1、.題目聚乙二醇 400 檢驗標準操作規程編碼 :共 4頁B.ZL.YJ.FL.02.05第 1頁制定審核批準制定日期審核日期批準日期頒發部門GMP 辦頒發數量5 份生效日期分發單位質管部一目的：制定的聚乙二醇400 檢驗標準操作規程，規范公司聚乙二醇400的檢驗。二適用范圍：適用于聚乙二醇400的檢驗。三責 任 者：質管部、化驗員。四標準依據：中華人民共和國獸藥典2010 年版一部五正文：1 質量標準：見聚乙二醇400質量標準。2 試劑：按試劑配制操作規程配制純化水、稀鹽酸、甲醇、 10%磷鉬酸溶液、氯化鋇試液、氫氧化鈉滴定液、酚酞的吡啶溶液（ 1100）、0.001%乙醛溶液、 50%氯化鎂

2、的無水乙醇混懸液。3 儀器與用具：分光光度儀、電子天平、高效氣相色譜儀、量瓶、試管 、 試管架、玻璃棒、 燒杯、錐形瓶、扁形稱量瓶、烘箱（或干燥器） 、坩堝、移液管、量筒、毛細管、滴定管。4 操作步驟4.1 性狀4.1.1本品為無色或幾乎無色的黏稠液體；略有特臭。4.1.2本品在水或乙醇中易溶，在乙醚中不溶。4.1.3相對密度本品的相對密度為 1.110 1.140。4.1.4 黏度本品的運動黏度，在 40時（毛細管內徑為 0.8mm）應為 3745mm2/s。4.1.5羥值本品的羥值為 264 300。4.2 鑒別4.2.1取本品 0.05g，加稀鹽酸 5ml 和氯化鋇試液 1ml，振搖，濾

3、過；在濾液中加入 10%磷鉬酸溶液 1ml，產生黃綠色沉淀。4.2.2 取本品 0.1g，置試管中，加入硫氰酸鉀和硝酸鈷各0.1g，混合后，加入二氯甲烷 5ml，溶液呈藍色。4.3 檢查4.3.1 平均分子量取本品約 1.2g，精密稱定，置干燥的250ml 具塞錐形瓶中，精密加鄰苯二甲酸酐的吡啶溶液 （取鄰苯二甲酸酐14g，溶于無水吡啶 100ml 中，放置過夜，備用） 25ml，搖勻，置沸水浴中，加熱3060 分鐘，取出冷卻，精密加入氫氧化鈉滴定液（ 0.5mol/L ） 50ml，以酚酞的吡啶溶液（ 1100）為指示劑，用氫氧化鈉滴定液（ 0.5mol/L ）滴定至顯紅色，并將滴定的結果用

4、空白試驗校正。供試量（ g）與 4000 的乘積，除以消耗氫氧化鈉滴定液（ 0.5mol/L ）的容積（ ml ），即得供試品的平均分子量，應為 380 420。.題目聚乙二醇 400 檢驗標準操作規程編碼 :共 4頁B.ZL.BZ.FL.02.005第 2頁計算公式：V× F× T×稀釋倍數%=× 100%m 取樣式中： F 為摩爾濃度換算因子V 為供試品所消耗滴定液體積T 為滴定度4.2.2 酸度取本品 1.0g，加水 20ml 溶解后，依法測定， pH 值應為 4.07.0。溶液的澄清度與顏色 取本品 5.0g，加水 50ml 溶解后，溶液應澄清無

5、色；如顯渾濁，與 2 號濁度標準液比較， 不得更濃；如顯色，與黃色 2 號標準比色液比較，不得更深。4.2.3 乙二醇與二甘醇取乙二醇與二甘醇各50mg，置 100ml 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為對照溶液；另取本品4.0g，置 10ml 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取上述溶液，照氣相色譜法，以硅藻土為載體，山梨醇為固定相，在柱溫160測定。含乙二醇與二甘醇均不得過0.25% （ g/g）。4.2.4 環氧乙烷與二氧六環取本品 1g，精密稱定，置頂空瓶中， 精密加入超純水 1.0ml，密封，搖勻，作為供試品溶液。量取環氧乙烷 300l（相當于 0.25g 環氧乙烷），置

6、含 50ml 經過處理的聚乙二醇 400（以 60，1.52.5kPa 旋轉蒸發 6小時，除去揮發性成分）的 100ml 量瓶中，加入相同溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為環氧乙烷對照品貯備液。精密稱取 1g 冷的環氧乙烷對照品貯備液，置含 40ml 經過處理的聚乙二醇 400 的 50ml 量瓶中，加相同溶劑稀釋至刻度。 精密稱取 10g，置含 30ml 水的 50ml 量瓶中，加水稀釋至刻度。精密量取 10ml，置 50ml 量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，作為環氧乙烷對照品溶液。 取二氧六環適量，精密稱定，用水制成每 1ml 中含 0.1mg 的溶液，作為二氧六環對照品溶液。精密稱取本品1g，置頂

7、空瓶中，精密加入0.5ml 環氧乙烷對照品溶液及0.5ml 二氧六環對照品溶液，密封，搖勻，作為對照品溶液。量取 0.5ml 環氧乙烷對照品溶液置頂空瓶中，加入新鮮配制的 0.001%乙醛溶液 0.1ml 及二氧六環對照品溶液 0.1ml，密封，搖勻，作為系統適用性試驗溶液。 照氣相色譜法試驗。 以聚二甲基硅氧烷為固定液，起始溫度為 35，維持 5 分鐘，以每分鐘 5的速率升溫至 180，然后以每分鐘 30的速率升溫至 230，維持 5 分鐘（可根據具體情況調整） 。進樣口溫度為 150，檢測器溫度為 250。頂空瓶平衡溫度為 70，平衡時間為 45 分鐘。取系統適用性試驗溶液頂空進樣， 調節

8、檢測靈敏度使環氧乙烷峰和乙醛峰的峰高約為滿量程的 15%，乙醛峰和環氧乙烷峰之間的分離度不小于 2.0，二氧六環峰高應為基線噪音的 5 倍以上。分別取供試品溶液及對照品溶液頂空進樣，重復進樣至少 3 次。環氧乙烷峰面積的相對標準偏差應不得過 15%，二氧六環峰面積的相對標準偏差應不得過10% 。按標準加入法計算，環氧乙烷不得過0.0001%，二氧六環不得過0.001%。.題目聚乙二醇 400 檢驗標準操作規程編碼 :共 4頁B.ZL.BZ.FL.02.005第 3頁計算公式：含量（ CX）=AX MRCRAR MX（1-B）式中： CX 為供試品的含量R 為對照品的含量CAX 為供試品的峰面積

9、或峰高A R 為對照品的峰面積或峰高M R 為對照品的質量M X 為供試品的質量B 為供試品的水份4.2.5 環氧乙烷對照品貯備液的標定取 50%氯化鎂的無水乙醇混懸液 10ml精密加入 20ml 乙醇制鹽酸滴定液（ 0.1mol/L ）混勻，放置過夜。取 5g 環氧乙烷對照品貯備液，精密稱定，置上述溶液中，放置 30 分鐘，照電位滴定法，用乙醇制氫氧化鉀滴定液（ 0.1mol/L ）滴定，并將滴定的結果用空白試驗校正，每 1ml 乙醇制氫氧化鉀滴定液相當于 4.404mg 的環氧乙烷，計算，即得。計算公式：V× F× T×稀釋倍數%=× 100%m 取

10、樣式中： F 為摩爾濃度換算因子V 為供試品所消耗滴定液體積T 為滴定度4.2.6 甲醛取本品 1g，精密稱定，加入0.6%變色酸鈉溶液 0.25ml，在冰水中冷卻后，加硫酸 5ml，搖勻，靜置 15 分鐘，緩緩定量轉移至盛有10ml 水的 25ml量瓶中，放冷，緩緩加水至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取甲醛 0.86g，精密稱定，置 100ml 量瓶中，加水稀釋至刻度，精密量取 1ml，加水定量稀釋至100ml；精密量取 1ml，自 “加 0.6%變色酸鈉溶液 0.25ml ”起，同法操作，作為對照溶液。取上述兩種溶液，照紫外可見分光光度法，在567nm 波長處測定吸光度，并用同法操作的空白

11、溶液進行校正。 供試品溶液的吸光度不得大于對照溶液的吸光度（ 0.003%）。4.2.7水分取本品 2.0g，照水分測定法測定，含水分不得過 2.0%。熾灼殘渣不得過 0.2%。4.2.8重金屬取本品 4.0g，加鹽酸溶液（ 9 1000）5ml 與水適量，溶解后，用稀醋酸或氨試液調節 pH 值至 3.04.0，再加水稀釋至 25ml，依法檢查，含重金屬不得過百萬分之五。4.2.9 砷鹽 取本品 0.67g，置凱氏燒瓶中，加硫酸 5ml，用小火消化使炭化，控制溫度不超過 120（必要時可添加硫酸，總量不超過 10ml），小心逐滴加入濃過氧化氫溶液，俟反應停止，繼續加熱，并滴加濃過氧化氫溶液至溶液無色，冷.題目聚乙二醇 400 檢驗標準操作規