布洛芬含量測定方法綜述布洛芬的概況布洛芬（Ibuprofen，簡稱IB），是一種非甾體抗炎藥，具有鎮痛、抗炎、解熱等作用，其作用機制主要通過對環氧酶的抑制而減少前列腺素的合成，從而降低神經痛覺的敏感性，同時通過下體溫調節而起解熱作用。該藥適用于多種關節炎、非關節性的各種軟組織疼痛、急性輕中度疼痛等。其分子式：C13H18O2 分子量：206.28 化學名：2-甲基-4-(2-甲基丙基)苯乙酸 結構式： 布洛芬的存在形式有多種多樣，如：布洛芬膠囊、布洛芬片 、布洛芬緩釋膠囊、布洛芬緩釋片、布洛芬混懸液、布洛芬顆粒、布洛芬軟膠囊等。布洛芬現有的測定方法目前已有檢測方法：分光光度法，高效液相色譜法，原子吸收法等。本文就以布洛芬片為例對布洛芬含量測定方法做一個簡單的綜述。1.紫外分光光度法 布洛芬片含量測定方法，中國藥典2005年版采用的中性乙醇作溶劑，用氫氧化鈉保準溶液進行滴定。此用紫外分光光度法對布洛芬片進行含量測定，方法簡潔，結果精確。效果也較為理想。1.1儀器、試劑與藥品日本島津UV2100紫外分光光度儀，METTLER AE-240型電子天平；布洛芬原料（經滴定法測定含量為100.6%）；布洛芬片（湖北亨迪藥業有限公司）；試劑為分析純。1.2方法與結果1.2.1 測定波長的選擇 取布洛芬原料藥25mg，置100ml量瓶中，加0.4%的氫氧化鈉溶液溶解并稀釋至刻度，制成0.25mg/ml的溶液。濾液在紫外分光光度計下235nm300nm掃描,在265nm與273nm波長處有最大吸收，在245nm與271nm波長處有最小吸收，259nm的波長處有肩峰，與中國藥典2005版描述一致。本方法在265nm波長處測定吸收度。1.2.2 標準曲線的制備 精密稱布洛芬原料約500mg置100ml量瓶中，加0.4%的氫氧化鈉溶液并稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取續濾液2、4、6、8、10ml分別置100ml量瓶中，加0.4%的氫氧化鈉溶液稀釋至刻度搖勻，照分光光度法分別在265nm波長處測定吸收度，并繪制標準曲線。見圖1： 按最小二乘法計算回歸方程為A=-0.0229 +1.857C（mg/ml）， r=0.9995 ， 本品在0.10.5（mg/ml）時吸收度和溶液濃度呈良好的線性關系。 1.2.3溶液穩定性試驗 取1 項下的溶液分別在室溫下放置0小時、1小時、2小時、4小時后再進行吸收度測定， 結果基本不變。1.2.4 回收率實驗 精密稱取本品原料200mg，共5份，分別加入處方量中的各輔料制成模擬布洛芬片， 混勻。精密稱定， 精密稱取約相當于布洛芬25mg， 置100ml量瓶中， 加0.4%氫氧 化鈉溶液溶解并稀釋至刻度， 搖勻， 過濾。濾液在265nm波長處測定吸收度(A) ， 根據回歸方程求出濃度并計算回收率。結果見表1 。 1.2.5 樣品測定 取本品20片出去糖衣，精密稱定，硯細，精密量取約相當于布洛芬25mg，按，回收率測定步驟，稀釋樣品，測定吸收度，按回歸方程計算含量。結果與滴定法比較，結果見表2：小結 紫外分光度法測定布洛片的含量，方法簡便，快速，結果 準確可靠，可以推廣使用。2.高效液相色譜（HPLC）法2.1 儀器與試藥Series型高效液相色譜儀，SSI500紫外檢測器，色譜柱： AgilentC8柱(150mm4.6mm，5um) ;布洛芬對照品(中國藥品生物制品檢定所,批號0179-9702) ;乙腈為色譜純,磷酸為分析純，水為超純水；布洛芬片(市售品) 。 2.2方法與結果 2.2.1色譜條件 色譜柱 ：AgilentC8柱(150mm4.6mm，5um);流動相：乙腈-0.01mol/L磷酸溶液（40：60）;檢測波長：220nm；流速：1.0ml/min；進樣量：10ul;理論板數按布洛芬峰計算應不低于1000。2.2.2 對照品溶液的制備 取經五氧化二磷干燥器內減壓干燥至恒重的布洛芬對照品適量， 精密稱定， 加6.%甲醇溶解并稀釋制成1ml中約含0.80mg的溶液，即得。2.2.3 樣品溶液的制備 取本品20片，去糖衣，研細，精密稱取細粉適量(約相當于布洛芬0.2g) ， 置50ml量瓶中，加甲醇30ml超聲10min使溶解，加水至刻度,搖勻，濾過，精密量取續濾液2ml,置10ml量瓶中， 加60%甲醇溶液至刻度，搖勻,即得。 2.2.4 空白干擾實驗 按處方比例和工藝 ，制成不含布洛芬的陰性供試品。進行測定，在與樣相同保留時間處未出現色譜峰， 對測定無干擾( 見圖 1 ) 。 2.2.5 線性關系 精密量取對照品約100mg,精密稱定，置50ml量瓶中,加60%甲醇15ml超聲10min使溶解。加60%甲醇溶液至刻度，搖勻。精密量取該溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0分別至于10ml量瓶中，各用60%甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻。進樣10ul，記錄色譜圖。以峰面積（A）為縱坐標，濃度（C）為橫坐標繪制標準曲線。得回歸方程為：A=35865.61C+2395.21，r=0.9998（n=7）結果表明，布洛芬濃度在2001400ug/ml范圍內線性關系良好。2.2.6 精密度實驗 精密量取對照品溶液(0.8mg/ml)10ul， 按上述色譜條件重復進樣5次,結果布洛芬峰面積RSD為0.73。2.2.7 重復性實驗 取同批樣品6份，照“樣品測定”項下操作，測得樣品中布洛芬含量平均值為99.2 ，RSD為1.1 5 ( n=6 )，表明本法重復性良好。2.2.8 回收率試驗 采用加樣回收試驗法。取已知含量的樣品適量9份 ，分別加入布洛芬對照品相當于樣品中已知含量的80，100，120各3份，照樣品測定項下方法測定 ，計算含量，結果見表 1 。2.2.9 穩定性實驗 取同批樣品溶液分別于0，2，4，6，8，10h后進樣測定，測得布洛芬含量為98.5 ，RSD為0.89。結果表明，布洛芬溶液在10h內穩定。2.2.10 樣品測定HPLC法 分別精密量取對照品溶液和樣品溶液 各 10ul， 注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，記錄峰面積,以外標法計算 3 批樣品中布洛芬含量，結果見表2。UV法 取本品20片，除去糖衣后，精密稱定，研細，精密稱取適量( 約相當于布洛芬0.5g) ,加中性乙醇20ml ，振搖溶解，用垂熔玻璃漏斗濾過，容器與濾器用中性乙醇，洗滌4次，每次10ml，洗液與濾液合并 ，加酚酞指示液5 滴，用氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L) 滴定，測得布洛芬的含量，結果見表2： 3 單掃描示波極譜法 3.1 儀器與試劑儀器 ：JP-303型極譜分析儀（成都儀器廠）。三電極體系：工作電極-滴汞電極，參比電極-飽和甘汞電極，對電極-鉑絲。LK98BI微機電化學分析系統（天津蘭力科化學電子高技術有限公司）三電極體系：工作電極-懸汞，參比電極-飽和甘汞電極，對電極-鉑絲。LK98A電極工作站。試劑：布洛芬（湖北金龍福藥業有限公司）標準液：1.010-3mol/L。準確稱0.0206g布洛芬，用少量乙醇溶解，用水定容在100ml容量瓶中；K2S2O8（北京化學試劑三廠）溶液：0.1mol/L；HAc-NaAc(pH=4.2)緩沖溶液：0.2mol/L，取0.2mol/L HAc和0.2mol/L NaAc按2.77：1（V/V）混合配制。其余試劑均為分析純，實驗用水為二次蒸餾水。3.2 實驗方法 加入5ml HAc-NaAc(pH=4.2)緩沖溶液，0.5ml布洛芬標準溶液于比色管中，加水稀釋至刻度（12.5ml）搖勻，轉移至電解池中。于-0.8-1.4V作線性掃描，掃描速率為100mV/s。靜止時間為2s。記錄在-1.06V處的極譜波的二階倒數峰峰電流。循環伏安法實驗由LK98BII型微機電化學分析系統完成。結果1.在測量布洛芬極譜催化波的電位范圍內為了抑制底電流的影響，本文采用二階導數技術記錄極譜圖，峰形尖銳，容易準確測量。其單掃描示波極譜圖如圖1所示。a. 0.08 mol/L HAc-NaAc(pH=4.2)緩沖溶液（Buffer）b. a+2.010-7mol/L布洛芬（Ibuprofen）c. b+0.1 mol/L K2S2O8圖1 布洛芬二次導數單掃描極譜圖2校準曲線及檢出限 在本文所選定最佳支持電解質中，布洛芬催化波的二次導數峰電流ip與其濃度在4.010-85.010-7mol/L范圍內呈線性關系，其線性方程為：ip/nAs-2=-102.3+6.21010 C (mol/L)，相關系數r=0.9980 (n=8)。檢測限為2.010-8mol/L。10次平行測量2.010-7mol/L布洛芬含量的RSD為2.2 %。3加標尿樣回收率的測定 準確移取一健康人尿樣若干份1ml于10ml容量瓶中，分別加入適量布洛芬標準溶液，按實驗方法作回收實驗見表1，結果滿意，表明該方法有可能用于生物樣品的測定。 表1 回收實驗Table1 Recovery tests (n=4)4. 離子色譜法4.1 儀器與試劑 2010i型離子色譜儀(美國戴安公司),C2R3A色譜數據處理機(日本島津公司)。主要試劑:布洛芬、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氫氧化鈉均為分析純。去離子水:電導率約為0.2S/cm。樣品為江西贛江制藥有限公司生產的布洛芬片4.2色譜條件HPLC2AS4分離柱;流動相:1.5mmol/L碳酸鈉-1.5mmol/L碳酸氫鈉;檢測器:紫外檢測器;檢測波長:215nm。4.3樣品的提取 取布洛芬片1片,準確稱量后置入碾缽中碾碎,準確稱取0.006g左右置入一50mL燒杯中,加30mL淋洗液入燒杯中,超聲提取30min,用0.45m微孔濾膜過濾(壓濾),用淋洗液洗過濾系統3次,定容于50mL容量瓶,準確移取10mL所配溶液于另一50mL燒杯中,用淋洗液稀釋到刻度待測。4.4淋洗液的選擇布洛芬在堿性溶液中離解成負一價的陰離子,所帶的電荷較低,其上雖有苯環,但由于其上的苯環距負電荷中心很遠,不能與負電荷中心共軛,故帶電荷部分不容易極化變形,與陰離子交換劑的親和力較弱,則選用濃度較低的1.5mmoL/L碳酸鈉-1.5mmoL/L碳酸氫鈉淋洗液,分離效果良好4.5工作曲線和檢出限 在選定的條件下,布洛芬在濃度140mg/L范圍內,布洛芬濃度與峰高(mm)線性關系良好,回歸方程為y=0.1067x-0.1384,相關系數為0.9995。在選定的條件下,布洛芬的最低檢出濃度為2.4210-5g/L4.6樣品的檢測及加入回收率試驗 將處理好的樣品在給定條件下進樣,記錄色譜圖,7次平行測定,RSD等于0.92%。做加入回收率試驗,結果見表1。此布洛芬片劑的標示量為每片含0.1g布洛芬,中華人民共和國藥典1規定布洛芬的含量應為標示量的98%105%,以上結果均在規定范圍以內。5. 毛細管氣相色譜法1儀器與試藥 儀器：GC900B高性能氣相色譜儀（上海天普分析儀器有限公司）；N2000色譜工作站；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中國公司）；AS-01無油隔膜真空泵（北京優晟聯合科技有限公司）；SB25-12D超聲波清洗機（寧波新芝生物科技股份有限公司）；RE-501旋轉蒸發儀（深圳市朗誠實業有限公司）；MEM-MERT真空烘箱（上海人和科學儀器有限公司）；Kertone實驗室超純水機（科爾頓中國有限公司）；H.S11-1電熱恒溫水浴鍋（上海昨非實驗室設備有限公司）；SOCOREX可調容量移液器（北京桑翌實驗儀器研究所）；AHS-6890自動頂空進樣器（北京華儀三譜儀器有限責任公司）。 1.2色譜柱：石英毛細管柱（0.53mm1.0m，30m，SE-30）。 1.3對照品：咖啡因對照品(中國藥品生物制品檢定所)、布洛芬對照品(中國藥品生物制品檢定所)。 1.4試劑：水為純化水，其它試劑均為分析純。 1.5試藥：布洛芬膠囊（北京萬輝雙鶴藥業有限責任公司，國藥準字H11022549）2測定方法確定 2.1色譜條件石英毛細管柱（0.53mm1.0m，30m，SE-30）；載氣：氮氣；汽化室溫度220；檢測器溫度260；柱溫200。進樣量：1l，分流比1:8。2.2對照品溶液的制備2.2.1內標液的配制。取咖啡因10mg置于10ml容量瓶內，加甲醇溶解并定容至刻度（每毫升含1mg咖啡因），即得。2.2.2對照品溶液的制備。精密稱取布洛芬對照品50mg至25ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容，即得。2.2.3供試品溶液的制備。取裝量差異項下的供試品內容物，研細，精密稱取（相當于布洛芬20mg），置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇10mL，密塞，精密稱定重量，超聲處理(240W，40kHz)30min，放冷,精密稱定，用甲醇補足重量，搖勻，濾過。取續濾液，即得。2.3專屬性試驗依照處方取除布洛芬，按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，照2.2.3項下供試品溶液的制備方法制成陰性液，依上述方法測定，結果在布洛芬出峰處陰性液無色譜峰，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。2.4精密度試驗精密稱取布洛芬對照品20mg至10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容。照上述色譜條件，精密吸取1l，連續進樣6次，記錄峰面積。結果，RSD=0.99%，表明本方法精密度良好。2.5對照品的線性考察分別精密稱取布洛芬對照品5.0、10.0、20.0、40.0、80.0mg至10ml容量瓶中，分別加入內標液1ml，加甲醇溶解并定容。取上述溶液，分別精密上述溶液吸取1L，注人氣相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以布洛芬與內標峰面積比值(Y)為縱坐標，濃度(X)為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程為：y=0.031x一1.721（r=0.99996）。結果表明，布洛芬在0.58mgmL-1范圍內呈良好的線性關系。2.6重現性試驗稱取同一批的布洛芬樣品6份，按測定方法項下的方法制備供試品溶液，測定含量，并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.98%，結果表明此方法的重現性良好。2.7準確度試驗取對照品適量，加入到樣品中，加入量分別相當于樣品含量的80、100、120。取模擬片照“含量測定”項下方法試驗，計算回收率為99.6%，RSD為0.93%。 2.8樣品穩定性試驗取同一批布洛芬樣品，按2.2.3項下的供試品制備方法制備供試品，將供試品置室溫下放置，分別于第0、1、2、3、4、5小時，精密吸取供試品溶液10?l注入液相色譜儀中，記錄色譜圖。測定布洛芬中布洛芬的RSD=0.63%。結果表明供試品5小時內穩定。2.9樣品含量測定依照上述含量測定方法，測定布洛芬三批樣品中布洛芬的含量，結果三批樣品的含量分別為98.9%、99.1%、98.5% 小結 測定布洛芬多采用酸堿滴定法測定，酸堿滴定法專屬性不強，采用毛細管氣相色譜法具有較強的專屬性。酸堿滴定法與毛細管氣相色譜法具有相似的精密度和準確度，但毛細管氣相色譜法方法簡便。本實驗表明此方法分離效果好、方法簡便、快捷、準確,、專屬性好，可用于布洛芬片中布洛芬的含量測定。6高效毛細管電泳11儀器 LUMEXCAPEL105型毛細管電泳儀，LUMEXLtd，Russia；ChromSpec15x數據處理工作站及紫外檢測器（190400nm）；雙光束紫外可見分光光度計TU1901，北京普析通用儀器責任公司；未涂層熔融石英毛細管，內徑為75m65cm（有效長度57cm），河北永年銳灃色譜器件公司；KQ250B超聲波清洗儀昆山市超聲儀器公司。12藥品及試劑對硝基苯酚（CP），其他試劑均為分析純。實驗用水為二次蒸餾水，實驗中所有溶液進入毛細管之前均用045m纖維素濾膜過濾。芬必得布洛芬緩釋膠囊，中美天津史克制藥公司；布洛芬片，江西中興漢方藥業公司；布洛偽麻分散片，河北冀衡藥業公司；倍得芬布洛芬軟膠囊，石藥集團恩必普藥業公司；布洛芬混懸液，揚州市三藥制藥公司。布洛芬標準儲備液：準確稱量50mg布洛芬對照品，用適量的甲醇溶解，于50mL棕色容量瓶中定容，配制成1000mgL1標準儲備液置于4冰箱中保存13實驗方法131毛細管沖洗方法每次進樣前依次用水沖洗10min，01molL1NaOH溶液沖洗10min，再用水沖洗10min，最后用運行緩沖溶液沖洗5min，兩次測定間用運行緩沖液沖洗毛細管3min。132CE測定參數及條件檢測波長：220nm；壓力進樣：30mbar；進樣時間：15s；分離電壓：20kV；溫度：25；緩沖溶液：10mmolL1的硼砂（pH92）；內標：20mgL1的間苯二酚1.4電泳樣品前處理膠囊、片劑型藥品：取一粒布洛芬緩釋膠囊，研碎轉移至燒杯中，稱取02211g，適量甲醇溶解，轉移至1000mL容量瓶中，并加入20mL濃度為1gL1的間苯二酚，用超純水定容，用濾膜過濾，取濾液作為分析液。溶液型藥品：量取002mL的混懸液于100mL的容量瓶中，加入200mL濃度為1gL1的間苯二酚，用超純水定容，用濾膜過濾，取濾液作為分析液2結果與討論21檢測波長與內標物的選擇取布洛芬標準液在190400nm范圍內掃描，其紫外吸收光譜見圖1。從圖1可知，目標物在220nm處有特征吸收峰，因而選220nm為檢測波長。為減少進樣誤差等因素的影響，提高定量分析的精密度，考察了苯酚、間苯二酚、焦性沒食子酸、對硝基苯酚的電泳行為，發現在10mmolL1的硼砂緩沖溶液中，間苯二酚的電泳淌度與被測組分相近，吸收靈敏度高，峰形好，是測定布洛芬的良好內標線性范圍、檢測限及精密度分別配制濃度為10、50、100、200、400mgL1的布洛芬溶液（內含20mgL1的內標間苯二酚），在上述選定條件下進行電泳分析。以布洛芬的相對峰面積y（即被測物的峰面積與內標物的峰面積之比）對其質量濃度（mgL1）進行線性回歸分析。實驗發現，布洛芬在10400mgL1的濃度范圍內具有良好的線性關系，線性回歸方程為：y=0038500966，相關系數r=09997。以噪音的3倍（S/N=3）推算得布洛芬的檢測限為053mgL1。在上述最佳的條件下，取200mgL1布洛芬的混合液（內含有20mgL1的間苯二酚）連續進樣7次，遷移時間和峰面積的相對標準偏差（RSD）如表1樣品分析與加標回收率取布洛芬片、布洛偽麻分散片、布洛芬混懸液、布洛芬軟膠囊、布洛芬緩釋膠囊，經過14步驟預處理，添加內標物（進樣濃度為20mgL1），配制成一定濃度的分析液。按實驗方法測定，對照品和部分藥品試樣毛細管電泳譜圖見圖2，各藥品目標物測定結果如表2。同時進行回收率試驗，結果如表3通過實驗測得布洛芬的平均含量為所測藥品標示量的989%1048%，所測的藥品含量與藥品說明書基本一致。但與高效液相色譜法7相比，樣品加標回收率波動較大。實驗證明，HPCE作為處于不斷發展中的定量方法，與高效液相色譜一樣，可以用于藥品中布洛芬的含量測定參考文獻1涂逢樟，董雁，項小燕，姚輝梅，許智超。高效毛細管電泳電堆積柱上富集法分離與測定5種藥品中布洛芬的含量 2010年38卷第8期 廣州化工/view/46e9c46d1eb91a37f1115ca8.html2.趙鑫，趙德春。毛細管氣相色譜法測定布洛芬膠囊的含量 科技論壇/view/a5fbdb4dcf84b9d528ea7aec.html3.馬淮凌，曹廣秀，王曉娟 單掃描示波極譜法測定布洛芬4.柏學敏 文麗麗 尹傳明，紫外分光光度法測定布洛芬片含量 黑龍江醫藥heilongjiang medicine journal vol.20 No.1 2007 /view/721fe2bdc77da26925c5b0de.html5.傅厚暾,周嬌離子色譜法分