吲哚美辛+硫酸硫酸+重鉻酸

6、鉀重鉻酸鉀紫色紫色 吲哚美辛吲哚美辛+鹽酸鹽酸+亞硝酸鈉亞硝酸鈉綠色綠色 黃色黃色2423Na CO 硫酸阿司匹林水楊酸鈉醋酸鈉水楊酸（白色） 醋酸臭氣五、水解反應(yīng)五、水解反應(yīng) NaOH 稀鹽酸雙水楊酯水楊酸白色 （測定熔點）， 可溶于醋酸銨25六、特征元素的反應(yīng)六、特征元素的反應(yīng) 1.氯元素的鑒別氯元素的鑒別 兩種鑒別方法兩種鑒別方法 2.硫元素的鑒別硫元素的鑒別26七、光譜法七、光譜法 （一）紫外（一）紫外-可見分光光度法可見分光光度法 1.最大吸收波長發(fā)最大吸收波長發(fā) 2.最大與最小吸收波長法最大與最小吸收波長法 3.吸光度法吸光度法 4.吸光度比值法吸光度比值法（二）紅外分光光度法（二

7、）紅外分光光度法27八、色譜法八、色譜法 （一）（一）TLC 對照品與供試品斑點位置一致對照品與供試品斑點位置一致 （二）（二）HPLC 對照品與供試品保留時間一致對照品與供試品保留時間一致28第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)及其檢查法特殊雜質(zhì)及其檢查法一、阿司匹林和雙水楊酸酯一、阿司匹林和雙水楊酸酯 雜質(zhì)來源：雜質(zhì)來源： 原料殘存（生產(chǎn)過程中乙酰化不完全）原料殘存（生產(chǎn)過程中乙酰化不完全） 水解產(chǎn)生（貯存過程中水解產(chǎn)生）水解產(chǎn)生（貯存過程中水解產(chǎn)生） 29ONaCO2ONaCOONaOHCOOHH+(CH3CO)2OOCOCH3COOHOCOOHOOH（一）合成路線：（一）合成路線：30（二）阿司匹林

8、中游離水楊酸及有關(guān)物質(zhì)（二）阿司匹林中游離水楊酸及有關(guān)物質(zhì) 1.1.水楊酸水楊酸 來源：原料、水解產(chǎn)物來源：原料、水解產(chǎn)物 酚羥基酚羥基有色醌類雜質(zhì)有色醌類雜質(zhì)檢查方法檢查方法HPLCHPLC法法 固定相：固定相：ODSODS 流動相：乙腈流動相：乙腈- -四氫呋喃四氫呋喃- -冰醋酸冰醋酸- -水水 按照外標法以峰面積計算按照外標法以峰面積計算312.2.有關(guān)物質(zhì)的檢查有關(guān)物質(zhì)的檢查OHOCOCH3(CH3CO)2OOHOHCOOH+COOOCOCH3COOHOCOCH3+COO醋酸苯酯水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯32檢查方法檢查方法HPLCHPLC法法 固定相：固定相：ODSODS 流動相：流

9、動相：A A 乙腈乙腈- -四氫呋喃四氫呋喃- -冰醋酸冰醋酸- -水水 B B 乙腈乙腈 對照液：對照液：0.5%0.5%供試品溶液供試品溶液 要求：供試品溶液雜質(zhì)峰面積和不得大要求：供試品溶液雜質(zhì)峰面積和不得大于對照液峰面積于對照液峰面積33（三）雙水楊酸酯中游離水楊酸的檢查（三）雙水楊酸酯中游離水楊酸的檢查 水楊酸水楊酸+Fe3+顯色顯色 測定測定530nm吸光度吸光度 要求：供試品溶液吸光度小于對照液要求：供試品溶液吸光度小于對照液 原料藥：原料藥：0.5% 制劑：制劑：1.5%34二、甲芬那酸中二、甲芬那酸中2,3-二甲基苯胺二甲基苯胺（一）合成工藝（一）合成工藝COOHClH3CC

10、H3NH2+COOHHNH3CCH3Cu35（二）檢查方法（二）檢查方法 GC程序升溫法檢查程序升溫法檢查2,3-二甲基苯胺二甲基苯胺 限度：限度：0.01% 供試品溶液、對照品溶液供試品溶液、對照品溶液 36三、二氟尼柳中有關(guān)物質(zhì)的檢查三、二氟尼柳中有關(guān)物質(zhì)的檢查FFNH2FF+偶合Cu乙酰化FFCOCH3FFOCOCH3氧化H2O2FFOH水解FFOH羧化COOH371.有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)A高低濃度對比法高低濃度對比法 方法：方法：S 溶劑溶解稀釋供試品溶液一定量供試品溶液對照溶液38供試品對照品39判斷：判斷： 控制雜質(zhì)斑點個數(shù)，控制雜質(zhì)種類控制雜質(zhì)斑點個數(shù)，控制雜質(zhì)種類 供試品溶液所顯雜

11、質(zhì)斑點不得深于對供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點不得深于對照溶液的主斑點（或熒光強度）照溶液的主斑點（或熒光強度）40優(yōu)點：以供試品的稀溶液作為對照液，不優(yōu)點：以供試品的稀溶液作為對照液，不需要雜質(zhì)對照品，簡單、價廉，還可配成需要雜質(zhì)對照品，簡單、價廉，還可配成幾種限量的對照溶液；幾種限量的對照溶液；缺點：不同物質(zhì)，不同缺點：不同物質(zhì)，不同R Rf f值比較，準確度值比較，準確度差、直觀性差。差、直觀性差。 412.有關(guān)物質(zhì)有關(guān)物質(zhì)B HPLC法法 固定相：固定相：C18 流動相：水流動相：水-甲醇甲醇-乙腈乙腈-冰醋酸冰醋酸 檢測波長：檢測波長：254nm 要求：雜質(zhì)峰面積和小于對照液主要求：雜質(zhì)峰面

12、積和小于對照液主 峰面積峰面積42NaOHSsol 中性乙醇酚酞滴定終點第四節(jié)第四節(jié) 含量測定含量測定一、酸堿滴定法一、酸堿滴定法 1. 直接滴定法直接滴定法43阿司匹林阿司匹林 ChP（2010） 取本品約，精密稱定，加中性乙醇（對酚酞取本品約，精密稱定，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）指示液顯中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（）滴定。每滴，用氫氧化鈉滴定液（）滴定。每lml的氫氧的氫氧化鈉滴定液（）相當于的化鈉滴定液（）相當于的C9H8O4。44COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O45（1 1）測定方法及計算）測定方法

13、及計算 反應(yīng)摩爾比為反應(yīng)摩爾比為11 11 （2 2）討論）討論 中性乙醇中性乙醇 溶解阿司匹林且防止酯鍵水解。溶解阿司匹林且防止酯鍵水解。“中性中性”是對中和法所用的指示劑而言是對中和法所用的指示劑而言46 優(yōu)點：簡便、快速優(yōu)點：簡便、快速 缺點：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定）缺點：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定） 酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸）酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸） 適用范圍：不能用于含水楊酸過高或制劑分適用范圍：不能用于含水楊酸過高或制劑分 析，只能用于合格原料藥的含量測定析，只能用于合格原料藥的含量測定472. 水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法 酯的一般含量測定方法酯的一般含量測定方

14、法阿司匹林阿司匹林:COOHOCOCH3+ 2NaOH水解COONaOH+CH3COONa2NaOH（過量）（過量）H2SO4Na2SO42H2O水解：水解：剩余滴定：剩余滴定：48USPUSP方法方法：取本品約，精密稱定：取本品約，精密稱定, ,加入氫氧化鈉滴加入氫氧化鈉滴定液（），混合，緩緩煮沸定液（），混合，緩緩煮沸10min10min，放冷，加酚酞，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（）滴定剩余的氫氧化鈉，指示液，用硫酸滴定液（）滴定剩余的氫氧化鈉，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。每并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。每1ml1ml的氫氧化鈉的氫氧化鈉滴定液（）相當于的滴定液（）相當于的C C9 9

15、H H8 8O O4 4。 49 反應(yīng)摩爾比為反應(yīng)摩爾比為1212 優(yōu)點：消除了酯鍵水解的干擾優(yōu)點：消除了酯鍵水解的干擾 缺點：酸性雜質(zhì)干擾缺點：酸性雜質(zhì)干擾50 取本品取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于阿司片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于阿司匹林），置錐形瓶中，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）溶匹林），置錐形瓶中，加中性乙醇（對酚酞指示液顯中性）溶解后，振搖使阿司匹林溶解，加酚酞指示液解后，振搖使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氫氧化滴，滴加氫氧化鈉滴定液（）至溶液顯粉紅色，再精密加氫氧化鈉滴定液（）鈉滴定液（）至溶液顯粉紅色，再精密加氫氧化鈉滴定液（）40m

16、1，置水浴上加熱，置水浴上加熱15分鐘并時時振搖，迅速放冷至室溫，用分鐘并時時振搖，迅速放冷至室溫，用硫酸滴定液（）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每硫酸滴定液（）滴定，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。每lml的氫氧化鈉滴定液（）相當于的的氫氧化鈉滴定液（）相當于的C9H8O4。 3.兩步滴定法兩步滴定法 阿司匹林片、阿司匹林腸溶片阿司匹林片、阿司匹林腸溶片 氯貝丁酯氯貝丁酯 51COOHOCOCH3+NaOHCOONaOCOCH3+H2O酒石酸枸櫞酸水楊酸醋酸+NaOH鈉鹽+H2O第一步第一步 中和中和52第二步第二步 水解后剩余滴定水解后剩余滴定 COONaOCOCH3+NaOHCOONaOH+CH3COONa(定量過量）水解：水解： 2NaOH（過量）（過量）H2SO4Na2SO42H2O 藥物與氫氧化鈉反應(yīng)摩爾比為藥物與氫氧化鈉反應(yīng)摩爾比為1 1 本法消除了酸性雜質(zhì)的干擾，降低了酯鍵水解的干擾本法消除了酸性雜質(zhì)的干擾，降低了酯鍵水解的干擾 53片劑含量測定結(jié)果的計算片劑含量測定結(jié)果的計算 %100%100%/gggg每片含量標示量標示量測得量（ ）平均片重（ ）供試品重（ ）標示量（片）54二、紫外可見分光光度法二、紫外可