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文檔簡介

ABI7300使用方法-絕對定量1 打開電腦，待電腦完全打開后打開熒光定量機器，預熱十分鐘，期間布板子2 File-new 新建一個程序，進入界面做絕對定量時 ASSay 選擇 Standard Curve（Absolote Quantitation）做相對定量時 選擇 ddCt（Relative Quantitation）Plate做完相對定量時分析數據選擇ddCt（Relative Quantitation）Study 其他不用改Plate Name 一欄給板子命名 點擊“下一步” 不要點擊“完成”3初次做時選擇“New Detector”添加引物Name 一欄命名基因的名字 Reporter Dye 一欄選擇FAM Quencher Dye一欄選擇none Color一欄自己選顏色 其他內容不選選擇Add 將命名的引物添加進去 以后做實驗就可以直接添加了右上角的Passive Reference 選擇 none (切記)點擊“下一步”4 布板 樣品選擇UnKnown標準質粒選擇 Standard點擊完成4進入界面 點擊Setup-Plate 雙擊樣品加樣孔 在彈出的界面里 對樣品進行命名 其他不填 同理 雙擊標準質粒加樣孔 Sample Name 對質粒命名 注意在Quantity一欄寫上質粒的拷貝數 （切記）5 完成后點擊Insteument步驟程序 第一步 95攝氏度 十分鐘第二步 95攝氏度 5秒 65攝氏度 34秒 循環 40次 第三步 溶解曲線 修改Sample Volume 為20ul DateCollection 為Stage2，Step2（65 0:34）（熒光收集信號 切記要從循環那步開始，切記切記）6設好之后將程序保存 7 整完之后開始Start待出現運行時間后方可離開8 運行結束后 分析數據 點擊Results 里的Standard Curve 看標準曲線 可以將不正常的樣舍棄 打開Results里的 Plate 點擊

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