1、OLYMPUS IX71倒置顯微鏡操作規(guī)程編寫人：於鋒 時(shí)間20151015一、目的正確使用倒置顯微鏡對細(xì)胞標(biāo)本的形態(tài)特征進(jìn)行觀察，為生命科學(xué)的研究提供更多可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。二、原理倒置顯微鏡系統(tǒng)（IX71系列）是在透鏡成像原理基礎(chǔ)上發(fā)展起來的顯微觀察系統(tǒng)，利用鹵素?zé)魹楣庠矗饩€經(jīng)過聚光鏡匯聚后透過標(biāo)本，通過物鏡對標(biāo)本進(jìn)行聚焦放大成像，最后通過目鏡把物鏡所成的像再次放大，從而使實(shí)驗(yàn)者能夠清晰的分辨體外培養(yǎng)的細(xì)胞的形態(tài)以及內(nèi)部結(jié)構(gòu)，主要用于體外活細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)觀察，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求配置了明場、暗場、相差、熒光等技術(shù)模塊。三、主要操作規(guī)程相差觀察：1.打開主開關(guān)2.轉(zhuǎn)動光路選擇盤到“眼睛”位置。3.裝上觀

2、察樣本。使用10X物鏡，將聚光鏡轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到“BF”位置。4.瞳距調(diào)節(jié)5.屈光度調(diào)節(jié)：通過螺旋目鏡屈光度調(diào)節(jié)環(huán)。6. 通過粗微調(diào)對樣本準(zhǔn)確調(diào)焦。選擇所用物鏡，10X，20X，40X。相差觀察時(shí)轉(zhuǎn)動聚光鏡轉(zhuǎn)盤到“PH”位置。相差只能用10X，20X物鏡觀察和攝影。7. 調(diào)節(jié)光線強(qiáng)度：明場觀察時(shí)，調(diào)節(jié)孔徑光欄。相差觀察時(shí)，打開孔徑光欄8. 觀察。熒光觀察步驟：1. 打開熒光供電裝置開關(guān)，關(guān)掉顯微鏡主開關(guān)。等大約10分鐘后電弧穩(wěn)定。2. 連接UV防護(hù)板3. 把光路選擇轉(zhuǎn)盤和選擇桿轉(zhuǎn)到“眼睛”位置。4. 使相應(yīng)的熒光激發(fā)濾色鏡進(jìn)入光路5. 根據(jù)標(biāo)本不同，選擇U，B，G激發(fā)。6. 打開激發(fā)光光閘使光通過把所

3、用物鏡推入光路10X，20X，40X。7. 把標(biāo)本放在載物臺上，對標(biāo)本進(jìn)行調(diào)焦，如果熒光衰退快，請將激發(fā)光光閘推入光路使用1小時(shí)后關(guān)掉電源開關(guān)。普通明場觀察： 1. 打開明場電源開關(guān)（“”為開，“”為關(guān)） 2. 將樣品置于載物臺上 3. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置 4.從低倍鏡開始觀察，相差環(huán)撥到明場（BF）位置，熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”的位置 5.調(diào)節(jié)透射光光強(qiáng)，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野 6.依次換到高倍鏡，觀察樣品7.拍照時(shí)將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置 關(guān)機(jī)： 1. 關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時(shí)以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時(shí)以后方可再次開啟） 2. 將透射光強(qiáng)調(diào)到最小，透射光選擇按鈕按出3. 關(guān)閉明場電源開關(guān) 4. 將鏡頭轉(zhuǎn)到低倍鏡，取出樣品，若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭 5. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件 6. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動儲存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)） 7. 關(guān)閉電腦，登記使用時(shí)間、熒光數(shù)字等使用情況倒置IX71顯微鏡透射光明場觀察步驟觀察相差時(shí)，要使用與相差物鏡放大倍數(shù)相匹配的相差環(huán)板。相差元件（聚光鏡內(nèi)）PHLPH 1（PH C）PH 2物鏡4倍10倍、20倍40倍、60倍虛線框內(nèi)第一次觀察調(diào)整完成后不需要進(jìn)行調(diào)整