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文檔簡介
1、精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點1.2. 常用臨床生化項目的分類1.2.1. 按化學性質分類大致分為四類:酶類.底物代謝類.無機離子類.特種蛋白類;1.2.1.1. 酶類包括 alt (谷丙轉氨酶) ,ast(谷草轉氨酶) ,alp(堿性磷酸酶) ,acp(酸性磷酸酶) , r-gt (谷氨酰轉移酶),-hbdh ( 羥丁酸脫氫酶),ldh (乳酸脫氫酶),ck (肌酸激酶), ck-mb (肌酸激酶同功酶),-amy (淀粉酶),che(膽堿脂酶)等;1.2.1.2. 底物代謝類包括 tg(甘油三脂),tc(總膽固醇),hdl-c (高密度脂蛋白膽固醇),ldl-c (低
2、密度脂蛋白膽固醇),ua (尿酸), urea (尿素氮), cr(肌酐), glu (葡萄糖), tp(總蛋白) ,alb(白蛋白) ,t-bil ( 總膽紅素) ,d-bil ( 直接膽紅素) ,tba(總膽汁酸) ,co2(二氧化碳)等;1.2.1.3. 無機離子類包括 ca(鈣), p(磷), mg (鎂), cl (氯), fe(鐵)等;1.2.1.4. 特種蛋白類apoa1(載脂蛋白a1 ), apob(載脂蛋白b), lpa (脂蛋白a);補體 c3,補體 c4;免疫球蛋白iga .igg .igm 等;1.2.2. 按臨床性質分類無機離子:包括ca, p,mg , cl 等;肝
3、功能:包括alt ,ast , r-gt , alp , mso , t-bil ,d-bil , tba ,tp,alb 等;腎功能: ua , urea , cr 等;心肌酶譜: ck , ck-mb , ldh , -hbdh , ast , mso 等;糖尿病: glu 等;前列腺疾病: acp ,p-acp 等; 胰腺炎: -amy ;血脂: tc, tg,hdl-c , ldl-c ,apoa1 , apob, lpa ; 痛風: ua ;中毒: che;免疫性疾病: c3 ,c4, igg, iga , igm ;急性炎癥反應:crp (c 反應蛋白), aag (a1 酸性糖蛋
4、白),cer(銅藍蛋白),aso(抗鏈球菌溶血素o);1.3. 常用臨床項目的醫學打算水平醫學打算水平( medicine decide level ,mdl )為指不同于參考值的另一些限值,通過觀看測定值為否高于或低于這些限值,可在疾病診斷中起排除或確認的作用,或對某些疾病進行分級或分類, 或對預后做出估量,以提示醫師在臨床上應實行何種處理方式,如進一步進行某一方面的檢查,或打算實行某種治療措施等等;醫學打算水平與參考值的根本區分在于:它不僅對健康人的數值進行爭論,以打算健康人的數值區間,同時仍對有關疾病的不同病情的數據進行爭論,以定出不同的打算性限值;可提示及引導醫師實行不同的臨床措施;
5、所醫學打算水平看來更合理. 更客觀. 更有助于臨床的應用; 當然, 真正建立起每一項試驗的醫學打算水平為一個特別復雜的問題, 存在著很多的實際困難;以下為一些常用檢驗項目的醫學打算水平,僅供參考;1.3.1. 鉀精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點參考值3.55.3mmol/l3.0 mmol/l此值低于參考范疇下限,如測定值低于此值,可能會顯現虛弱.地高辛中毒和(或)心律失常,應予以合適的治療5.8 mmol/l此值高于參考范疇上限;第一應排除試管內溶血造成的高鉀;如測定值高于此值,應借助其他試驗查找高鉀緣由,并考慮為否有腎小球疾病;7.5 mmol/l高于此值的
6、任何鉀濃度都與心律失常有關,故必需賜予合適治療;(第一也應排除試管內溶血造成的高鉀)1.3.2. 鈉參考值135-145mmol/l打算水平臨床意義及措施115mmol/l等于或低于此水平可發生精神錯亂.疲憊.頭疼惡心.嘔吐和厭食,在110mmol/l 時,病人極易發生抽搐.半昏迷和昏迷,故在測定值降至115mmol/l 時,應盡快確定其嚴峻程度,并準時進行治療;133mmol/l此值稍低于參考范疇下限,測定值低于此值時,應考慮多種可能引起低鈉的緣由,并加作幫助試驗,如血清滲透壓.鉀濃度及尿液檢查等;150mmol/l此值高于參考范疇上限,應仔細考慮多種可能引起高鈉的緣由;1.3.3. 氯化物
7、參考值96110mmol/l打算水平臨床意義及措施90mmol/l低于此水平,應考慮低氯血癥的多種緣由;120mmol/l高于此水平,應考慮多種高氯血癥的緣由,并同時可作多種幫助診斷試驗如血清 na.k .ca.hct 等;1.3.4. 鈣參考值2.25 2.65mmol/l打算水平臨床意義及措施1.75mmol/l血鈣濃度低于此值,可引起手足抽搐,肌強直等嚴峻情形,故應依據白蛋白濃度情形,立刻實行治療措施2.74mmol/l當測定值大于此值時,應準時確定引起血鈣上升的緣由,其中的一個緣由為甲狀旁腺機能亢進,所以要作其他試驗,予以證明或排除;3.37mmol/l血鈣濃度超過此值,可引起中毒而顯
8、現高血鈣性昏迷,故應準時實行有力的治療措施;1.3.5. 離子鈣參考值1.13 1.32mmol/l打算水平臨床意義及措施0.37mmol/l離子鈣水平低于此值,常顯現腕掌痙攣.手足抽搐.低血壓.心律失常等癥狀,最終可致心臟停止跳動,必需立刻實行合適的治療措施;3.3mmol/l測定值在此水平,將導致嚴峻的和連續的心律功能不良,以及血液動力的不穩固;1.3.6. 磷參考值0.96 1.62mmol/l打算水平臨床意義及措施0.48mmol/l等于及低于此值,往往與溶血性貧血有關,應考慮多種治療方法進行治療;0.81mmol/l此值在參考范疇下限以下,低于此值且有高血鈣情形時,支持甲狀旁腺機能亢
9、進的診斷;精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點1.62mmol/l此值為參考范疇上限,高于此值應考慮無機磷可能上升的多種緣由,特殊應考慮為否有腎功能不全;1.3.7. 鎂參考值0.61.2mmol/l打算水平臨床意義及措施0.60mmol/l等于或低于此水平常,常有虛弱.易怒.痙攣.震顫等癥狀,如有上述臨床癥狀并伴有血清鎂癥降,就應賜予適當的治療;1.00mmol/l此值在參考范疇以內,假如低鎂被認為為臨床癥狀的起因,就測定值高于此值時,應被排除,而應考慮其他病因;2.5mmol/l等于或高于此值,已超過參考范疇上限,應賜予必要治療,另外,仍應檢查為否存在腎功能不全
10、;1.3.8. 鐵參考值9.030.0umol/l打算水平臨床意義及措施8.0umol/l等于或低于此水平,多與缺鐵性貧血有關,但作此診斷前, 仍需證明rbc 為小細胞低血色素性且伴有總鐵結合力(tibc )的上升;假如tibc 上升不明顯, 就血清轉鐵蛋白降低也有利于此種診斷;39.4umol/l等于或高于此水平,可涉及多種疾病,如血色素冷靜病,由海洋性貧血,vb6 缺乏性貧血等造成紅細胞生成削減.溶血性貧血. 急性肝損耗等; 因此應作多種相應的試驗 以求確診,并進行治療;71.6umol/l由于攝入量過多, 造成血中水公平于或超過此值時,必需實行合適的治療措施;1.3.9. 葡萄糖參考值3
11、.61 6.11mmol/l打算水平臨床意義及措施2.8mmol/l禁食后 12 小時血糖測定值低于此值,就為低血糖癥,可顯現焦慮.出汗.顫抖和虛弱等癥狀,如反應發生較慢,且以易怒.嗜睡.頭痛為主要癥狀,就應作其他試驗,以查找緣由;7mmol/l空腹血糖達到或超過此值,可考慮糖尿病的診斷,但應加作糖耐量試驗;10mmol/l飯后 1 小時測得此值或高于此值,就可高度懷疑為糖尿病;1.3.10. 血尿素( urea) 參考值3.67.1mmol/l打算水平臨床意義及措施3.0mmol/l低于此值常見于血液釋放過多或肝功能不全7.1mmol/l此值為正常上限,高于此值應考慮能引起尿素上升的多種可能
12、緣由,如腎功能不全.高蛋白飲食及上消化道出血等,此時測定血清肌酐有助于正確評判腎臟功能;14.2mmol/l高于此值常見于嚴峻的腎功能不全,應挑選其他有力的診斷方法及治療措施;1.3.11. 尿酸( ua )參考值男性 120 420umol/l女性 90 360umol/l打算水平臨床意義及措施110umol/l此值在參考下限鄰近,等于或低于此水平,應實行多種診斷措施,以鑒別各種疾病;480umol/l此值高于參考范疇上限,等于或高于此水平常,應實行各種診斷措施,鑒別各種疾病;640umol/l等于或高于此值,具有形成腎結石或痛風的高度危急,應準時實行適當的治療精品學習資料精選學習資料 -
13、- - 歡迎下載學習必備精品學問點措施;1.3.12. 肌酐( cr)參考值44133umol/l40umol/l在嬰幼兒超過此值,應考慮腎功不全的可能性,因此必需進一步作腎臟功能的檢查和評判;141umol/l成人值如超過此水平,應考慮進一步進行其他腎功能檢查試驗,如肌酐清除率試驗;530umol/l高于此水平,幾乎確定有腎功能受損,所以此值具有重要的診斷及評估意義,應準時實行必要的治療措施;1.3.13. 總蛋白( tp) 參考值6080g/l45g/l低于此值往往與水腫有關,應考慮給以相應治療,同時可作更全面的檢查如尿蛋白.腎及肝臟功能等;60g/l此為參考范疇下限, 等于或低于此值時,
14、 多種可引起總蛋白偏低的緣由均應考慮,并可挑選上面的一些試驗項目,作進一步檢查;80g/l高于此值已超出參考范疇上限,能引起總蛋白上升的各種緣由均應加以考慮,仍可通過血清蛋白電泳等項目作進一步檢查;1.3.14. 白蛋白( alb )參考值3555g/l20g/l低于此值,一般在肝病病人提示嚴峻預后不良;仍應測定尿蛋白,以查明有無過多的蛋白丟失;35g/l此亦為參考值下降,凡低于此值時,各種引起白蛋白降低的因素均應列入考慮范疇,如腎病.肝功不全.嚴峻的養分不良.急.慢性炎癥.惡性腫瘤等;57g/l在此值以上的,應考慮脫水的可能性,并進行紅細胞比積測定,以檢查其為否增高;1.3.15. 膽固醇參
15、考值2.84 7.11mmol/l1.81mmol/l低于此值常提示有嚴峻肝功不全,應考慮適當的診斷及治療措施,如已知存在肝病,就低于此值提示預后不良;5.18mmol/l此為 75%的成年男子血中膽固醇值,測定值高于此水平,提示有患冠狀動脈粥樣硬化的中度危急,故應實行相應措施, 如采納低飽和脂肪酸.低膽固醇. 高纖維素飲食;5.70mmol/l此為 90%的成年男子血中膽固醇水平,高于此值有患冠狀動脈粥樣硬化的高度危急,如病人不接受低膽固醇飲食,就應采納藥物治療;7.26mmol/l高于此值會由于患動脈粥樣硬化而預后嚴峻,必需準時實行有力的治療措施,如飲食掌握,藥物治療等;1.3.16. 高
16、密度脂蛋白膽固醇(hdl-c )參考值男1.14 1.76mmol女1.22 1.91mmol0.91mmol/l (男)低于此值提示易發生冠狀動脈性心臟病的危急增加;1.03mmol/l (女)1.42mmol/l (男)高于此水平發生冠狀動脈性心臟病的可能性很小;1.68mmol/l (女)1.3.17. 甘油三酯( tg)參考值0.56 1.70mmol/l (此值因年齡和性別有所差別)0.45mmol/l此值正常下限鄰近,低于此值多與養分不良有關,應進行正確的診斷和治療;精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點1.69mmol/l年輕男性此值接近參考范疇上限,為
17、動脈粥樣硬化性心血管病的一個危急因子,應賜予病人供應合適的預防建議;4.52mmol/l高于此水平常預示會發生動脈粥樣硬化性心血管疾病,應賜予適當治療,如掌握飲食和用降脂藥物等;1.3.18. 膽紅素( bili )參考值1.718.4umol/l24umol/l此水平在參考值范疇以上,如測定值超過此水平,各種可能引起bili 增高的緣由均應考慮,包括肝功能不全.肝外堵塞.溶血.gilbert 綜合征(家族性非溶血性黃疸);此時進行 alt . ast 凝血酶原時間和alp 測定,可幫忙確認或排除肝臟疾病43umol/l測定值高于此水平往往顯現黃疸,當顯現黃疸,但bili 測定值又在此水平以下
18、的,就提示應依據這一情形查找緣由;340umol/l嬰膽紅素超過這一水平,往往與腦損耗(核黃疸)有關,治療時應依據臨床及其他試驗結果考慮換血;1.3.19. 丙氨酸氨基轉移酶(alt )參考值540u/l ( 37)20u/l此水平在參考范疇以內,低于此值可排除很多與alt 上升有關的病種,而考慮其他診斷;此值可以作為病人自身的alt 的對比,與過去和(或)將來的值進行比較;60u/l高于此值時,對可引起alt 增高的各種疾病均應考慮,并應進行其他檢查以求確診;300u/l高于此值通常與急性肝細胞損耗有關,如病毒性肝炎.中毒性肝炎.肝性休克等,而酒精性肝炎的alt 往往低于此值,其他如傳染性單
19、核細胞增多癥.多肌炎等也都往往低于此值;1.3.20. 天門冬氨酸氨基轉移酶(ast )參考值840u/l ( 37)20u/l此為排除值,低于此水平常可排除多種與ast 增高有關的疾病;因此應考慮其他的診斷; 這個參考范疇內的值仍可作為病人自身對比,可與過去和(或)將來的測定值進行比較;60u/l此值高于參考范疇上限,當ast 測定值超過此水平常,多種與ast 增高有關的疾病均應加以考慮,如肝細胞損耗.心肌梗塞.肌肉與骨骼疾患,肝后膽道堵塞等,此時同時測定 alt .alp .bili . ck 等鑒別為肝臟疾病仍為心肌疾患有重要意義;300u/l高于此值通常為急性肝細胞損耗,如病毒性肝炎.
20、中毒性肝炎等,而一般酒精性肝炎.心肌梗塞.進行性肌養分不良等測定值均在此水平以下;1.3.21. 堿性磷酸酶( alp )參考值成人40 160u/l ( 37)兒童50 400u/l60u/l此水平在參考范疇以內,低于此水平常可以排除很多與alp 上升有關的病種,而考慮其它的診斷;此值可作為病人自身alp 的對比值,可與過去和(或)將來的值進行 比;200u/l此水平高于成人參考值范疇上限,高于此值時,應考慮能引起alp 上升的多種疾病的可能性,如肝臟病變.膽管結石.腫瘤等引起肝外膽汗積郁.成骨細胞瘤.腫瘤等;為進一步鑒別肝膽或骨骼病變,可進行血中r-gt 測定;400u/l此為兒童參考值范
21、疇的上限值,高于此值時,多種可引起alp 上升的病變均應列入考慮范疇,但為進一步明確診斷,仍應同時進行其他項目的測試;1.3.22. 淀粉酶( amy)參考值6080 somogyi unites精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點50 som u低于此值應考慮有廣泛的胰腺損害或明顯的胰腺功能不全,如已確認為胰腺病變,就 amy 低于此值往往提示有嚴峻的預后;120som u此值在參考值范疇之內,如低于此值, 在大多數情形下應排除急性胰腺炎的可能性;另外一些疾病,如消化道穿孔.大量酒精攝入,唾液腺體疾病(流行性腮腺炎).嚴重腎病.膽結石等可在此值以上;200som
22、u此水平超過參考值上限.如超過此值, 同時其他臨床及試驗室指標也支持的話,可以確診為急性胰腺炎;1.3.23. 谷胺酰轉移酶(ggt )參考值050u/l ( 37)20u/l此值在參考范疇以內,低于此值可排除部分與ggt 上升有關的疾病;此值并可作為病人以前或將來的對比值;60u/l高于此值應考慮ggt 上升的各種可能情形,測定值在60 150u/l 范疇內,且alp 在正常范疇的病人,很可能在測定前有服藥和飲酒的情形;150u/l高于此值常有肝膽管疾病,應實行各種確診措施,并進行積極治療;1.3.24. 肌酸激酶( ck)參考值男10 200u/l女10 170u/l100u/l此值在參考
23、范疇以內,低于此值就可排除很多種與ck 上升有關的疾病,同時此值也可作為病人的對比,用于與以后的ck 測定值比較;240u/l急性心肌梗塞后12 天內,可高于此水平,其他有關診斷試驗,如ck-mb ,可幫忙確診;1800u/l當測定值高于此水平常,患其他疾病的可能性高于患單一急性心肌梗塞的可能,包括橫紋肌炎,震顫性譫妄.癲癇等;此時應準時進行其他項目的檢驗以便確診;1.3.25. 肌酸激酶同工酶(ck-mb )參考值010u/l15u/l高于此值,且有連續性臨床表現(胸痛.心電圖顯示特異性轉變等),提示為急性心肌梗塞,應準時進行治療;90u/l高于此值多由于非心肌性ck-mb 釋放,如惡性腫瘤
24、, 應實行其他有關診斷方法,予以確診;1.3.26. 乳酸脫氫酶(ldh )參考值100 240u/l ( lp)170u/l此值在參考范疇以內,等于或低于此值可排除很多與ldh 上升有關的疾病,而考慮其他的診斷;此值仍可作為病人自身的對比,用來與以前或將來的測定值作比較;300u/l高于此水平常, 應考慮到可能引起ldh 上升的各種疾病, 如心肌梗塞. 肝病變.傳染性單核細胞增多癥.進行性肌養分不良等;因此,應作其他各種試驗,以作出明確診斷;血清溶血可使測定值增高,應予以留意;500u/l高于此值,常見于巨幼細胞性溶血,急性白血病.慢性粒細胞性白血病.轉移癌和肝昏迷等,此時應作其他多種檢測來
25、作出正確診斷;1.3.27. c- 反應蛋白( crp) 參考值<12mg/l20mg/l測定值高于此水平, 就提示病人有嚴峻的細菌感染.活動性風濕及惡性腫瘤等,應立刻賜予診斷及實行適當的治療措施;1.3.28. 免疫球蛋白g( igg )參考值7.016.0g/l 免疫比濁法 6.0g/l低于此值多與免疫缺陷病有關精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點17.0g/l此水平明顯高于參考范疇上限,多懷疑有igg 型骨髓瘤, 此時應通過骨髓細胞學檢查.血清蛋白電泳和免疫電泳來幫助診斷;50g/l高于此值應高度懷疑患有igg 型單克隆性球蛋白病(如 igg 型多發性骨
26、髓病) ;1.3.29. 免疫球蛋白a ( iga )參考值0.57 4.14g (免疫比濁法)(成年人)0.40g/l低于此值與免疫缺陷或igg .igm 型單克隆球蛋白病有關4.50g/l此值高于參考值上限,高于此值可懷疑為否有igg 型 球蛋白病, 為此仍應做別外的一些試驗,如骨髓細胞學檢查.血清蛋白電泳.免疫電泳等;10.0g/l高于此值就高度懷疑為iga 型 球蛋白病,如igg 型多發性骨髓瘤;1.3.30. 免疫球蛋白m (igm )參考值0.50 2.70g/l (免疫比濁法)0.40g/l低于此值多與免疫缺陷病有關3.00g/l此值超出參考范疇上限,高于此值可懷疑有igm 型單
27、克隆 球蛋白病(如原發性巨球蛋白血癥等)1.3.31. 免疫球蛋白e( ige )參考值成人 0 380kiu/l1 2 歲兒童012kiu/l 12kiu/l1 2 歲兒童低于此水平表示無嚴峻過敏的危急性;60kiu/l1 2 歲兒童高于此水平,提示發生嚴峻過敏的危急性較高;400kiu/l成人高于此水平,提示有過敏性疾病,如ige 型骨髓病;1.4. 生化檢驗的原理和方法臨床生化檢驗, 主要在技術方法的應用方面上探討生化檢驗新技術以及新的標記物的挑選和評判,用以幫忙診斷, 又稱 “診斷生化 ”;主要應用了以下技術:光譜技術. 電化學分析技術.層析技術.電泳技術.離心技術.抗原抗體特異性反應
28、和標記技術.核酸擴增.雜交及序列分析技術等, 其中生化分析儀主要運用了光譜技術中的吸取光譜法和比濁法;分別介紹如下:1.4.1. 吸取光譜法比色分析為基于溶液對光的挑選性吸取而建立起來的一種分析方法,又稱吸取光譜法; 有色物質溶液的顏色與其濃度有關;溶液的濃度越大, 顏色越深;利用光學比較溶液顏色的深度, 可以測定溶液的濃度;1.4.1.1. 物質的顏色和光的關系光為一種電磁波;自然為由不同波長(400 700nm)的電磁波按肯定比例組成的混合光,通過棱鏡可分解成紅.橙.黃.綠.青.藍.紫等各種顏色相連續的可見光譜;如下圖:如把兩種光以適當比例混合而產生白光感覺時,就這兩種光的顏色互為補色;下
29、圖中處于同始終線關系的兩種色光(如綠與紫.黃與藍)互為補色;溶液顏色綠 黃 橙 紅 紫紅 紫 藍 青藍 青 吸取光 顏色 紫 藍 青藍 青 青綠 綠 黃 橙 紅波長 nm 400 450 450480 480 490 490 500 500560 560 580 580600 600 650 650760當白光通過溶液時, 假如溶液對各種波長的光都不吸取, 溶液就沒有顏色; 假如溶液吸取了其中一部分波長的光, 就溶液就蜈現透過溶液后剩余部分光的顏色; 例如,我們看到 kmno4 溶液在白光下呈紫紅色, 就為由于白光透過溶液時, 綠色光大部分被吸取, 而其他各色都能透過;在透過的光中除紫紅色外都
30、能兩兩互補成白色,所以 kmno4 溶液出現紫紅色;精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點同理, cuso4溶液能吸取黃色光,所以溶液呈藍色;由此可見,有色溶液的顏色為被吸取光顏色的補色; 吸取越多,就補色的顏色越深;比較溶液顏色的深度,實質上就為比較溶液對它所吸取光的吸取程度;1.4.1.2. 吸光度的定義一束強度為io 的平行單色光通過一個含有濃度為c 的吸光物質. 厚度為 l 的吸取池時, 如上圖,一些光子被吸取,光強從io 衰減為 it ,就該溶液的吸光度a 等于:其中為透光率;1.4.1.3. 吸取曲線假如測定某種物質對不同波長單色光的吸取程度,以波長為橫坐
31、標, 吸光度為縱坐標作圖可得一條曲線,即物質對光的吸取曲線,可精確地描述物質對光的吸取情形;下圖為幾種不同濃度的kmno4溶液的吸取曲線,溶液對波長525nm鄰近的綠光吸取量 最強,而對其他波長的光吸取較弱;光吸取程度最大處的波長叫做吸取波長,用max 表示;不同濃度的kmno4溶液所得的吸取曲線,最大吸取波長都一樣,只為相應的光被吸收的程度不同;吸取曲線可作為比色分析中波長選定的依據,測定時一般挑選max的單色光作為入射光;這樣即使被測物質含量較低也可得到較大的吸光度,因而可使分析的靈每度較高;如所測定的溶液無色,可在測定前加入適當的顯色劑,通過與待測成分的化學反應使溶液晱色即可測定此待測成
32、分;a. lamber-beer定律其中為吸光系數,有兩種表示方法摩爾吸光系數和比吸光系數,摩爾吸光系數的意義為1摩爾濃度的溶液在厚度為1cm時的吸光度,比吸光系數的意義為濃度為1%w/v的溶液在厚度為1cm時的吸光度; c 為溶液的濃度; l 為吸取池的厚度 (單位為cm ,亦稱光徑) ; lamber-beer定律的意義為:某溶液的吸光度等于該物質的吸光系數.濃度 c 和光徑 l(cm )的乘積,當光徑不變時,濃度和吸光度成正比;這為生化分析儀利用吸取光譜法進行定量測定的基礎,見下圖:lamber-beer定律成立的前提條件為:1 被吸取光為單色平行光,2 待測定溶液為稀溶液;b. 比濁法
33、比濁法分兩類:透射比濁法和散射比濁法;帶有小粒的懸浮液和膠體溶液都具有向四周八方散射入射光的性質,當一束平行光通過含有懸浮質點的懸浮液或膠體溶液時,同時受到散射和吸取兩個因素的影響,使光的強度減弱;在光源的光路方向上測量透射光(實際上仍包括散射光)強度與入射光強度比值,并通過該比值測定出懸浮液或膠體溶液中質點的溶度,稱為透射比濁法,在光路的其他方向上測定測 量散射光強度,從而測定出懸浮液或膠體溶液中質點的溶度,稱為散射比濁法;免疫學方法為以被檢測物質作為抗原,然后用免疫動物的方法制備相應的抗體,利用抗原抗體的特異性結合反應來對被檢測物質進行定量;影響免疫比濁的因素:1. 抗原抗體比例; 抗原抗
34、體比例對復合物的數量和顆粒大小關系極大,當抗體> 抗原時成正相關,當抗體< 抗原時成負相關; 2. 抗體純度和效價;3. 增聚劑; 在免疫反應中,為增強抗原抗體反應常使用增 聚劑,如 3-4 的聚乙二醇等,利用其破壞抗原抗體的水化層,促進其靠近反應,但如濃度精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點不適合,高了會影響其它溶質或產生非特異性集合影響結果;透射比濁法一束強度為io 的平行單色光通過一個含有懸浮質點(顆粒大小與光源波長接近)的懸浮液或膠體溶液時,如上圖,其透射光強度i 可用下式表示:式中, l 為懸浮液或膠體溶液在光前進方向上的長度,為濁度系數,與懸
35、浮質點的濃度c成線性關系;令=2.3kc ,就:該式與 lamber-beer定律相像, 這為生化分析儀利用透射比濁法進行定量測定的基礎,該法可以與吸取光譜法共用一個檢測器,全部生化分析儀,不需增加任何部件,均可利用此法進行測定;大部分特種蛋白,如載脂蛋白類(apoai、apob等).補體類(c3 .c4 等).免疫球蛋白類 ( igg ,igm 等)等,配以相應的試劑, 可利用此法在生化分析儀上進行測定;散射比濁法一束強度為io 的平行單色光通過一個含有懸浮質點 顆粒大小遠小于光源波長 的懸浮液或膠體溶液時,如上圖,與入射光垂直方向上,其散射光強度i 可用下式表示:式中, n1 .n2 分別
36、表示質點與介質的折射率,表示單位體積內的質點數,r 表示質點半徑;可見散射光強度與懸浮質點的濃度成正比,這為利用散射比濁法進行定量測定的基礎,因另需在光路垂直方向上增加一檢測器,目前只有極少數生化分析儀可利用散射比濁法進行定量測定,而幾乎全部的特種蛋白分析儀.免疫分析儀等都能利用散射比濁法進行定量測定;1.5. 生化試劑的作用和分類1.5.1. 生化試劑的作用a) 顯色性在測定前向血清中加入適當的顯色劑(試劑) ,與待測成分的化學反應使溶液變色即可測定此待測成分;b) 單一性不同的試劑和血清中的不同成分反應,引起了吸光度的變化;1.5.2. nad+ nadh ( nadp+ nadph )指
37、示系統1.5.2.1. 反 應 原 理 nadh和 nadph在 340nm有特點性吸取峰,而nad+和 nadp+在 340nm無特點性吸取峰, 利用其偶聯的脫氫酶 工具酶 反應, 依據 340nm吸光度的變化, 可以測定物質的濃度或活性;目前利用此指示系統進行測定的臨床項目有:alt .ast .ck .ldh .ck-mb .-hbdh.glu (己糖激酶法).urea .nh4+.co2等1.5.2.2. 舉例說明alt ( gpt )的測定原理(中生試劑,ifcc )試劑成分和反應公式:r1 : nadh.乳酸脫氫酶(ldh );r2 : l- 丙氨酸.- 酮戊二酸;原理:nadh的
38、削減,引起 340nm吸光度的下降, 下降速率與alt 活性成正比 動力學法 ;精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點a-hbdh( ldh1 )的測定原理(羅氏試劑,dgkc )試劑成分和反應公式:r1 :磷酸鹽緩沖液,a- 酮基丁酸,防腐劑; r2 :nadh ,防腐劑;原理: nadh的削減,引起340nm吸光度的下降,下降速率與a-hbdh活性成正比 動力學法 ;1.5.3. p-np和 p-na指示系統1.5.3.1. 反應原理p-np和 p-na在 405nm有特點性吸取峰,依據405nm吸光度的變化,可以測定物質的濃度或活;目前利用此指示系統進行測定的臨
39、床項目有alp .acp .r-gt . amy 等;1.5.3.2. 舉例說明alp ( akp )的測定原理(羅氏試劑,ifcc )試劑成分和反應公式:r1 :amp 緩沖液,鎂離子,鋅離子,ph 10.44;r2 :對硝基苯磷酸,防腐劑,ph 8.5原理:在鎂離子和鋅離子的存在下,堿性磷酸酶解離對硝基苯磷酸形成磷酸鹽和對硝基苯酚,引起 405nm吸光度的上升,上升速率與alp 活性成正比(動力學法);ggt 的測定原理(羅氏試劑,ifcc )試劑成分和反應公式:r1 :naoh ,雙甘肽, ph 7.7 ;r2 :l r 谷氨酰 3 羥基 4 硝基苯氨,防腐劑;原理: 5- 氨基 -2-
40、 硝基苯甲酸的生成,引起405吸光度的上升,上升速率與ggt 活性成正比;1.5.4. h2o2偶聯的指示系統1.5.4.1. 反應原理h2o2在過氧化物酶的作用下,可使單一個或成對的無色的色素原氧化成有色的色素,導致某一波長吸光度的增加,因此可用來測定物質的濃度或活性;1.5.4.2. 舉例說明glu 的測定原理(中生試劑)試劑成分和反應公式:r1 :4- 氨基安替吡啉.抗壞血酸氧化酶;r2 :葡萄糖氧化酶 (god ).過氧化物酶( pod ).酚 ;測定原理: 醌亞胺的生成, 導致 500nm吸光度的增加, 增加的程度與glu 的含量成正比;chol的測量原理(德賽試劑)試劑成分和反應公
41、式:r1 :good s緩沖液 ph 6.7 ,苯酚, 4 氨基安替比林,che (膽固醇脂酶),cho (膽固醇氧化酶),pod (過氧化物酶);精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點測定原理:醌亞胺的生成,導致500nm吸光度的增加,增加的程度與chol的含量成正比;1.5.5. 抗原抗體反應指示系統1.5.5.1. 反應原理特異性抗體與抗原 待測物質 在相應的緩沖環境下反應生成抗原抗體復合物,形成肯定的濁度,導致特定波長透光率的轉變;在抗體過剩的前提下,轉變程度與抗原濃度成正比;目前利用此指示系統進行測定的臨床項目有apoai.apob .lpa .igg .i
42、ga .igm .c3 .c4 .crp 等;1.5.5.2. 舉例說明(略)1.5.6. 其它顯色反應1.5.6.1. tp的反應原理蛋白質中的肽鍵在堿性溶液中能與銅離子作用產生紫紅色絡合物,導致 540nm吸光度的增加,增加的程度與蛋白質的含量成正比;1.5.6.2. alb的反應原理在 ph4.2環境中,溴甲酚綠在有非離子去垢劑聚氧乙烯月桂醚(brij-35)存在時,可與白蛋白形成藍綠色復合物,導致630nm吸光度的增加,增加的程度與白蛋白的含量成正比;其它的顯色反應仍有ca 和 mg 等物質的測量方法,這里就不一一舉例了;1.6. 常用臨床生化項目的主要測定原理和臨床意義項目 測定原理
43、臨床意義altnadh的削減,引起 340nm吸光度的下降, 下降速率與alt 活性成正比 動力學法 ;alt主要存在于肝細胞中,心肌細胞次之, 活性上升表示有肝細胞損耗,也可見于心肌及骨骼肌損耗;astnadh的削減,引起 340nm吸光度的下降, 下降速率與ast 活性成正比 動力學法 ;ast主要存在于心肌細胞中,肝細胞次之, 活性上升表示有心肌損耗,也可見于肝細胞及骨骼肌損耗;alp對硝基苯酚的生成,引起405nm吸光度的上升,上升速率與alp 活性成正比 動力學法 ; alp 主要存在于骨.肝.腎和腸,活性上升見于肝膽及骨骼疾病等;r-gt5- 氨基 -2- 硝基苯甲酸鹽的生成,引起
44、405nm吸光度的上升,上升速率與r-gt活性成正比 動力學法 ; 活性上升與肝膽疾病.心肌梗塞.腦損耗.慢性酒精中毒.苯妥英鈉治療有關;-hbdhnadh的削減,引起340nm吸光度的下降,下降速率與-hbdh活性成正比 動力學法 ; 活性上升與急性心肌梗塞有關;ldhnadh的生成, 引起 340nm吸光度的上升, 上升速率與ldh 活性成正比 動力學法 ; 活性上升與心肌梗塞有關、 也可見于肝臟疾病.未治愈的惡性貧血.巨幼紅細胞貧血.腎臟疾病.惡性腫瘤等;精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點cknadph的生成, 引起 340nm吸光度的上升, 上升速率與ck
45、 活性成正比 動力學法 ; 活性上升與心肌梗塞有關、 也可見于肌養分不良.甲狀腺機能減退.肺梗塞.急性腦血管疾病等;ck-mb先用 ck-m的抗體抑制ck-m的活性,其余同ck 的測定活性上升主要見于心肌梗塞;-amy1 用生色基團對 - 硝基酚修飾- 麥芽七糖苷 pnp-g7作為底物, 經 - 淀粉酶水解成小分子的寡糖苷,再經幫助酶- 葡萄糖苷酶進一步水說明放誕生色基團pnp ,導致 405nm吸光度增加,增加速率與-amy活性成正比,roche公司等采納此法;2 用生色基團對- 硝基酚修飾麥芽五糖苷pnp-g5作為底物,其余同1 ;日本第一化學采納此法, ifcc 舉薦;3 采納 2- 氯
46、-4- 硝基苯酚 - - 麥芽三糖 cnp-g3做底物,不需要用幫助酶,直接由淀粉水 解產生 cnp ,導致 405nm吸光度增加, 增加速率與-amy活性成正比, 科華采納此法;活性上升見于急性胰腺炎.胰腺管道堵塞.流行性腮腺炎.細菌性腮腺炎等;tg醌亞胺的生成, 導致 550nm吸光度的增加, 增加的程度與tg 的含量成正比 終點法 ; 上升見于腎病綜合癥.動脈粥樣硬化.甲減.糖尿病.肝病等,降低見于養分不良.脂蛋白缺乏.甲亢.惡液質等;tc醌亞胺的生成, 導致 550nm吸光度的增加, 增加的程度與tc 的含量成正比 終點法 ; 上升見于動脈粥樣硬化.腎病.糖尿病.粘液水腫等,降低見于甲
47、亢.貧血.吸取障礙.惡液質等;hdl-c沉淀法:先用磷鎢酸鈉- 鎂沉淀 ldl-c和 vldl-c ,再按 tc 方法測定;均相法:先用多聚陰離子化合物挑選性遮擋ldl-c和 vldl-c ,再按 tc 方法測定;含量越低,發生冠心病的危急越大;ldl-c 沉淀法:先用 pvs 沉淀 ldl-c ,再按 tc 方法測定,tc 值減去該測定值即為 ldl-c ;均相法:先用多聚陰離子化合物挑選性遮擋 hdl-c 和 vldl-c ,再按 tc 方法測定; 含量越高,發生冠心病的危急越大;ua醌亞胺的生成, 導致 550nm吸光度的增加, 增加的程度與ua 的含量成正比 終點法 ; 上升與痛風.白
48、血病.妊毒血癥.腎病有關;urea 二乙酰 肟法:二乙酰 肟與強酸作用生成二乙酰, 二乙酰與 urea 在酸性條件下, 縮合成紅色的二嗪衍生物,導致 520nm 吸光度的增加,增加的程度與 uaea 的含量成正比 終點法 ;精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點紫外 - 谷氨酸脫氫酶法:nadh的削減, 引起 340nm吸光度的下降, 單位時間內下降程度與urea 濃度成正比 固定時間法.兩點速率法 ; 上升主要見于腎臟疾病,也可見于脫水.糖尿病昏迷.腎上腺危相.胃腸道出血.循環虛脫,下降見于嚴峻的肝臟疾病;cr 堿性苦味酸法:肌酐 - 苦味酸復合物的生成,導致510
49、nm吸光度的增加,單位時間內增加量與cr 濃度成正比 固定時間法.兩點速率法 ;肌氨酸氧化酶法:醌亞胺的生成,導致550nm吸光度的增加, 增加的程度與cr 的含量成正比 終點法 ; 上升見于腎功能的損耗;glu氧化酶法:醌亞胺的生成,導致500nm吸光度的增加,增加的程度與glu的含量成正比 終點法 ;己糖激酶法:nadh 的生成,引起 340nm 吸光度的增加,增加程度與 glu 濃度成正比 終點法 ; 上升主要見于糖尿病, 也可見于甲亢. 垂體或腎上腺機能亢進; 降低主要見于胰島素過量. 甲減.垂體機能減退.腎上腺機能減退.葡萄糖吸取障礙;tp紫紅色絡合物的生成,導致540nm吸光度的增
50、加,增加的程度與tp 的含量成正比 終點法 ; 上升見于各種緣由失水.一種或多種球蛋白分泌增多;降低見于養分不良;alb白蛋白溴甲酚綠復合物的生成,導致630nm吸光度的增加,增加的程度與alb的含量成正比 終點法 ; 上升見于各種緣由失水;降低見于肝臟疾病.腎病綜合癥.養分不良.蛋白丟失;t-bil重氮偶合法.比色法.終點法;凍干單劑型偶氮膽紅素的生成,導致545nm吸光度的增加,增加的程度與t-bil的含量成正比 終點法 ;膽紅素釩酸鹽>膽綠素ph3.0表面活性劑釩酸鹽氧化法,比色法,終點法,液體雙劑型膽紅素的削減引起在波長450nm處吸光度的下降,吸光度的變化與總膽紅素含量成正比;
51、上升見于各類肝臟疾病,也可見于溶血性疾病;d-bil重氮偶合法.比色法.終點法,凍干單劑型偶氮膽紅素的生成,導致545nm吸光度的增加,增加的程度與d-bil的含量成正比 終點法 ;膽紅素釩酸鹽>膽綠素ph3.0表面活性劑精品學習資料精選學習資料 - - - 歡迎下載學習必備精品學問點釩酸鹽氧化法,比色法,終點法,液體雙劑型膽紅素的削減引起在波長450nm處吸光度的下降, 吸光度的變化與直接膽紅素濃度成正比;上升見于各類肝臟疾病和膽導堵塞;nh4+nadh的削減,引起340nm吸光度的下降,下降程度與nh4+濃度成正比 終點法 ; 上升見于肝昏迷.肝性腦病;co2nadh的削減,引起34
52、0nm吸光度的下降,下降程度與co2 濃度成正比 終點法 ; 反常見于酸堿平穩失調;ip絡合物的生成,引起340nm吸光度的上升,上升程度與ip 濃度成正比 終點法 ; 上升見于慢性腎炎.甲狀旁腺功能減退.vitd過多;降低見于佝僂病.骨軟化等;ca 鄰- 甲酚肽絡合酮cpc 法有色絡合物的生成,引起575nm吸光度的上升,上升程度與ca 濃度成正比 終點法 ,長征公司采納此法;甲基麝香草酚蘭mtb法有色絡合物的生成,引起612nm吸光度的上升,上升程度與ca 濃度成正比 終點法 ,科華公司采納此法;上升見于甲狀旁腺功能亢進.腫瘤骨轉移.vitd過多;降低見于甲狀旁 腺功能減退.佝僂病.腎病等;mg有色絡合物的生成,引起 582nm吸光度的上升, 上升程度與mg 濃度成正比 終點法 ; 上升見于尿毒癥;降低見于吸取障礙.糖尿病性昏迷.急慢性酒精中毒.慢性腎病等;cl紅色絡合物的生成,引起480nm吸光度的上升,上升程度與cl 濃度成正比 終點法 ; 上升見于柯興綜合癥.酸中毒.尿毒癥等;降低見于阿狄森氏病.堿中毒.腹瀉.尿崩等;apoa1/ apob抗原抗體復合物的形成,導致340nm透射濁度的增加,增加的程度與apoa1/apob的濃度成正比 終點法 ; apoa1降低和 apob上升見于未掌握的糖尿病.腎病綜合癥.肝功能低下
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