1、實驗四實驗四 植物組織滲透勢測定（質(zhì)壁分離法）植物組織滲透勢測定（質(zhì)壁分離法）(2學(xué)學(xué)時時)目的要求目的要求 、觀察植物組織在不同濃度下細胞質(zhì)壁分離產(chǎn)生過程； 、掌握質(zhì)壁分離法測定植物組織滲透勢的原理。 當(dāng)植物組織細胞內(nèi)的汁液與其周圍的某種溶液處于滲透平衡狀態(tài)，植物細胞內(nèi)的壓力勢為零時，細胞汁液的滲透勢就等于該溶液的滲透勢。該溶液的濃度稱為等滲濃度。代入公式即可計算出滲透勢。實驗一實驗一 植物組織滲透勢測定（質(zhì)壁分離法）植物組織滲透勢測定（質(zhì)壁分離法）(2學(xué)學(xué)時時)實驗方法實驗方法 質(zhì)壁分離法 實驗儀器實驗儀器 顯微鏡、載玻片及蓋玻片、鑷子、刀片、移液器等。 實驗一實驗一 植物組織滲透勢測定（

2、質(zhì)壁分離法）植物組織滲透勢測定（質(zhì)壁分離法）(2學(xué)學(xué)時時)實驗操作方法實驗操作方法 1、配制各種濃度的蔗糖溶液（0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/L） 2、剝?nèi)⊙笫[鱗莖外表皮（0.5cm ） 3、迅速投入各種濃度的蔗糖溶液中（5-10min） 4、低倍顯微鏡觀察并記錄質(zhì)壁分離的相對程度 5、確定使細胞發(fā)生初始質(zhì)壁分離的（初始質(zhì)壁分離的濃度）2實驗一實驗一 植物組織滲透勢測定（質(zhì)壁分離法）植物組織滲透勢測定（質(zhì)壁分離法）(2學(xué)時學(xué)時)6、計算滲透勢 細胞滲透勢 R為氣體常數(shù)=0.083105/LP/molK。 T為絕對溫度，單位K，即273+t，t為實驗濕度。 I為解離系數(shù)，蔗糖為1

3、。 C為等滲溶液的濃度，單位為mol/L。 則： s =-0.083105(273+t)1C實驗要點實驗要點 1、撕下的表皮組織必須完全浸沒于溶液中 2、選用有色素的洋蔥鱗莖外表皮實驗效果較好s =iCRT蔗糖摩爾濃度（蔗糖摩爾濃度（mol/L）滲透勢（滲透勢（P）質(zhì)壁分離的相對質(zhì)壁分離的相對程度程度（%）0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 實驗人實驗人 日期日期 材料名稱材料名稱 實驗時室溫實驗時室溫 25 實驗五實驗五 植物組織水勢的測定植物組織水勢的測定 （小液流法）（小液流法） 1.了解測定植物組織水勢的方法及其優(yōu)缺點； 2.掌握用小液流法測定植物組織水勢的方法。 一、實

4、驗?zāi)康囊弧嶒災(zāi)康?當(dāng)植物組織與外液接觸時，如果植物組織的水勢低于外液的滲透勢（溶質(zhì)勢），組織吸水、重量增大而使外液濃度變大；反之，則組織失水、重量減小而外液濃度變小；若兩者相等，則水分交換保持動態(tài)平衡，組織重量及外液濃度保持不變。根據(jù)組織重量或外液濃度的變化情況即可確定與植物組織相同水勢的溶液濃度，然后根據(jù)公式計算出溶液的滲透勢，即為植物組織的水勢。二、實驗原理二、實驗原理 溶液滲透勢的計算： s = - iCRT 式中：s 溶液的滲透勢，以 MPa 為單位。 R 氣體常數(shù)，為 0.008314 MPaL/（molK ）。 T絕對溫度，即 273 + t 。 C 溶液的質(zhì)量摩爾濃度，以 mo

5、l/kg 為單位。 i 為解離系數(shù)，蔗糖為 1 。 三、實驗材料、試劑與儀器設(shè)備三、實驗材料、試劑與儀器設(shè)備 （一）實驗材料（一）實驗材料植物葉片或洋蔥鱗莖。 （二）試劑（二）試劑 1 甲烯藍粉末。 2 蔗糖溶液：包括 0.20 、 0.3 、 0.4 、 0.5 、 0.6 mol/L 5種不同質(zhì)量摩爾濃度的溶液。（三）儀器設(shè)備（三）儀器設(shè)備 指形管10支，毛細吸管5支，培養(yǎng)皿，打孔器，剪刀 l 把，鑷子 1 把，解剖針1把。 四、實驗步驟四、實驗步驟 取干燥潔凈的指型管10支，毛細吸管5支，編號貼標(biāo)簽，按序號排好。 1. 編號貼標(biāo)簽編號貼標(biāo)簽 2. 打取、浸泡葉片打取、浸泡葉片 取待測樣品

6、的功能葉數(shù)片，用打孔器打取小圓片約 60 片，放在培養(yǎng)皿中，混合均勻。用鑷子分別把 5 8 個小圓片放到盛有 4 mL不同質(zhì)量摩爾濃度蔗糖溶液的指形管中，浸沒葉片，蓋緊瓶塞，放置 30 min ，并不斷輕搖小瓶，以加速水分平衡（如溫度低時可延長放置時間）。3. 染染色色到預(yù)定時間后，用解剖針尖蘸取微量甲烯藍粉末，加入各指形管中，并搖動，使溶液染色均勻。 4. 測定測定把不同濃度的系列標(biāo)準(zhǔn)液分別倒入對應(yīng)的指形管中，用毛細吸管吸取對應(yīng)編號指型管內(nèi)的有色溶液少許，插入相同編號的小試管溶液中部，輕輕擠出有色溶液一小滴，小心取出毛細管（勿攪動有色液滴），觀察有色液滴的升降情況，并記錄于表 1 中。若有色溶液液滴上升，表示浸過葉片的溶液濃度變小（即植物葉片組織中有水排出），說明葉片組織的水勢大于該濃度溶液的溶質(zhì)勢；若有色液滴下降，則說明葉片組織的水勢小于該濃度的溶質(zhì)勢；若有色小液滴靜止不動，說明葉片組織的水勢等于該濃度溶液的溶質(zhì)勢。若在前一濃度溶液中下降，而在后一濃度中上升，則植物組織的水勢可取二種濃度溶液的溶質(zhì)勢的平均值。五、實驗結(jié)果五、實驗結(jié)果分別測定不同濃度中有色液滴的升降，找出與組織水勢相當(dāng)?shù)臐舛取Ｓ涗泴嶒灂r的溫度，根據(jù)原理中公式）計算出組織的水勢。六、注意事項六、注意事項 1. 所取材料在植株上的部位要一致，打取葉圓片要避開主