分子生物學1、 單選題1、當一個真核基因處于活躍（轉錄）時（A）A.其啟動子一般不帶核小體 B.整個基因一般不帶核小體C.基因重的外顯子一般不帶核小體 D.基因中的內含子一般不帶核小體2、（C）是能夠我復制的小型環狀DNAA.內含子 B.外顯子 C.質粒 D.轉座子3、下列關于轉座子的描述不正確的是（A）A.所有的轉座子均有IS序列 B.所有的IS元件中均包含有編碼轉座酶的基因序列C.IS元件末端為短的反向重復序列 D.轉座可能會引起基因組DNA重排4、乳糖操縱子模型中，真正起誘導作用的是（C）A.胞外的乳糖 B.胞內的乳糖 C.別構乳糖 D.半乳糖5、以下（D）不是原核生物基因表達的轉錄后調控機制。 A.稀有密碼子和偏愛密碼子的使用 B.重疊基因對翻譯偶聯現象的調控C.魔斑核苷酸水平對翻譯的調控 D.增強子的影響6、關于蛋白質翻譯運轉同步機制描述錯誤的是（D）A.蛋白質定位的信息存在于該蛋白自身結構中 B.絕大部分被運入內質網內腔的蛋白質都帶有一個信號太C.僅有信號肽不足以保證蛋白質運轉的發生D.蛋白質達到靶位置的時候，信號肽必須切除7、地球生命物質最早出現的可能是（A）A. RNA分子 B. DNA分子 C.蛋白質分子 D.質粒8、關于酵母雙雜交技術，（D）描述是正確的。A.用于研究DNA與DNA的相互作用 B.用于研究DNA與蛋白質的相互作用 C.用于研究DNA與RNA的相互作用 D.用于研究蛋白質與蛋白質的相互作用9、原核細胞信使RNA含有幾個其功能所必需的特征片段，它們是（D） A.啟動子，SD序列，ORF，莖環結構 B.啟動子，SD序列，ORF，polyA，莖環結構C.轉錄起始位點，SD序列，ORF，polyA，莖環結構 D. .轉錄起始位點，SD序列，ORF，莖環結構10、真核生物染色體組蛋白的所不具有的特征有（C）A. 進化上的極端保守性 B.組蛋白H5富含賴氨酸 C.有組織特異性 D.肽鏈上氨基酸分布的不對稱性11、如果有一段DNA產生了+1的移碼突變，則能矯正的是（B）A.突變型氨酰tRNA合成酶 B.有突變型反密碼子的tRNA C.有切割一個核苷酸的酶 D.有四個堿基長的反密碼子的tRNA12、內固醇激素的受體蛋白分子不具有的區域是（C）A. 激素結合區 B. 轉錄激活區 C.操縱區 D.DNA結合區13、在什么情況下乳糖操縱子的轉錄活性最高（A）A. 高乳糖、低葡萄糖 B. 低乳糖、低葡萄糖 C.低乳糖、高葡萄糖 D.高乳糖、高葡萄糖14、第三代DNA遺傳標記，可能也是最好的遺傳標記方法是（D）分析法A.限制性片段長度多態性（RFLP） B. 小衛星DNA C.微衛星DNA D.但核苷酸多態性（SNP）15、以下（C）對于熱激活蛋白誘導的基因表達的說法是錯誤的。A.真核細胞的熱休克蛋白在細胞的正常生長和發育中起重要作用B. Hsp70的主要功能是參與蛋白質的代謝 C.熱休克蛋白參與靶蛋白活性和功能的調節，是靶細胞的組成部分 D.一般稱熱休克蛋白為分子伴侶或伴侶蛋白2、 多選題1、人工染色體含有必需的成分為（ ABD ）A.著絲粒 B. 端粒 C.質粒 D.復制起始點2、在遺傳信息表達的過程中，模版DNA序列mRNA序列蛋白質氨基酸序列三者之間的關系是（BC）A. 3553NC B. 5335 NC C. 3553CN D. 5335 CN 3、 典型的原核生物啟動子組成為（ ABC ）A. -35區 B.-10區 C.轉錄加起點 D.-35和-10區之間的16-19bp區間4.關于鋅指結構描述正確的是（ ACD ）A.是一類典型的反式作用因子DNA識別/結合域B.氨基端20-30個富含堿性氨基酸結構域與DNA結合C.其Cys和His殘基參與了與Zn2+的結合D.鋅指環上突出的Lys和Arg殘基參與DNA的結合5.增強子（ AB ）A.存在于啟動子上游或下游B.其增強效應有嚴密的組織和細胞特異性C.有基因專一性D.不受外部信號的調控3、 判斷題1. 高等真核生物基因中的內含子通常比外顯子大很多T2. 聚合酶鏈式反應（PCR）中，三個核心步驟的先后順序是“退火-變性-延伸”F3. 復雜轉錄單位的原始轉錄產物能通過多種不同方式加工成兩個或兩個以上的mRNA T4. 核不均一RNA是mRNA和rRNA的前提而不是tRNA的前體 F5. 反式作用因子有兩個功能域，一個是轉錄激活結構域，一個是DNA結合結構域 T6. 人類基因組計劃的成果中的核苷酸序列圖，其實是分子水平上最詳盡的物理圖 T7. 蛋白質胞內降解的泛肽途徑和消化道蛋白酶的作用相似，均不需要耗能 F8. C值通常是指一種生物雙倍體基因組DNA的總量 F9. RNA剪切體是核內RNA與相應核蛋白組成的，是RNA剪接的場所。T10. 乳糖操縱子不僅需要正調控，也需要負調控；阻遏物起負調控作用，CAP-cAMP起正調控作用 T11. 基因組文庫是將某種生物細胞的整個基因組DNA切割成大小合適的片斷，并與適當的載體連接，引入相應的宿主細胞中保存和擴增的技術 T12. 組蛋白乙?；ㄟ^降低它對DNA的親和性而提高基因轉錄的活性 T13. 原核生物和真核生物的DNA不都是以半保留復制方式遺傳的 F14. 剪接體是由snRNP和大量的其他的蛋白質分子組成龐大的體系，負責對蛋白質進行修飾T15. 核定位序列（NLS）在介導蛋白質進入細胞核后，通常都要被立即切除 F四、請從A-J中選出最合適的選項與1-10的術語匹配1. 組蛋白 I A. 安慰性誘導物2. HnRNA G B. 2015年諾貝爾化學獎3. 操縱子 C C. 多順反子4. Xist J D. 內含子剪接5. 擬南芥 H E. DNA結合蛋白6. 套索樣結構 D F. HSP707. 分子伴侶 F G. mRNA8. 凝膠阻滯實驗 E H. 模式植物9. DNA修復機制 B I. 核小體10. IPTG A J. X染色體五、問答題1.試比較真核生物與原核生物基因組DNA有何不同？答：真核生物基因組特征：具有致密的染色體結構，且染色體數量多，結構復雜；基因組大，結構復雜，DNA有多個復制起點，每個基因組中含有數萬個基因；DNA順序可分為非重復序列、中度重復和高度重復序列；真核基因具有不連續性；來源相同，結構相似，功能相關的基因常能組成單一基因簇或基因家族；還具有細胞器基因。原核基因組特征：染色體是由一個核酸分子（DNA或RNA）組成的，DNA（RNA）呈環狀或線性；功能相關的基因大多以操縱子形式出現；蛋白質基因通常以單拷貝的形式存在，且一般是連續不間斷的；編碼RNA的基因通常是多拷貝的。2.請畫出大腸桿菌乳糖操縱子的結構示意圖。當大腸桿菌lacZ-或lacY-突變體生長在含乳糖的培養基上時，lac操縱子剩余的基因沒有被誘導，解釋是何原因？大腸桿菌乳糖操縱子是由三個結構基因A、Z和Y，以及啟動子、操縱子及阻遏子等構成。3個結構基因個決定一種酶：Z基因編碼-半乳糖苷酶，Y基因編碼-半乳糖苷透過酶，A基因編碼-半乳糖苷乙?；D移酶。Z編碼的-半乳糖苷酶是一種-半乳糖苷鍵的專一性酶，除能將乳糖水解成葡萄糖和半乳糖外，還能水解其他-半乳糖苷（如苯基半乳糖苷）。Y編碼-半乳糖苷透過酶的作用是使外界的-半乳糖苷（如乳糖）能透過大腸桿菌細胞壁和原生質膜進入細胞內。A編碼-半乳糖苷乙酰基轉移酶的作用是把乙酰輔酶A上的乙?；D到-半乳糖苷上，形成乙酰半乳糖。如果用乳糖作為大腸桿菌生長的唯一碳源和能源，Z基因和Y基因編碼的酶是生長所必需的，Y基因編碼的并非必須。因此大腸桿菌lacZ-或lacY-突變體生長在含乳糖的培養基上時，lac操縱子剩余的基因不會被誘導。3.請畫出大腸桿菌色氨酸操縱子的結構示意圖，簡述其表達調控中的轉錄弱化作用。P256：在大腸桿菌trp operon,前導區的堿基序列包括4個分別以1、2、3和4表示的片段,能以兩種不同的方式進行堿基配對,1 - 2和3 -4配對,或2 - 3配對,3 - 4配對區正好位于終止密碼子的識別區.前導序列有相鄰的兩個色氨酸密碼子,當培養基中Trp 濃度很低時,負載有Trp 的tRNATrp也就少,這樣翻譯通過兩個相鄰色氨酸密碼子的速度就會很慢,當4區被轉錄完成時,核糖體滯留1區,這時的前導區結構是2 - 3配對,不形成3 - 4配對的終止結構,所以轉錄可繼續進行.反之,核糖體可順利通過兩個相鄰的 色氨酸密碼子,在4區被轉錄之前,核糖體就到達2區,這樣使2 - 3不能配對,3 - 4 區可以配對形成終止子結構,轉錄停止.4.簡述重組DNA技術的操作過程，并輔以圖示。目的基因的制備（質粒DNA的提取與純化、電泳檢測目的基因片段PCR、酶切反應） 載體的制備 連接、轉化、篩選、鑒定（包括酶切產物的連接、轉化和篩選） 誘導表達、產物分析5.什么叫PCR？試比較PCR和DNA復制的不同點。聚合酶鏈式反應是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術，它可看作是生物體外的特殊DNA復制，PCR的最大特點，是能將微量的DNA大幅增加。6.請畫出大腸桿菌乳糖操縱子的結構示意圖，并闡述其負控機制和正控機制。在乳糖操縱子調控模型中，負控誘導調節模式是主要的。具體來說，在沒有誘導物，如乳糖、IPTG、ONPG等存在時，LacI基因轉錄產物為阻遏物單體，再結合成四聚體，它們能與O區DNA相結合，從而阻遏基因轉錄，當有誘導物存在時，可使阻遏物變成不能與O區相結合的非活性形式，從而RNA聚合酶可與Lac啟動區相結合，起始基因轉錄。此外，正調控模式也有體現，大腸桿菌中的代謝蛋白cAMP-CRP是激活Lac轉錄的重要成分，當有效應物如葡萄糖存在時，cAMP濃度很低，從而轉錄不能進行，即此調控為正控阻遏調節。六、簡答題1.什么是順式作用原件，請列舉2個。順式作用元件是指對基因表達有調節活性的DNA序列，它作為一種原位順序，其活性只影響與其自身處在同一個DNA分子上的基因；同時，這種DNA序列通常不編碼蛋白質，多位于基因旁側或內含子中。簡單的說，順式作用元件是指影響自身基因表達活性的DNA序列（如轉錄啟動子和增強子）。2.請列出五種RNA，并簡要說明其主要功能。1轉運RNA tRNA 轉運氨基酸 2核蛋白體RNA rRNA 核蛋白體組成成 3信使RNA mRNA 蛋白質合成模板 4不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前體 5小核RNA snRNA 參與hnRNA的剪接 6小胞漿RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白質內質網定位合成的信號識別體的組成成分 7反義RNA anRNA/micRNA 對基因的表達起調節作用 8核 酶 Ribozyme RNA 有酶活性的RNA3.PCR的中文名為什么？簡述PCR的原理。聚合酶鏈式反應DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子拷貝。在實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，加入設計引物，DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。4.請簡述一個編碼基因有不同表達產物的可能機制。一個基因轉錄起始位點的選擇不同可導致產生不同類型的酶；同一個基因，相同的初始mRNA，但由于5端，內含子及3末端等選擇的不同，使成熟的mRNA也不同，結果編碼了功能不同的蛋白。5.簡述tRNA三級結構特點與其功能之間的關系。tRNA三級結構是在二級結構的基礎上經過進一步折疊扭曲形成倒L形。 此結構反映了tRNA的生物學功能，因為tRNA上所運載的氨基酸必須靠近位于核糖體大亞基上的多肽合成位點，而tRNA的反密碼子必須與小亞基上的mRNA相配對，所以兩個不同的功能基團最大限度分離。這個結構很可能滿足了蛋白質合成過程中對tRNA的各種要求而成為tRNA的通式，tRNA的性質由反密碼子決定。該結構形成雙螺旋，堿基配對增加，有利于堿基堆積力的增強，空間位阻效應減小，利于與氨基酸結合，利于實現轉運功能。6.什么是反式作用因子，請列舉2個。反式作用因子是指其基因產物將從合成的場所擴散到其發揮作用的其他場所，游離的基因產物擴散至目標場所的過程為反式作用。調控轉錄的各種蛋白因子總稱反式作用因子。其編碼基因與其識別或結合的靶核苷酸序列不在同一個DNA分子上。如RNA聚合酶。7.什么是轉座子？簡述其遺傳學效應。：轉座是由可移位因子介導的遺傳物質重排現象。轉座時發生的插入作用有一個普遍的特征，那就是受體分子中有一段很短的約3-12bp的被稱為靶序列的DNA會被復制 ，使插入的轉座子位于兩個重復靶序列之間。靶序列的復制可能起源于特定內切酶所造成的粘性末端。 轉座的生物學意義：、轉座引起插入突變；、轉座產生新的基因；、轉座產生染色體畸變；、轉座可引起生物進化，產生新的遺傳性狀引起插入突變：失活、極性突變或者為基因組的某些序列提供轉錄起始的順式元件 引起染色體畸變：染色體的斷裂、缺失和倒位 生物進化的動力：引入新的基因、造成外顯子的移動和改組11. 簡述亮氨酸拉鏈的結構特征。亮氨酸拉鏈結構域通常被定義為一行4-7個周期重復的亮氨酸殘基，其距離大約跨越8個螺旋轉彎，通式為L-x(6)-L-x(6)-L-x(6)-L，有時典型的亮氨酸殘基會被異亮氨酸或纈氨酸所代替。結構分析發現亮氨酸拉鏈由平行的卷曲螺旋型螺旋構成，它們通過亮氨酸側鏈的疏水作用互相纏繞，亮氨酸統一排列在螺旋的一側，而所有帶電荷的氨基酸殘基排在另一側。當2個蛋白質分子平行排列時，亮氨酸之間相互作用形成二聚體，形成“拉鏈”。在“拉鏈”式的蛋白質分子中，亮氨酸以外帶電荷的氨基酸形式同DNA結合。亮氨酸拉鏈的二級結構分析可以發現，該結構域呈“螺旋-環-螺旋”的結構，利于形成同源二聚體。12. 原核生物轉錄后調控的主要機制有哪些？a、mRNA自身結構元件對翻譯起始的調節。b、mRNA穩定性對轉錄水平的影響。c、調節蛋白的調控作用。d、反義RNA的調節作用。e、稀有密碼子對翻譯的影響。f、重疊基因對 翻譯的影響。g、翻譯的阻遏。h、魔斑核苷酸水平對翻譯的影響。13. 簡述大腸桿菌的啟動子結構成分。原核生物啟動子：上游控制元件（UCE）+核心啟動子=擴展的啟動子 UCE:即-40-70區,能與CAP-