1、武漢生物工程學院高等教育自學考試本科論文（設計） 武漢生物工程學院高等教育自學考試畢 業 論 文論文題目：香菇多糖生物活性的作用與研究進展指導老師：專 業：準考證號：作者姓名：答辯時間：2015年 12月 23日目錄 摘 要II 關鍵詞II 前 言III1. 香菇多糖的簡介12. 香菇多糖的理化性質13. 香菇多糖的生物活性1 3.1香菇多糖的免疫調節1 3.2香菇多糖的抗腫瘤活性1 3.3香菇多糖抗感染作用2 3.4香菇多糖的抗病毒活性24. 香菇多糖的應用3 4.1醫藥領域應用3 4.2食品鄰域應用35. 展望36. 小結3參考文獻4致 謝4摘 要 香菇多糖是從食用香菇香菇子實體分離提取的

2、一種結構復雜的高分子化合物，它能激活調節人類的免疫系統因而具有很強的抗癌生物活性。但是由于其分離純化技術中不成熟以及缺乏透徹的了解香菇多糖分子結構和功能的關系，使其廣泛的藥效受限制從而不能有效被人類提取利用。本文通過簡明扼要的敘述和經典實例旨在探討不同研究領域對香菇多糖的認識，以及調節人體的生命活動的作用。文章系統地闡述了近年來香菇多糖的研究進展，并展望今后的研究方向。關鍵詞香菇多糖；生物活性；應用；發展前 言 糖類的研究已有百余年的歷史，近20多年來，隨著膜的化學功能，免疫物質的化學研究的進展以及探尋新藥物資源的不斷拓展和研究的深入，發現糖類在生物體中的作用不僅是作為能量資源或結構材料，更重

3、要的是還參與了生命現象中細胞的各種活動，具有多種多樣的生物學功能。多糖一般由十個分子以上的單糖通過糖苷鍵連接而成的高分子多聚物。多糖按來源大致可分為植物多糖、動物多糖、海藻多糖、微生物多糖即細菌多糖和真菌多糖等。其中，具有很強生物活性的真菌多糖的研究日益受到重視，真菌多糖從真菌子實體、菌絲體、發酵液中分離，是一類可以控制細胞分裂分化、調節細胞生長和衰老的活性多糖1。真菌多糖作為藥物研究始于20世紀50年代，在60年代以后成為免疫促進劑受到廣泛關注，其中香菇多糖(1entinan，LNT)是研究得較透徹的多糖之一香菇Lentinus edodes(Berk)Sing為擔子菌綱傘形科真菌，是世界名

4、貴食用菌兼藥用菌之一。70年代初，Shida等用三氯醋酸浸提、甲醇等沉淀從香菇中提取得到三種-葡聚糖水溶性多糖，首次報道了香菇中含有抗腫瘤的活性物質，并認為一種分子量在16000的香菇多糖也具有抗腫瘤活性2。80年代以來，香菇多糖的研究更為深入，香菇多糖的提取由子實體發展到從深層發酵香菇菌絲體，對香菇多糖的研究大量轉向藥理和臨床實驗，結果表明香菇多糖具有廣泛的抗腫瘤作用，尤其對慢性粒細胞白血病、胃癌、鼻煙癌、直腸癌和乳腺癌等有抑制作用和防止手術后轉移的效果，適用于病后機體康復，是目前已知較強的免疫增強劑。此外，香菇多糖還是治療各種肝炎，特別是慢性遷移肝炎的良好藥物。隨著經濟社會的不斷發展，香菇

5、多糖行業將越來越受到人們的關注，而作為生藥學和藥理學發展的相關產業，香菇多糖也倍受中醫藥學者和科研人青睞 III1.香菇多糖的簡介 香菇多糖（Lentinan 簡稱LNT）是從傘菌科香菇屬的天然香菇子實體中提取得到的一種(1-3）葡聚糖5。它是一類具有調節人體生理機能、增強人體免疫力、預防和治療多種慢性疾病作用的物質，尤其是它具有顯著的、獨特的抗腫瘤活性，并減輕放療和化療的毒副作用，其抗腫瘤的藥理作用并非直接殺死致病源，而是通過刺激免疫細胞成熟、分化，增強和改善人體機能平衡，恢復和提高人體細胞對淋巴分子、激素及其它生理活性因子的反應。該多糖的一級結構具有-(13)連接的吡喃葡聚糖主鏈，在主鏈中

6、葡萄糖的c6位上含有支點(每5個葡萄糖有2個支點)，其側鏈是由-(16)鍵和-(13)鍵相連的葡萄糖聚合體組成，在側鏈上也含有少數內部-(16)鍵。x射線衍射分析證明，其立體結構為右旋三重螺旋的六方晶系，晶格常數a=b=15 nm，c=06 nm。采用高分辨13C-核磁共振(13CNMR)研究表明，其二級結構為凝結型的單螺旋構象。Sureniav3j等從4種香菇中分離出的4種高分子抗腫瘤活性多糖，經檢測都是(13)-D-葡聚糖，并含有46152的蛋白質。但4種多糖分別被破壞了三螺旋(13)-D-構型、被超聲波打成碎片、被除去結合蛋白質后，檢測它們的抗腫瘤活性，發現比天然物質有所降低。這就表明，

7、多糖的構型、相對分子質量及結合蛋白質也可能影響其抗腫瘤活性。2.香菇多糖的理化性質 香菇多糖以一種-D|1-3|葡萄糖殘基為主鏈,側鏈是一種(1-6)葡萄糖殘基的葡萄糖。重復結構單位一般含有7個葡萄糖殘基，其中2個殘基在側鏈上。有文獻報道，香菇中的多糖結構有利于誘生干擾素的活性，因此在治療肝炎方面具有積極的意義。通過采用凝膠濾過法(HPLC)激光拉曼散射法測得香菇多糖的相對分子量為4105 81054。香菇多糖為白色粉末狀固體，對光和熱穩定，在水中最大溶解度為3mg/ml，能溶解于0.5mol/LNaOH溶液中，溶解度可達50-100mg/ml，不溶于甲醇、乙醇、丙酮等有機溶劑。目前有人正在研

8、究，在香菇多糖原有的結構上接硫酸根基團，在不改變藥品功效的基礎上，可大大提高水溶性。香菇多糖具有吸濕性，在相對濕度為92.5%的25室溫環境中放置15天，吸水量可達40%，因此，香菇多糖應保存在干燥狀態下3。香菇加水煮沸3次（3小時，2小時，1小時），濾過、濃縮、除蛋白，離子交換或透析除雜質，加3倍量乙醇沉淀，用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌，真空干燥，得到微黃白色粉末。將粉末溶于水，經DEAE纖維柱色譜和分級沉淀法分離、濃縮，加乙醇沉淀，再用無水乙醇、丙酮、乙醚洗滌后放入盛有五氧化二磷的真空干燥中干燥，得白色粉末。另有用超濾法提取香菇多糖，純度可達74.4%6。3.香菇多糖的生物活性 3.1香菇多

9、糖的免疫調節香菇多糖（LNT）是T細胞的免疫佐劑，其抗腫瘤作用依賴于由胸腺或T細胞介導的免疫反應；輔助性T（Th）細胞可能是其主要的厚發刺激細胞。在周愛武的香菇多糖的免疫調節實驗中。LNT對Cy誘導免疫功能低下小鼠脾細胞溶血素抗體（lgM）生成的影響。實驗表明國產LNT3個劑量和日本產LNT均可顯著促進Cy誘導免疫功能低下小鼠IgM抗體的生成，其中以每天1mg/kgLNT的作用最顯著。 LNT對ConA誘導小鼠脾淋巴細胞增殖反應的影響。其中LNT在1125mg/L濃度范圍內可明顯促進ConA誘導的T細胞增殖反應，量效曲線呈現濃度依賴性雙向作用8。 3.2香菇多糖的抗腫瘤活性 香菇含有多種有效藥

10、用成分，尤其是香菇多糖（Lentinan,LNT)是一種重要的生物反應調節劑，它可以通過刺激免疫細胞成熟，分化和增殖，改善機體，達到恢復和提高宿主細胞對淋巴因子、激素和其它生理活性因子的反應性，由于是間接作用，所以毒副作用小。我國于1998年引進LNT加工技術并實現國產化，結合化療，廣泛應用于臨床。下面為LNT在幾個方面的應用。 首先，對各時期的胃腸癌顯示了良好的化學輔助治療作用。由郭成業對22例胃癌患者研究發現；患者化療前3天開始使用LNT（用量為1mg/次，靜脈注射，每周2次全療程6-8周）總有效率CR（完全緩解）+PR（部分緩解）為60%，而單化療療程的觀察組有效率CR+PR僅為33.3

11、%。劉伯宇的實驗中化療過程中不良反應的發生率，實驗組也明顯低于對照組。另外，楊樹軍、符幼莉等在進行胃癌治療中結合化療和LNT輔助治療都得到相似的結果7。另外，LNT對惡生淋巴癌、鼻咽癌、肝癌和白血病都有顯著的輔助的治療效果。 3.3香菇多糖抗感染作用 據報道香菇多糖可抑制抗菌藥的耐藥性:香菇多糖可顯著抑制用鏈霉素、雷米封和利福平聯合治療結核的復發。可用于治療結核桿菌感染,產生耐藥性的肺結核病人,用香菇多糖治療一段時間后,病人痰菌轉陰性,中性粒細胞吞噬性增加。香菇多糖還具有抗寄生蟲作用，可延長李斯特菌感染小鼠的生存期,可能與香菇多糖提高巨噬細胞功能有關。香菇多糖對利曼化等原蟲也有作用。說明香菇多

12、糖抗寄生蟲作用與T細胞功能有關。香菇多糖對泡狀口炎病毒感染引起的小鼠腦炎有顯著的治療和預防作用,治療組100%存活而對照組全部死亡。香菇多糖對Abelson病毒、A2(H2N2)病毒、12型腺病毒及流感病毒感染均有抑制作用,是治療各種肝炎特別是慢性遷移型肝炎的良好藥物6。香菇多糖抗病毒作用與其誘生IFN和提高NK細胞活性有關11。香菇多糖抗感染的機制與多糖本身的特性有關。病原體表面的糖蛋白識別正常細胞表面的糖分子并發生黏附作用,是引起感染的必要前提。體液中游離的糖分子可以與病毒結合起到屏蔽作用,因此糖分子的干擾也是其抗感染的機制之一。HIV是目前最難對付的病毒之一。硫酸化香菇多糖具有顯著抗HI

13、V作用,體外10mg/L就完全抑制HIV抗原的表達,干擾HIV對MT4細胞的侵染,抑制合胞體形成;臨床使用能協同疊氮胸苷(AZT)更好地抑制HIV抗原的表達12。 3.4香菇多糖的抗病毒活性 香菇含有大量生物活性物質,其中主要活性成分是香菇多糖。通過近30年的研究,香菇多糖具有抗腫瘤、調節免疫功能和刺激干擾素形成等功能,已逐步開發成新藥應用于臨床,并取得一定的效果。但是香菇多糖活性和臨床療效并不突出,特別是抗病毒活性很低。目前病毒感染人群相當龐大,抗病毒藥物短缺,經結構修飾的香菇多糖具有較強的抗病毒活性,為提高香菇多糖的生物活性,多糖的分子修飾和結構改造具有重要意義。已有的試驗證明,經過修飾的

14、香菇多糖都具有較好的生物活性,其中酯化是一種很有效的結構修飾方法,經酯化后的香菇多糖都具有較好的抗病毒活性。酯化的方法有硫酸酯化、磷酸酯化等,研究最多的是硫酸、研究最多的是硫酸酯化多糖。現有的經酯化后的多糖雖然在抗病毒活性上有了很大的改善,但是這些酯化方法都有一個共同特點修飾反應過于激烈,這勢必對多糖結構產生不同程度的破壞,進而影響其活性;連續用藥又會出現抗凝血和血小板減少等癥狀;而且硫酸酯化多糖體內療效不明顯。為此,本研究采用香菇多糖和丙酸在酶催化下酯化,得到香菇多糖酯,以提高抗病毒活性9。日本石田博士研究認為，香菇含有一種雙鏈核糖核酸，能刺激人體網狀細胞及白血球釋放干擾素，而干擾素具有抗病

15、毒作用。因此，適當多吃香菇，對人體大有裨益。香菇菌絲體提取物可抑制細胞的吸附皰疹病毒，從而防治單純皰疹病毒、巨細胞病毒引起的各類疾病。英國從培養的香菇菌絲體中提取到一種物質，可使因艾滋病病毒感染的T 淋巴細胞復原，刺激巨噬細胞，有助于產生抗體治療艾滋病，且安全無副作用10。4.香菇多糖的應用 4.1醫藥領域應用 隨著對多糖研究的深入,已發現越來越多的多糖在抗癌、提高免疫、抗病毒、抗炎、降血糖、降血脂、抗氧化作用、抗衰老、抗凝血、抗血栓等方面呈現出較強的活性13。 香菇多糖與化療劑聯合使用，有減毒、增效作用。化療藥物殺傷腫瘤細胞的選擇性差，對正常細胞也有殺傷力，產生毒副作用。在化療過程中服用香菇

16、多糖，可也增強化療的療效，并減輕化療的毒副作用；同時，化療過程中患者的白細胞下降的發生率、腸胃毒性、肝功能損害的發生明顯下降。 大多數的抗癌藥物在殺死癌細胞的同時也會損傷正常的細胞，對患者免疫系統造成損害，臨床上表現很多副作用。而香菇多糖作為抗腫瘤藥物的最大優點在于毒副作用小，與一些化療藥物有協同作用。香菇多糖通過激活體細胞免疫和體液免疫系統，增強宿主抗病毒，抗細菌感染力。臨床上可提高自身免疫能力。還可以用于慢性病毒性肝炎、肝中毒、肝硬化等病的治療14。 4.2食品鄰域應用 香菇(Lentinus edodes)是一種重要的食藥用栽培真菌,素有“山珍”之稱。香菇多糖是香菇中重要的有效成分,有研

17、究證明,香菇多糖具有提高機體免疫力、抗腫瘤、抗病毒、降血糖血脂等功能15,并幾乎無副作用,是一種比較理想的藥物,也是一類重要的保健食品功能因子。香菇多糖是選用優質香菇子實體經工藝發酵提取。香菇提取物中最主要的成分是香菇多糖，其中含有的10余種氨基酸，其中有異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、纈氨酸等7種人體必需的氨基酸及維生素B1、B2及礦物鹽和粗纖維等。香菇多糖有抗血脂、抗腫瘤、調節免疫、抗血小板凝集、護肝、抗基因突變、抗肝炎病毒等功效。5.展望香菇多糖作為一種免疫增強劑具有免疫調節作用,增強NK細胞、T細胞功能,以及誘導干擾素血中濃度增高,具有抗腫瘤、抗病毒等作用。用于治療惡性腫瘤

18、和慢性乙肝等病毒性疾病,在與手術、放療、化療和惡性胸腹水等相結合的輔助治療中,取得很好的療效,值得臨床推廣使用。 廣東省科學院微生物研究所研制成功的新型飲料“香菇樂”投放市場后,頗受消費者的歡迎。該廣的“香菇樂”,不但以其獨特的天然香菇風味取悅消費者,而且以其誘人的發展前景吸引了投資者。最近,香港振華國際貿易公司已和該廠達成合資合作的協議,計劃擴充設備,擴大“香菇樂”的生產并開拓國際市場。“香菇樂”內含豐富的營養物質,具有滋補養顏、抗衰老、提高機體免疫力功能等作用。香菇的抑抗癌及愛滋病的功能更令它增加了吸引力。我國是食用菌生產大國，其中香菇的產量在世界居首位，香菇資源非常豐富，亟待人們去認識與

19、開發。由于香菇多糖具有抗腫瘤、免疫調節、抗病毒等方面的生物活性，因此對香菇多糖的研究已成為一個熱點。目前，國內外學者在香菇多糖的分離提取、化學組成、結構分析、生物活性等方面做了大量的研究工作。因此，香菇多糖將在食品工業、發酵工業、醫療保健等領域得到更加廣泛地應用。在科學技術高度發達的21 世紀，香菇多糖的研究必將有更廣闊的發展前景.6.小結隨著社會經濟的不斷發展和人類生活水平的提高，人類對于健康的追求正在逐步上升，人類與疾病抗爭,不斷探索療效好、毒性低的新藥成為健康發展的長期目標。努力尋找具有調節免疫系統功能的免疫活性物質和抗癌新藥也成為時尚潮流,但化學新藥開發費用高、周期長,近年來醫藥界更關

20、注從天然產物中發掘目標。香菇多糖的獨特優勢和生理活性直接用于臨床醫藥搶占市場先機,通過將其主結構作為先導化合物,進一步研究其各種衍生物,使其盡快發揮相應功能。因此大力發展香菇多糖產業鏈將贏得21世紀醫藥行業的契機。參考文獻1 蘆殿榮，祝彼得，劉嘯等，香菇多糖的免疫調節及臨床應用研究進展j中華臨床醫學雜2004， 7(5):63 2 曲章義 香菇多糖抗腫瘤作用機理j 中國食用藥，1997，16（5）：3.3 景軍，香菇多糖對人體作用研究與應用j.廣西壯族自治區食品衛生監督研究所，廣西南寧4 景軍，香菇多糖對人體作用研究與應用j中國食品衛生雜志，2001，2（13）：465 陳孜，薄層板色譜方法鑒別香菇多糖的研究J.廣州醫藥.19966 趙繼明，蒲艷春，香菇多糖的研究進展J.中外健康文摘.2011，38：7 季宇彬，中藥多糖的化學與藥理M.2005年6月第一版：2762778 劉棟，錢建亞，卜敏.香菇多糖抗腫瘤作用研究現狀J.食用菌. 2003, 25, (2): 71-949 周愛武，葛志東等，香菇多糖的免疫調節作用J.中國藥理學通報.1995,11(2):15715810 楊勝利,劉敏,錢俊青，香菇多糖酶催化酯化技術及其抗病毒活性研究J.生物質化學工 程.2009，4