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文檔簡介
1、OLYMPUS IX71倒置顯微鏡操作規(guī)程編寫人:於鋒 時(shí)間20151015一、目的正確使用倒置顯微鏡對細(xì)胞標(biāo)本的形態(tài)特征進(jìn)行觀察,為生命科學(xué)的研究提供更多可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。二、原理倒置顯微鏡系統(tǒng)(IX71系列)是在透鏡成像原理基礎(chǔ)上發(fā)展起來的顯微觀察系統(tǒng),利用鹵素?zé)魹楣庠矗饩€經(jīng)過聚光鏡匯聚后透過標(biāo)本,通過物鏡對標(biāo)本進(jìn)行聚焦放大成像,最后通過目鏡把物鏡所成的像再次放大,從而使實(shí)驗(yàn)者能夠清晰的分辨體外培養(yǎng)的細(xì)胞的形態(tài)以及內(nèi)部結(jié)構(gòu),主要用于體外活細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)觀察,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求配置了明場、暗場、相差、熒光等技術(shù)模塊。三、主要操作規(guī)程相差觀察:1.打開主開關(guān)2.轉(zhuǎn)動光路選擇盤到“眼睛”位置。3.裝上觀
2、察樣本。使用10X物鏡,將聚光鏡轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)到“BF”位置。4.瞳距調(diào)節(jié)5.屈光度調(diào)節(jié):通過螺旋目鏡屈光度調(diào)節(jié)環(huán)。6. 通過粗微調(diào)對樣本準(zhǔn)確調(diào)焦。選擇所用物鏡,10X,20X,40X。相差觀察時(shí)轉(zhuǎn)動聚光鏡轉(zhuǎn)盤到“PH”位置。相差只能用10X,20X物鏡觀察和攝影。7. 調(diào)節(jié)光線強(qiáng)度:明場觀察時(shí),調(diào)節(jié)孔徑光欄。相差觀察時(shí),打開孔徑光欄8. 觀察。熒光觀察步驟:1. 打開熒光供電裝置開關(guān),關(guān)掉顯微鏡主開關(guān)。等大約10分鐘后電弧穩(wěn)定。2. 連接UV防護(hù)板3. 把光路選擇轉(zhuǎn)盤和選擇桿轉(zhuǎn)到“眼睛”位置。4. 使相應(yīng)的熒光激發(fā)濾色鏡進(jìn)入光路5. 根據(jù)標(biāo)本不同,選擇U,B,G激發(fā)。6. 打開激發(fā)光光閘使光通過把所
3、用物鏡推入光路10X,20X,40X。7. 把標(biāo)本放在載物臺上,對標(biāo)本進(jìn)行調(diào)焦,如果熒光衰退快,請將激發(fā)光光閘推入光路使用1小時(shí)后關(guān)掉電源開關(guān)。普通明場觀察: 1. 打開明場電源開關(guān)(“”為開,“”為關(guān)) 2. 將樣品置于載物臺上 3. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置 4.從低倍鏡開始觀察,相差環(huán)撥到明場(BF)位置,熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤撥到“1”的位置 5.調(diào)節(jié)透射光光強(qiáng),調(diào)焦,找到預(yù)觀察視野 6.依次換到高倍鏡,觀察樣品7.拍照時(shí)將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置 關(guān)機(jī): 1. 關(guān)閉汞燈電源(注意:汞燈需使用半小時(shí)以上方可關(guān)閉,關(guān)閉半小時(shí)以后方可再次開啟) 2. 將透射光強(qiáng)調(diào)到最小,透射光選擇按鈕按出3. 關(guān)閉明場電源開關(guān) 4. 將鏡頭轉(zhuǎn)到低倍鏡,取出樣品,若使用過油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭 5. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存,關(guān)閉軟件 6. 使用光盤拷貝數(shù)據(jù)(禁止使用移動儲存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)) 7. 關(guān)閉電腦,登記使用時(shí)間、熒光數(shù)字等使用情況倒置IX71顯微鏡透射光明場觀察步驟觀察相差時(shí),要使用與相差物鏡放大倍數(shù)相匹配的相差環(huán)板。相差元件(聚光鏡內(nèi))PHLPH 1(PH C)PH 2物鏡4倍10倍、20倍40倍、60倍虛線框內(nèi)第一次觀察調(diào)整完成后不需要進(jìn)行調(diào)整
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