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文檔簡介

1、高中生物選修一-DNA粗提取與鑒定一、基礎知識：提取DNA的方法（1 1）蛋白酶：）蛋白酶：水解蛋白質水解蛋白質，不能水解不能水解DNADNA。（2 2）高溫：）高溫：大多數蛋白質不能忍受大多數蛋白質不能忍受60608080的高溫，而的高溫，而DNADNA在在8080以上才會變性以上才會變性。（3 3）洗滌劑：）洗滌劑：瓦解細胞膜（瓦解細胞膜（主要破壞膜主要破壞膜中的蛋白質分子中的蛋白質分子），）， 但對但對DNADNA沒影響。沒影響。2 2、DNADNA對酶、高溫和洗滌劑的對酶、高溫和洗滌劑的耐受性耐受性（1 1）二苯胺：）二苯胺：沸水浴條件下，沸水浴條件下，DNADNA遇二苯胺沸水浴遇二苯

2、胺沸水浴5min5min會染成藍色會染成藍色（2 2）甲基綠：將）甲基綠：將DNADNA染成染成綠色綠色3 3、DNADNA鑒定原理鑒定原理二、實驗設計原則上只要含原則上只要含DNADNA的生物材料都可以，但是的生物材料都可以，但是選選取取DNADNA含量相對較高的生物組織含量相對較高的生物組織，成功率更大。，成功率更大。（一）實驗材料的選取（一）實驗材料的選取 本實驗材料：新鮮本實驗材料：新鮮雞血細胞液雞血細胞液和雞全血相比，和雞全血相比，雞血細胞液中雞血細胞液中DNADNA相對含相對含量高量高，保證實驗能提取到足夠量的，保證實驗能提取到足夠量的DNADNA。二、實驗設計（二）破碎細胞，獲取

3、含（二）破碎細胞，獲取含DNADNA的濾液的濾液 1. 1.動物細胞：動物細胞：加蒸餾水加蒸餾水使細胞吸水脹破使細胞吸水脹破，玻璃棒，玻璃棒攪攪拌可加速細胞膜和核膜破裂拌可加速細胞膜和核膜破裂，過濾后過濾后收集濾液收集濾液 2. 2.植物細胞：植物細胞：切碎切碎后加后加洗滌劑洗滌劑和和食鹽食鹽，然后，然后充分充分攪拌、研磨攪拌、研磨，過濾后收集，過濾后收集濾液濾液；（；（P55P55問題）問題）二、實驗設計（三）去除濾液中的雜質（三）去除濾液中的雜質 方案方案3 3：控制溫度在：控制溫度在60756075 方案方案2 2：濾液中加嫩肉粉（木瓜蛋白酶）：濾液中加嫩肉粉（木瓜蛋白酶） 方案方案1 1：控制：控制NaClNaCl溶液的濃度，反復地溶液的濃度，反復地 溶解與析出溶解與析出DNADNA，去除雜質，去除雜質（四）（四）DNADNA的析出與鑒定的析出與鑒定此課件下載可自行編輯修改，僅供參考！此課

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