1、高中生物實驗方法小結在高中生物實驗教學及探究性課題研究中，常常發現學生因常識欠缺，專業知識薄弱，經典方法、模式思維沒有形成等因素，致使一個實驗從探究、設計、操作到最后的結果分析往往是問題百出。為了規范操作，理清思路，形成模式，以便更好的用實驗解決生物中的相關問題。筆者在從教的過程中對生物實驗設計中的一些方面給予總結，僅供參考：  一化學物質的檢測方法  1、淀粉：碘液 (藍色)。 2、還原性糖：斐林試劑班氏試劑(沸水浴后生成磚紅色沉淀) 。 3、CO2：Ca(OH)2溶液(澄清石灰水變渾濁)。 4、乳酸：pH試紙。 5、O2

2、：余燼復然 ；無O2：火焰熄滅。  6、蛋白質：被蛋白酶水解 、雙縮脲試劑(紫紅色)。 7、脂肪：蘇丹染液 (橘黃色）、蘇丹染液 (紅色）。 8、DNA：二苯胺(沸水浴，藍色)或甲基綠（染色后，呈綠色），也可用DNA酶。 9、RNA：吡羅紅（呈紅色）、苔黑酚乙醇溶液 10、染色體：龍膽紫溶液，醋酸洋紅溶液。 二實驗條件的控制方法 1、隔絕氣體：密封玻璃容器可用石蠟，隔絕空氣與液體可用油膜； 排氣或充氣可依據升溫或冷卻。 2、增加水中氧氣：泵入空氣或吹氣或放入綠色植物；  減少水中氧氣：容器密封或

3、油膜覆蓋或用涼開水。 3、除去容器中CO2：NaOH溶液；增加容器中的CO2：NaHCO3溶液。 4、除去葉中原有淀粉：置于黑暗環境。 5、除去葉中葉綠素：酒精水浴加熱。 6、析出或溶解物質：水溶性根據溶解度，脂溶性可用丙酮或酒精。 7、除去植物光合作用對呼吸作用的干擾：給植株遮光； 8、如何得到單色光：棱鏡色散或透明薄膜濾光。 9、實驗中控制溫度的方法：      、還原糖，DNA鑒定：沸水浴加熱。      、酶促反應：水

4、浴保溫。      、用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱。      、細胞和組織培養以及微生物培養：恒溫箱培養。 、降溫，冷卻；升溫，加熱。 10、維持PH：緩沖溶液（HCO3-/H2CO3，HPO43-/H2PO42-）；降低加酸或生理酸性鹽，升高加堿或生理堿性鹽。 11、血液抗疑：加入檸檬酸鈉（去掉血液中的Ca2+）。 12、線粒體提取：細胞勻漿離心。 13、動物細胞的處理：破裂用清水，細胞的失水用NaCl。注意攪拌。 14、

5、骨無機鹽的除去：鹽酸溶液。 15、滅菌方法：培養基用高壓蒸汽滅菌；接種環用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂冼凈，擦干后用75%酒精消毒；實驗室或接種箱用甲醛蒸汽或紫外燈滅菌；整個過程都在實驗室無菌區或酒精燈旁進行。 16、消除葉片中脫落酸的影響：去除成熟的葉片； 17、消除植株本身的生長素：去掉生長旺盛的器官或組織（芽、生長點）； 18、補充植物激素的方法：涂抹、噴灑、用含植物激素的羊毛脂膏或瓊脂作載體； 19、補充動物激素的方法：口服（飼喂）、注射； 20、阻斷植物激素傳遞：插云母片法。 三實驗結果的顯示方法  

6、;1、有無某物質的存在：有機物根據顏色反應或凝集，無機物根據變色或生成沉淀。 2、光合速度：O2釋放量或CO2吸收量或有機物生成量。       水生植物可依氣泡的產生量或產生速率；       離體葉片若事先沉入水底可依單位時間內上浮的葉片數目；       植物體上的葉片可依指示劑（如碘液）處理后葉片顏色深淺； 水綿可借助顯微鏡下好氧性菌的分布情況。 3、呼吸速度：O2吸收量或CO2

7、釋放量或有機物消耗量。 4、原子或分子轉移途徑：放射性同位素標記法或元素示蹤法。 5、細胞液濃度大小：質壁分離或U型管+半透膜。 6、細胞吸水和吸收離子的關系：可用KNO3溶液質壁分離及其自動復原。 7、植物細胞是否死亡：質壁分離和復原或細胞質的流動。 8、甲狀腺激素：動物耗氧量,發育速度等。 9、生長激素：生長速度(體重、體長變化)。 10、胰島素作用：動物活動狀態（是否出現低血糖癥狀昏迷）。 11、血糖的含量：低血糖癥狀或尿糖是否出現。 12、胰高血糖素作用：尿糖的檢測（在尿液中加班氏試劑進行沸水浴，

8、看是否出現磚紅色沉淀） 13、生長素作用及濃度高低的顯示：可通過去除胚芽鞘后補充生長素后的胚芽生長情況來判斷（彎曲、高度） 14、菌量的多少：菌落數，亞甲基藍褪色程度。 15、菌種：菌落的形態、大小、邊緣、高低、顏色、光澤等。 16、大腸桿菌：伊紅美藍瓊脂培養基。 四、實驗中常用器材和藥品的使用  1、NaOH：用于吸收CO2或改變溶液的pH 2、Ca(OH)2：鑒定CO2 3、CaCl2：提高細菌細胞壁的通透性 4、HCl：解離（15%）或改變溶液的pH 5、NaHCO3：提供CO2、作為酸堿

9、緩沖劑 6、酸堿緩沖劑（Na2CO3/NaHCO3，Na2HPO4/NaH2PO4）：用于調節溶液pH 7、NaCl：配制生理鹽水（09%）或用于提取DNA（014M或2M) 8、瓊脂：激素或其他物質的載體或培養基，用于激素的轉移或培養基 9、酒精：用于消毒(75%)、提純DNA（95%）、葉片脫色、配制解離液（95%的冷酒精）及洗去浮色（50%） 10、蔗糖：配制蔗糖溶液，測定植物細胞液濃度或觀察質壁分離和復原 11、二苯胺：用于DNA的鑒定（沸水浴，藍色） 12、甲基綠：檢測DNA，呈綠色 13、吡羅紅：檢測R

10、NA，呈紅色 14、苔黑酚乙醇溶液：用于RNA的鑒定 15、斐林試劑（甲液01g/mL NaOH、乙液005g/mLCuSO4）/班氏試劑：鑒定可溶性還原性糖（沸水浴，磚紅色沉淀） 16、雙縮脲試劑：用于蛋白質的鑒定（紫色） 17、蘇丹染液(橘黃色）和蘇丹染液(紅色）：用于脂肪鑒定 18、碘液：用于鑒定淀粉（變藍色） 19、龍膽紫溶液或醋酸洋紅：堿性染料，用于染色體染色時，前者呈深藍色，后者呈紅色 20、改良苯酚品紅染液：檢測染色體，紅色 21、健那綠B：檢測線粒體，專一性讓線粒體染色呈藍綠色 22、重鉻

11、酸鉀溶液：檢測酒精，呈灰綠色 23、溴麝香酚藍水溶液：檢測CO2，由藍變綠再變黃 24、吲哚酚試劑：用于維生素C的鑒定 25、伊紅美藍：鑒定有無大腸桿菌的存在 26、亞甲基藍：用于活體染色或檢測污水中的耗氧性細菌（細菌的氧化可使之褪色） 27、pH試紙：檢驗物質的酸堿性，如乳酸 28、卡諾氏固定液：用于細胞有絲分裂根尖的固定 29、解離液（5%鹽酸和95%酒精按1：1的比例配成）：有絲分裂中根尖的分離與固定 30、層析液：用于葉綠素的分離，主要類型：由20份石油醚（在6090下分餾出來的）、2份丙酮和1份苯混合而成

12、；95%的酒精；93號汽油；9份體積分數為95%的酒精和1份苯混合；汽油或四氯化碳加少許無水硫酸鈉。 31、20%新鮮肝臟研磨液：含有H2O2酶，可促進H2O2分解產生O2 32、無土營養液：用于植物無土栽培 33、檸檬酸鈉：血液抗凝劑 34、結晶紫：用于自生固氮菌的分離 35、秋水仙素（C22H25O6N）：用于單倍體育種，作用機理是可抑制植物細胞有絲分裂中紡綞體的形成，可導致細胞內染色體數目加倍。是1937年發現的，是從百合科植物秋水仙的種子和球莖中提取出來的一種植物堿。它是白色或淡黃色的粉末或針狀結晶，有劇毒，使用時應特別注意。 

13、;36、濾紙：過濾或紙層 37、紗布、尼龍布：過濾，遮光 38、云母片：阻止生長素傳遞 39、微電流計：測量神經元受刺激時，神經元細胞內或細胞間的興奮傳遞情況 五、一些常見的實驗方法 1、根據顏色來確定某種物質的存在：    淀粉+I2(藍色)；還原性糖+斐林試劑(磚紅色)； 脂肪+蘇丹(橘黃)或+蘇丹(紅色)；蛋白質+雙縮脲試劑(紫色)；     大腸桿菌+伊紅和美藍(菌落為深紫色，有金屬光澤)。 2、用顏色標記法來確定原腸胚三個胚層的分化情況。

14、0;3、用熒光標記法來證明細胞膜具有一定的流動性。 4、同位素示蹤法：光合作用產生氧氣的來源；光合作用中二氧化碳的去向；     噬菌體侵染細菌實驗證明DNA是遺傳物質，蛋白質不是遺傳物質；      DNA的復制是半保留復制；泌蛋白的形成過程。 5、確定某種元素為植物生長必需的元素的方法:    水培法(完全培養液與缺素完全培養液一次對照，缺素與加進去某元素后二次對照)。 6、獲得無籽果實的方法:    

15、 用適宜濃度的生長素處理花蕾期已去雄的子房，如無籽蕃茄；      誘導染色體變異，如無籽西瓜；用赤霉素處理如無籽葡萄；無性繁殖獲取香蕉。 7、確定某種激素功能的方法：     飼喂法，切除注射法，閹割移植法，切除口服法。 8、確定傳入、傳出神經的功能：      刺激+觀察效應器的反應或測定神經上的電位變化。 9、植物雜交的方法：      雌雄同花：花蕾期去雄+套袋 +開花期人工授粉

16、+套袋；      雌雄異花：花蕾期雌花套袋+開花期人工授粉+套袋。 10、確定某一顯性個體基因型的方法： 測交；該顯性個體自交，水稻可用花粉鑒定法。 11、確定某一性狀為顯性性狀或隱性性狀的方法：      具有一對相對性狀的純合體的雜交，子一代所表現的一個親本形狀及為顯性，      自交，觀察后代是否有性狀分離，若分離原性狀為顯性。 12、確定某一性狀受核基因還是質基因控制：正反交。 13、

17、確定某一性狀基因在常染色體上還是在性染色體上：兩親本雜交的子一代該性狀在雌雄兩性間比例是否相同，若相同為常染色體，否則在性染色體，或用正反交法。 14、確定某一性狀受核基因確定某一個體是否具有抗性基因的方法：    確定小麥是否具有抗銹病基因，用銹病菌去侵染，一段時間后，觀察有無銹斑出現。 15、鑒定血型的方法：用標準血清與待測血型混合，在顯微鏡下觀察血液的凝集情況。 16、育種的方法：雜交育種；人工誘變育種；單倍體育種；基因工程育種；細胞工程育種；多倍體育種等。 17、測定種群密度的方法：樣方法（植物）；標志重捕法（動物）

18、；顯微計數法（微生物）。 18、生態瓶的制作方法：瓶必須透明，且封閉，放置在散射光下，動物耐受性要強。 19、分離微生物的方法：     平板劃線法；用選擇培養基培養(如：圓褐固氮菌的分離，金黃色葡萄球菌的分離，細菌和酵母菌的分離)；液體稀釋法；菌絲尖端切割法。 20、測定微生物群體生長的方法：     測定細菌的數目：顯微計數或染色涂片計數法（紅細胞計數法）。   測定細菌的重量：取一定體積的培養基，經離心分離，反復洗滌后，稱濕重，或烘干后稱干重。 六、

19、實驗研究方法 1、顯微觀察法 ：如觀察植物細胞有絲分裂的實驗，觀察植物細胞質壁分離和復原的實驗，微生物的群體生長。 2、觀察法 ：觀察生物的外在性狀和表現等，如觀察注射了甲狀腺激素的小狗的活動狀況，觀察動物的毛色和植物花色的遺傳實驗等。 3、同位素示蹤法 ：如噬菌體侵染細菌的實驗，用18O和14C追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉移途徑的實驗等。 4、加法創意 ：如用飼喂法研究甲狀腺激素的實驗、用注射法研究生長激素的實驗，用移植法研究性激素的實驗等。 5、減法創意 ：如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素、生長激素的實驗，雌蕊授粉后除去發育著的種

20、子實驗等。 6、雜交實驗法 ：如孟德爾發現遺傳定律的植物雜交、測交的實驗，小麥的雜交實驗等。 7、化學分析法 ：如番茄和水稻對Ca 和Si選擇吸收的實驗，葉綠體中色素的提取和分離實驗等。 8、比色法：利用生物組織中的有些有機物和化學試劑互作能產生顏色反應原理。 9、理論分析法：如大小草履蟲競爭的實驗，植物根向地生長、莖背地生長的實驗，植物向光性的實驗等。 10、模擬實驗法：如滲透作用的實驗裝置，分離定律的模擬實驗等 11、取樣調查法：種群密度的測量，微生物代謝進程的監控。 七、實驗技術 1、光學顯微鏡的使用：包括顯

21、微鏡的取送、放置、旋轉、對光（反光鏡及光圈的使用）、低倍觀察、高倍觀察、鏡頭的擦拭；顯微鏡的放大倍數（是物體的長和寬，不是面積，也不是體積）、焦距問題、物鏡離裝片的遠近、準焦螺旋的使用、顯微鏡使用時物象移動方向、顯微鏡使用時異物的判斷（通常通過移動玻片、轉動轉換器或旋轉目鏡來判斷）。 2、臨時裝片、切片和涂片的制作：適用于顯微鏡觀察，凡需在顯微鏡下觀察的生物材料，必須先制成臨時裝片、切片和涂片，如“觀察植物細胞的質壁分離和復原”中要制作洋蔥表皮細胞的臨時裝片，在“生物組織中脂肪的鑒定”中要制作花生種子的切片，在“觀察動物如人體血液中的細胞”中要制作血液的涂片等等。 3、生物

22、標本的染色技術：把組織浸在染液中，使組織或細胞的某一部分染上與其他部分不同的顏色，產生不同的折射率，使組織或細胞內各部分的構造縣得更清楚，便于用光學顯微鏡觀察。如細胞中染色體的染色。 4、研磨，過濾：適用于從生物組織中提取物質如酶、色素等，要求學生熟練掌握研磨、過濾的方法，如研磨時要先將生物材料切碎，然后加入摩擦劑（常用二氧化硅）、提取液和其它必要物質，充分研磨之后，往往要進行過濾，以除去渣滓，所用過濾器具則根據需要或根據試題中提供的器材加以選用，如可用濾紙、紗布、脫脂棉、尼龍布等。 5、解離技術：植物中用解離液或纖維素和果膠酶用于破壞細胞壁，分散植物細胞，制作臨時裝片，動物中用胰蛋白酶分散細胞。 6、恒溫技術：適用于有酶參加的生化反應，一般用水浴或恒溫箱，根據題目要求選用。 7、層析技術：適用于溶液中物質的分離。主要步驟包括制備濾紙條、劃濾液細線、層析分離等。