1、(時間：90分鐘；滿分：100分)一、選擇題(本題共20小題，滿分50分)1破譯生物基因組DNA的遺傳信息進行基因操作時，首先要提取細胞核DNA。下列不適宜作為提取DNA的實驗材料的是()A雞血細胞B蛙的紅細胞C人的成熟紅細胞 D菜花解析：選C。DNA主要分布于真核細胞的細胞核中，而人的成熟紅細胞中無細胞核，故無DNA，因而不能用人的成熟紅細胞作為提取DNA的實驗材料。2在下列圖示中，可以正確反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關系的是()解析： mol/L時，隨著其濃度的升高或降低，DNA的溶解度都會逐漸增大。3蛋白酶能將蛋白質水解而使染色質中的DNA分離出來，下列藥品可達到上述同一目的的

2、是()A蒸餾水 BNaCl溶液CNaOH溶液 D鹽酸答案：B4在“DNA的粗提取與鑒定”實驗中，有兩次DNA沉淀析出： mol/L溶解度最低；DNA在冷卻的體積分數為95的酒精中能夠沉淀析出。該實驗依據的原理是()A兩次都是 B兩次都是C第一次是，第二次是 D第一次是，第二次是解析： mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低，而高于或低于這一濃度，DNA在NaCl溶液中的溶解度都會增大；DNA不溶于酒精溶液，但是，細胞中的某些蛋白質則溶于酒精，這樣DNA就可以沉淀析出。5在研究DNA的基因樣本前，采集來的血樣需要蛋白水解酶處理，然后用有機溶劑除去蛋白質。用蛋白水解酶處理血樣的目的是()A除去血漿

3、中的蛋白質B除去染色體上的蛋白質C除去血細胞表面的蛋白質D除去血細胞中的所有的蛋白質，使DNA釋放，便于進一步提純解析：選D。蛋白水解酶簡稱蛋白酶，能夠催化多肽或蛋白質水解，所以這種酶可以分解血細胞中的所有蛋白質，有利于DNA的釋放。6將含有DNA的濾液放在6070 的恒溫水浴箱中保溫1015 min，可以得到含雜質較少的DNA，這一做法所依據的原理是()A高溫使蛋白質變性B高溫使DNA變性C高溫使蛋白質分解D高溫使DNA分解解析：選A。大多數蛋白質不能忍受6080 的高溫，而DNA在80 以上才會發生變性。在6070 的恒溫水浴箱中保溫，目的是使蛋白質發生變性，從而分離得到DNA。7在DNA

4、的粗提取實驗過程中，對DNA提取量影響較小的是()A使雞血細胞在蒸餾水中充分破裂，放出DNA等核物質B攪拌時要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動C在析出DNA黏稠物時，要緩緩加入蒸餾水，直到黏稠物不再增多D要用冷酒精沉淀DNA，甚至再將混合液放入冰箱中冷卻解析：選B。本題考查DNA的粗提取與鑒定的有關知識，同時考查學生對DNA提取原理的理解。攪拌時要用玻璃棒沿一個方向輕緩攪動的目的是防止DNA的細絲被打碎，但是打碎的DNA分子并不影響提取的DNA的含量；如果雞血細胞破裂不充分，DNA等核物質釋放不充分，DNA的提取量會減少；在析出DNA黏稠物時，加入蒸餾水的量不足，會使DNA不能充分析出，而如若加入蒸

5、餾水的量過多，析出的DNA又會溶解，DNA的提取量也會減少；用冷酒精沉淀DNA甚至將混合液放入冰箱冷卻的目的是抑制DNA水解酶活性，防止DNA降解，如果酒精冷卻不充分，DNA析出量減少，DNA的提取量也會減少。此類題目的解題方法是理解實驗各個環節或操作的目的，突破的方法是將各個環節進行比較分析，找出其中的相互關系。8如圖表示PCR擴增的產物，請分析它是哪次循環的產物()A第一次循環 B第二次循環C第三次循環 D第四次循環解析：選A。在PCR反應中以引物為標記，第一次循環時，以加入的DNA為模板，兩條DNA鏈可分別由引物和引物與其結合，并在DNA聚合酶的作用下延伸，所以，形成的每個子代DNA中只

6、有一種引物。從第二次循環開始，第一次產物的DNA分子又可作為模板參與反應，形成的DNA分子兩端都含有引物。9PCR儀實質上是一臺自動調控溫度的儀器，下列關于它調控不同溫度的目的敘述錯誤的是()A95 ，使DNA分子變性，解開螺旋B55 ，使DNA分子兩條單鏈與兩種引物結合C72 ，使DNA分子開始復制，延伸D72 ，使DNA分子恢復雙螺旋結構，恢復活性解析：選D。PCR利用DNA熱變性的原理，當溫度上升到90 以上時，雙鏈DNA解旋為單鏈，A項正確；當溫度下降到50 左右時，兩種引物通過堿基互補配對原則與兩條單鏈DNA結合，恢復活性，B項正確；當溫度上升到72 左右時，在DNA聚合酶的作用下，

7、根據堿基互補配對原則合成新的DNA鏈，從而實現DNA延伸，故C正確，D錯誤。10下列關于DNA復制的敘述，不正確的是(多選)()ADNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從5端延伸DNA鏈BDNA復制不需要引物C引物與DNA母鏈通過堿基互補配對進行結合DDNA的合成方向總是從子鏈的3端向5端延伸解析：選ABD。只認為B錯誤的原因是沒有理解DNA復制過程以及DNA聚合酶的作用特點。DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從引物的3端延伸DNA鏈。由于模板鏈首先復制的是3端，即復制方向35，而DNA分子是反向平行的，子鏈是依據堿基互補配對原則，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向從子鏈的53。1

8、1在pH，哪種蛋白質既不向正極移動也不向負極移動 ()A血紅蛋白：pI(等電點)B魚精蛋白：pIC1球蛋白：pID球蛋白：pI解析：選D。球蛋白在pH5.12時不帶電，在電泳時既不向正極移動也不向負極移動。12洗滌紅細胞時，離心所采用的方法是()A低速長時間離心 B低速短時間離心C高速長時間離心 D高速短時間離心解析：選B。高速或長時間離心，會導致白細胞和淋巴細胞一同沉淀，得不到純凈的紅細胞，進而影響后面血紅蛋白的提取純度。13將豬的紅細胞分別放在9的NaCl溶液和蒸餾水中，表現出的現象分別是()A都發生質壁分離 B無變化、漲破C無變化、無變化 D皺縮、漲破解析：選D。動物細胞由于沒有細胞壁，

9、不會發生質壁分離。9的NaCl溶液濃度已很高，紅細胞會失水皺縮，在蒸餾水中則會吸水漲破。14將處理破裂后的紅細胞混合液以2000 r/min的速度離心10 min后，離心管中的溶液分為四層，從上到下的順序依次是()A血紅蛋白、甲苯層、脂質物質層、細胞破碎物沉淀層B甲苯層、細胞破碎物沉淀層、血紅蛋白、脂質物質層C脂質物質層、血紅蛋白、甲苯層、細胞破碎物沉淀層D甲苯層、脂質物質層、血紅蛋白、細胞破碎物沉淀層解析：選D。混合液經離心后按密度大小排列，在離心管中從上到下的順序依次是：第1層為無色透明的甲苯層，第2層白色薄層固體是脂溶性物質沉淀層，第3層紅色透明液體是血紅蛋白水溶液，第4層暗紅色沉淀物主

10、要是紅細胞破碎物沉淀。15人們用雞的紅細胞提取DNA不用人的紅細胞提取血紅蛋白的原因是()A雞的紅細胞無血紅蛋白，人的紅細胞有血紅蛋白B雞的紅細胞有線粒體，人的紅細胞無線粒體C雞的紅細胞有細胞核，人的紅細胞無細胞核D雞的紅細胞有氧呼吸，人的紅細胞無氧呼吸 解析：選C。雞(鳥類)的紅細胞具有完整的細胞核，含有核DNA，便于進行DNA的提取；人的成熟紅細胞無細胞核，結構簡單，血紅蛋白含量豐富，便于提取血紅蛋白。16在提取血紅蛋白的樣品處理階段，洗滌紅細胞十分重要，其目的是()A讓紅細胞破裂，釋放血紅蛋白B洗去血漿蛋白C防止血液凝固D保證紅細胞的正常形態解析：選B。本題考查血紅蛋白的分離中樣品處理的

11、原理。血液中含有多種蛋白質，除紅細胞內的血紅蛋白，血漿中還含有多種蛋白質，這些蛋白質在血紅蛋白釋放出后會與其混合，需要在紅細胞破裂前將其除去。17凝膠色譜法操作正確的是()A將橡皮塞上部用刀切出鍋底狀的凹穴B將橡皮塞下部切出凹穴C插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D將尼龍剪成與橡皮塞下部一樣大小的圓片解析：選A。凝膠色譜柱制作時，首先選擇合適封堵玻璃管口的橡皮塞，將橡皮塞上部用刀切出鍋底狀的凹穴；插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面；把尼龍剪成與橡皮塞上部一樣大小的圓片。18在實驗室中，做PCR通常使用的微量離心管是一種薄壁塑料管，此過程可以使用玻璃離心管嗎？為什么()A可以，玻璃

12、離心管、塑料微量離心管都可以使用B不可以，玻璃離心管易碎，使用不安全C不可以，玻璃離心管一般較大，不適合作為微量離心管D不可以，玻璃離心管容易吸附DNA解析：選D。本題考查多聚酶鏈式反應擴增DNA片段的有關知識。DNA親和玻璃，在進行DNA操作時應用塑料器皿。19某考古學家在西伯利亞泰加林地區的冰中，發現了一種冰凍的已滅絕的巨型動物的肌肉，他想了解該巨型動物的DNA與現今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下檢測工作，其中正確的操作步驟及順序是()降低溫度，檢測處理后的雜合DNA雙鏈通過PCR技術擴增巨型動物和大象的DNA把巨型動物的DNA導入大象的細胞中在一定溫度條件下，將巨型動物和大象的D

13、NA水浴共熱A BC D答案：D20下面說法不正確的是()A在一定范圍內，緩沖溶液能夠抵制外界的酸和堿對溶液pH的影響，維持pH基本不變B緩沖溶液通常由12種緩沖劑溶解于水中配制而成C電泳是指帶電粒子在電場的作用下發生遷移的過程D透析袋能使大分子自由進出，而將小分子保留在袋內解析：選D。透析袋一般是用硝酸纖維素制成的。透析袋能使小分子自由進出，而將大分子保留在袋內。透析可以除去樣品中相對分子質量較小的雜質，或用于更換樣品的緩沖液。二、非選擇題(本題共4小題，滿分50分)21(12分)回答下列有關“DNA的粗提取和鑒定”實驗的問題。(1)下列有關“DNA的粗提取和鑒定”實驗原理的敘述，正確的是(

14、)ADNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液濃度的降低而減小B利用DNA不溶于酒精的性質，可除去細胞中溶于酒精的物質而得到較純凈的DNACDNA是大分子有機物，不溶于水而溶于某些有機溶劑D在沸水中，DNA遇二苯胺會出現紫色反應(2)如下圖為該實驗過程中的一些重要操作示意圖。正確的操作順序是_。上圖C、E步驟都加入蒸餾水，但其目的不同，分別是_和_。圖A步驟中所用酒精必須是經過_才能使用，該步驟的目的是_。(3)為鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可滴加_試劑，沸水浴，如果出現_，則該絲狀物的主要成分為DNA。答案：(1)B(2)CBEDA加速血細胞的破裂降低NaCl溶液的濃度，使D

15、NA析出充分預冷提取含雜質較少(或較純凈)的DNA(3)二苯胺藍色22(12分)近20年來，PCR技術(多聚酶鏈式反應)成為分子生物學實驗室的一種常規實驗手段，其原理是利用DNA半保留復制，在試管中進行DNA的人工復制(如圖)，在短時間內，將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍，從而使實驗室所需要的遺傳物質不再受限于活的生物體。(1)加熱使DNA雙鏈間的_鍵完全打開，稱為_；而在細胞中是在_酶的作用下進行的。(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個特定區段，應該加入_種特定的引物。當溫度降低至55 時，引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的_端連接脫氧核苷酸

16、，兩條子鏈的延伸方向都是_。(3)PCR技術的必需條件，除了模板、原料、酶之外，至少還有三個條件，即液體環境、適宜的_和_，前者由_自動調控，后者則靠_來維持。(4)通過PCR技術使DNA分子大量復制，如果將一個用15N標記的DNA分子放入試管中，以14N標記的脫氧核苷酸為原料，連續復制四次之后，則15N標記的DNA分子占全部DNA分子總數的比例是_。解析：(1)PCR技術利用熱變性原理使DNA雙鏈之間的氫鍵斷裂，稱為解旋，而在細胞內是在解旋酶的作用下使氫鍵斷裂。(2)PCR分為三個基本反應步驟：變性(95 )、復性(55 )、延伸(72 )，其特異性依賴于與靶序列互補的引物，引物是兩段與待擴

17、增DNA序列互補的片段，兩引物之間的距離決定擴增片段的長度。由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從引物的3端延伸DNA鏈，則DNA的合成方向總是從子鏈的5端向3端延伸。(3)PCR技術與細胞內的DNA復制不完全相同，除了需要模板、原料、酶以外，至少還需要液體環境(穩定的緩沖溶液)，每一個步驟需要適宜的溫度和酸堿度等。(4)一個DNA分子連續復制四次之后，形成16個DNA分子，15N標記的DNA分子有2個，則15N標記的DNA分子占全部DNA分子總數的比例為1/8。答案：(1)氫解旋解旋(2)兩3從子鏈的5端向3端延伸(3)溫度酸堿度PCR儀緩沖液(4)1/823(12分)商品化植酸酶主

18、要來自微生物，首先篩選出產酶的菌株，然后制備植酸酶，請根據下面的流程圖回答問題：(1)中的主要成分有哪些？_；中包含哪些成分？_。(2)請寫出一種純化得到植酸酶的方法：_；其依據是_。解析：本題考查蛋白質粗提取和分離的方法。植酸酶是蛋白質，屬于大分子有機物，含酶的發酵液經過透析后，能夠除去小分子雜質，這樣就能夠得到植酸酶。對于粗提取的植酸酶可以用凝膠色譜法進行提純，由于蛋白質帶有電荷，亦可用電泳法進行純化。答案：(1)小分子雜質含植酸酶等多種蛋白質(2)凝膠色譜法根據蛋白質之間分子大小、吸附性質等差異進行純化(或電泳法根據蛋白質之間電荷、分子大小等差異進行純化)24(14分)某生物興趣小組開展

19、DNA粗提取的相關探究活動。具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份，每份10 g。剪碎后分成兩組，一組置于20 ，另一組置于20 條件下保存24 h。DNA粗提取：第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入15 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。第二步：先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液，再加入20 mL體積分數為95的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步：取6支試管，分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑，混合均勻后，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液顏色的深淺，結果如表：材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20 20