1、實驗二十 水中微量鐵的測定鄰菲啰啉分光光度法 一、實驗目的1. 學習如何選擇吸光光度分析的實驗條件； 2. 掌握用吸光光度法測定鐵的原理及方法； 3. 掌握分光光度計和吸量管的使用方法。 二、實驗原理鐵的吸光光度法所用的顯色劑較多，有鄰二氮菲（又稱鄰菲啰啉，菲繞林）及其衍生物、磺基水楊酸、硫氰酸鹽、5BrPADAP等。其中鄰二氮菲分光光度法的靈敏度高，穩定性好，干擾容易消除，因而是目前普遍采用的一種方法。 在pH為29的溶液中，Fe2與鄰二氮菲（Phen）生成穩定的橘紅色絡合物 Fe（Phen）32： 其中lg321.3，摩爾吸光系數5081.1104 Lmol-1cm-1。當鐵為3價時，可用

2、鹽酸羥胺還原： Cu2、Co2、Ni2、Cd2、Hg2、Mn2、Zn2+等離子也能與Phen生成穩定絡合物，在少量情況下，不影響Fe2的測定，量大時可用EDTA隱蔽或預先分離。 吸光光度法的實驗條件，如測量波長，溶液酸度、顯色劑用量、顯色時間、溫度、溶劑以及共存離子干擾及其消除等，都是通過實驗來確定的。本實驗在測定試樣中鐵含量之前，先做部分條件試驗，以便初學者掌握確定實驗條件的方法。 條件試驗的簡單方法是：變動某實驗條件，固定其余條件，測得一系列吸光度值，繪制吸光度某實驗條件的曲線，根據曲線確定某實驗條件的適宜值或適宜范圍。 三、儀器與藥品1. 分光光度計，pH計，50mL容量瓶8個（或比色管

3、8支） 2. 100 gmL-1鐵標準溶液：準確稱取0.8634 g 分析純 NH4Fe（SO4）212H2O于200mL燒杯中，加入20mL 6molL-1 HCl溶液和少量水，溶解后轉移至1L容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻。 3. 鄰二氮菲 1.5 gL-1。（新配制）； 4. 鹽酸羥胺 100 gL-1（用時配制）。 5. NaAc 1molL-1。 6. NaOH 1 molL-1。 7. HCl 6 molL-1。 四、實驗步驟1. 條件試驗 1. 鐵含量的測定 標準曲線的制作 用移液管吸取10mL 100gmL-1 鐵標準溶液于100mL容量瓶中，加入2mL 6molmL-1 HCl溶

4、液，用水稀釋至刻度，搖勻。此溶液Fe3的濃度為10gmL-1 。 在6個50mL容量瓶（或比色管）中，用吸量管分別加入0.00mL，2.00mL，4.00mL，6.00mL，8.00mL，10.00mL 10gmL-1 鐵標準溶液，均加入1mL鹽酸羥胺，搖勻。再加入2mL Phen，5mLNaAc溶液，搖勻。用水稀釋至刻度，搖勻后放置10min。用1cm比色皿，以試劑空白（即0.00mL鐵標準溶液）為參比溶液，在所選擇的波長下，測量各溶液的吸光度。以含鐵量為橫坐標，吸光度A為縱坐標，繪制標準曲線。 由繪制的標準曲線，重新查出某一適中鐵濃度相應的吸光度，計算Fe2pHen絡合物的摩爾吸光系數。

5、試樣中鐵含量的測定 準確吸取適量試液于50mL容量瓶（或比色管）中，按標準曲線的制作步驟，加入各種試劑，測量吸光度。從標準曲線上查出和計算試液中鐵的含量（單位為gmL-1）。 注意：、兩項的溶液配制和吸光度測定宜同時進行 五、數據記錄與處理1. 記錄： 比色皿 光源電壓 2. 繪制曲線： 吸收曲線； A-t曲線； A-c曲線； 標準曲線。 3. 對各項測定結果進行分析并作出結論：例如從吸收曲線可得出：鄰二氮雜菲亞鐵絡合物在波長510nm 處吸光度最大，因此測定鐵時宜選用的波長為510nm 等等。 吸收曲線的測繪： 鄰二氮雜菲-亞鐵鉻合物的穩定性： 顯色劑濃度的試驗： 標準曲線的測繪與鐵含量的測定： 六、實驗討論與思考1. 鄰二氮雜菲分光光度法測定鐵的適宜條件是什么？ 2. Fe3+離子標準溶液在顯色前加鹽酸羥胺的目的是什么？如測定一般鐵鹽的總鐵量，是否需要加鹽酸羥胺？ 3. 如用配制已久的鹽酸羥胺溶液，對分析結果將帶來什么影響？ 4. 怎樣選擇本實驗 中各種測定的參比溶液？ 5. 在本實驗 的各項測定中，加入某種試劑的體積要比較準確，