細(xì)胞生物學(xué),第一部分 序言 第二部分 招生簡(jiǎn)章&招生目錄&參考書(shū)目深度解析 第三部分 初試科目各章節(jié)知識(shí)點(diǎn)深度剖析 第四部分 真題回顧及其解析 第五部分 結(jié)束語(yǔ),（1）非統(tǒng)考專(zhuān)業(yè)課命題的總體特征； （2）強(qiáng)化課程的指導(dǎo)作用； （3）強(qiáng)化課程授課內(nèi)容與功能概述。,2.1招生簡(jiǎn)章深度解析 2.2招生目錄深度解析 2009年以前的一段時(shí)間以來(lái)，首都師范大學(xué)生命科學(xué)院的招生情況沒(méi)有發(fā)生明顯變化，但2010年首都師范大學(xué)不再招收聯(lián)合培養(yǎng)的學(xué)生。所謂聯(lián)合培養(yǎng)就是學(xué)生仍然屬于首師大的學(xué)生，但要去北京農(nóng)科院，聯(lián)合大學(xué)等學(xué)校進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2010年學(xué)校已經(jīng)取消了聯(lián)合培養(yǎng)招生計(jì)劃，按照常理，學(xué)校2011的新生也將全部在校內(nèi)做實(shí)驗(yàn)。這樣導(dǎo)師的數(shù)量就明顯減少了一部分，但是招生數(shù)量，專(zhuān)業(yè)方向等等沒(méi)有受到太大影響。 2.3初試科目深度解析 生物化學(xué) 普通生物學(xué),生物化學(xué)專(zhuān)業(yè)，總計(jì)包括2本書(shū)： 第一本書(shū)：生物化學(xué) 第二本書(shū)：生物化學(xué) 在本部分當(dāng)中，以書(shū)為單位，按照章節(jié)、知識(shí)點(diǎn)，進(jìn)行內(nèi)容的安排和詳細(xì)的講解。 普通生物學(xué)專(zhuān)業(yè)，總計(jì)包括1本書(shū),第一門(mén)專(zhuān)業(yè)課 生物化學(xué),1.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、糖類(lèi)的作用、元素組成、化學(xué)本質(zhì)、命名及分類(lèi) 作用：能源物質(zhì)、結(jié)構(gòu)成分、信息分子、轉(zhuǎn)變成其他物質(zhì)。 元素組成：C、H、O 化學(xué)本質(zhì)：多羥基酮或者多羥基醛 命名及分類(lèi)：?jiǎn)翁恰⒐烟呛投嗵?2、單糖的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及其衍生物 單糖的結(jié)構(gòu)：鏈狀結(jié)構(gòu)，環(huán)狀結(jié)構(gòu)等。（一般不作為考點(diǎn)出現(xiàn)） 單糖的性質(zhì)： 物理性質(zhì)：旋光性（了解一下），甜度，溶解度。 化學(xué)性質(zhì)：書(shū)中共涉及9種化學(xué)變化。,1）單糖的氧化：醛糖含有游離的醛基，具有很好的還原性。 被弱氧化劑氧化：醛糖酸。（見(jiàn)教材） 被強(qiáng)氧化劑氧化：醛糖二酸。 2）單糖的還原：還原后生成糖醇。 3）形成糖脎 （見(jiàn)教材） 4）形成糖酯與糖醚、糖苷（見(jiàn)教材） 5）單糖脫水 3、其他糖類(lèi)（單糖衍生物、寡糖、多糖等） 肽聚糖：（教材P51）青霉素抑菌的作用機(jī)理。,1.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 1、單糖的性質(zhì)（尤其是化學(xué)性質(zhì)）,2.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 天然脂肪酸的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：骨架的碳原子數(shù)都是偶數(shù)個(gè)，這是因?yàn)樯矬w內(nèi)脂肪酸是以二碳單位（CoA：乙酰形式）從頭合成的。,3.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、氨基酸蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子 （1）蛋白質(zhì)水解：酸水解、堿水解、酶水解（掌握三種具體水解方法及優(yōu)缺點(diǎn)）（見(jiàn)教材P123） （2）氨基酸在中性PH時(shí)，含有一個(gè)正電荷和一個(gè)負(fù)電荷，稱(chēng)為兼性離子。 2、氨基酸的分類(lèi) （1）按照R基的化學(xué)機(jī)構(gòu)將20種常見(jiàn)氨基酸分為：脂肪族，芳香族和雜環(huán)族三類(lèi) A、脂肪族氨基酸：中性氨基酸 含羥基或硫氨基酸 酸性氨基酸及其酰胺 堿性氨基酸 B、芳香族氨基酸 C、雜環(huán)族氨基酸,（2）按照R基的極性性質(zhì)，20種常見(jiàn)氨基酸分為：非極性R基氨基酸、不帶電荷的極性R基氨基酸、帶正電荷的R基氨基酸、帶負(fù)電荷的R基氨基酸。 3、氨基酸的酸堿化學(xué) 氨基酸的兼性離子形式（見(jiàn)教材P130） 氨基酸的解離：氨基酸是一類(lèi)兩性電解質(zhì) 氨基酸的解離常數(shù)（重點(diǎn)） （3）氨基酸的等電點(diǎn)：某一氨基酸處于靜電荷為0時(shí)的pH。（pI） 對(duì)于側(cè)鏈不解離的中性氨基酸：pI=1/2（pKa1+ pKa2 ） （4）氨基酸的甲醛滴定 甲醛的作用（重點(diǎn)） 4、氨基酸的化學(xué)反應(yīng) （1）a-氨基參加的反應(yīng)（4類(lèi)）（見(jiàn)教材P135） （2）a-羧基參加的反應(yīng)（4類(lèi)）（見(jiàn)教材P138） （3）a-氨基和a-羧基共同參加的反應(yīng)（2類(lèi)）（見(jiàn)教材P139）,（4）側(cè)鏈R基參加的反應(yīng) 蛋白質(zhì)的化學(xué)修飾：在較溫和的條件下，以可控制的方式使蛋白質(zhì)與某種試劑（稱(chēng)化學(xué)修飾劑）起特異反應(yīng)，以引起蛋白質(zhì)中個(gè)別氨基酸側(cè)鏈或功能團(tuán)發(fā)生共價(jià)化學(xué)改變。 5、氨基酸的光學(xué)活性和光譜性質(zhì) 蛋白質(zhì)的最大紫外吸收在280nm波長(zhǎng)處 核磁共振（NMR）是一項(xiàng)涉及在外磁場(chǎng)存在下某些原子核吸收射頻能量的波譜技術(shù)。 6、氨基酸混合物的分析分離（見(jiàn)教材P148） （1）分配層析法的一般原理 （2）分配柱層析 （3）紙層析 （4）薄層層析 （5）離子交換層析 （6）氣液層析 （7）高效液相層析（HPLC）,3.2本章重難點(diǎn)總結(jié) （1）氨基酸的書(shū)寫(xiě)，氨基酸的分類(lèi)及氨基酸的化學(xué)性質(zhì)。 （2）氨基酸的分離,4.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、蛋白質(zhì)通論 （1）蛋白質(zhì)的化學(xué)組成和分類(lèi) 蛋白質(zhì)的平均含氮量為16%，凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量： 蛋白質(zhì)含量=蛋白氮*6.25 （2）名詞：?jiǎn)渭兊鞍祝Y合蛋白 （3）蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的組織層次： 一級(jí)結(jié)構(gòu)：多肽鏈的氨基酸序列 二級(jí)結(jié)構(gòu)：多肽鏈借助氫鍵排列成自己特有的a螺旋和B折疊股片段。 三級(jí)結(jié)構(gòu)：多肽鏈借助各種非共價(jià)鍵（非共價(jià)力）彎曲、折疊成具有特定走向的緊密球狀構(gòu)象。 四級(jí)結(jié)構(gòu)：寡聚蛋白質(zhì)中各亞基之間在空間上的相互關(guān)系和結(jié)合方式。 （4）蛋白質(zhì)功能具有多樣性,2、肽 （1）肽和肽鍵的結(jié)構(gòu) 茚三酮、雙縮脲反應(yīng)（見(jiàn)教材P166） 3、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定 （1）蛋白質(zhì)測(cè)序的策略（測(cè)定蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)，要求樣品必須是均一的，純度應(yīng)在97%以上） （見(jiàn)教材P168） （2）N-末端和C-末端氨基酸殘基的鑒定 A、N-末端分析（見(jiàn)教材P169） a 二硝基氟苯法（DNFB） b 丹磺酰氯法（DNS） c 苯異硫氰酸酯法（PITC） d 氨肽酶法 B、C-末端分析（見(jiàn)教材P170） a 肼解法 b 還原法 c 羧肽酶法（目前常見(jiàn)的4種羧肽酶：A、B、C、Y）,（3）二硫橋的斷裂 （4）氨基酸組成的分析 （5）多肽鏈的部分裂解和肽段混合物的分離純化 A 酶裂解法 B 化學(xué)裂解法 （6）肽段氨基酸序列的測(cè)定 A Edman化學(xué)降解法 B 酶降解法 C 質(zhì)譜法 D 根據(jù)核苷酸序列的推定法 （7）肽段在多肽鏈中次序的決定 （8）二硫橋位置的確定,4.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 1、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的組織層次 2、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定,5.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、研究蛋白質(zhì)構(gòu)象的方法：NMR 2、穩(wěn)定蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)的作用力 穩(wěn)定蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)的作用力主要是一些所謂弱的相互作用或稱(chēng)非共價(jià)鍵或次級(jí)鍵，包括氫鍵、范德華力、疏水作用和鹽鍵（離子鍵）。 （1）氫鍵：穩(wěn)定蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要作用力 （2）范德華力（范德華相互作用）：定向、誘導(dǎo)和分散。 （3）疏水作用（熵效應(yīng)） 水介質(zhì)中球狀蛋白質(zhì)的折疊總是傾向于把疏水殘基埋藏在分子的內(nèi)部，這一現(xiàn)象稱(chēng)為疏水作用或疏水效應(yīng)。 （4）鹽鍵 （5）二硫鍵,3、二級(jí)結(jié)構(gòu)：多肽鏈折疊的規(guī)則方式 在能量平衡中，蛋白質(zhì)主鏈的折疊產(chǎn)生由氫鍵維系的有規(guī)則的構(gòu)象，稱(chēng)為二級(jí)結(jié)構(gòu)。常見(jiàn)的二級(jí)結(jié)構(gòu)元件：a螺旋，B折疊片，B轉(zhuǎn)角和無(wú)規(guī)卷曲等。（見(jiàn)教材p207） 4、超二級(jí)結(jié)構(gòu)和結(jié)構(gòu)域 （1）超二級(jí)結(jié)構(gòu) A 在蛋白質(zhì)分子中特別是在球狀蛋白質(zhì)分子中經(jīng)常可以看到由若干相鄰的二級(jí)結(jié)構(gòu)元件（主要是a螺旋和B折疊片）組合在一起，彼此相互作用，形成種類(lèi)不多的、有規(guī)則的二級(jí)結(jié)構(gòu)組合或二級(jí)結(jié)構(gòu)串，在多蛋白質(zhì)中充當(dāng)三級(jí)結(jié)構(gòu)的構(gòu)件，稱(chēng)為超二級(jí)結(jié)構(gòu)。 B超二級(jí)結(jié)構(gòu)的基本組合形式：aa、BaB、BB （見(jiàn)教材p222） （2）結(jié)構(gòu)域 A 概念：多肽鏈在二級(jí)結(jié)構(gòu)或超二級(jí)結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上形成三級(jí)結(jié)構(gòu)的局部折疊區(qū)，它是相對(duì)獨(dú)立的緊密球狀實(shí)體，成為結(jié)構(gòu)域。 B 類(lèi)型：（見(jiàn)教材p223）,5、球狀蛋白質(zhì)與三級(jí)結(jié)構(gòu) （1）球狀蛋白質(zhì)的分類(lèi)（簡(jiǎn)單了解見(jiàn)教材224） （2）球狀蛋白質(zhì)的三維結(jié)構(gòu)特征（簡(jiǎn)單了解 見(jiàn)教材228） （3）三級(jí)結(jié)構(gòu)是指由二級(jí)結(jié)構(gòu)元件構(gòu)建成的總?cè)S結(jié)構(gòu)，包括一級(jí)結(jié)構(gòu)中相距遠(yuǎn)的肽段之間的幾何相互關(guān)系和側(cè)鏈在三維空間中彼此間的相互關(guān)系。 6、蛋白質(zhì)折疊和結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè) （1）蛋白質(zhì)變性 A 概念：天然蛋白質(zhì)分子受到某些物理因素如熱、紫外線照射、高壓和表面張力等或化學(xué)因素如有機(jī)溶劑、酸、堿等的影響時(shí)，生物活性喪失，溶解度降低，不對(duì)稱(chēng)性增高以及其他的物理化學(xué)常數(shù)發(fā)生改變，這種過(guò)程稱(chēng)為蛋白質(zhì)變性。 B 變性的實(shí)質(zhì)：蛋白質(zhì)分子中的次級(jí)鍵被破壞，引起天然構(gòu)象解體。（變形不涉及共價(jià)鍵的破裂，一級(jí)結(jié)構(gòu)仍然完好。）,C 變性過(guò)程中發(fā)生的現(xiàn)象：生物活性喪失；一些側(cè)鏈基團(tuán)暴露；一些物理化學(xué)性質(zhì)改變；生物化學(xué)性質(zhì)改變。 D 變性劑：尿素和鹽酸胍，能與多肽主鏈競(jìng)爭(zhēng)氫鍵，因此破壞蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)。 十二烷基磺酸鈉（SDS）也是去污劑。 E 蛋白質(zhì)復(fù)性：當(dāng)變性因素除去后，變性蛋白質(zhì)又可重新回復(fù)到天然構(gòu)象，這一現(xiàn)象稱(chēng)為蛋白質(zhì)復(fù)性。 （2）蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的預(yù)測(cè) 蛋白質(zhì)的三維機(jī)構(gòu)是由一級(jí)序列決定的。,7、亞基締合和四級(jí)結(jié)構(gòu) （1）有關(guān)概念： 球狀蛋白質(zhì)通過(guò)非共價(jià)鍵彼此締合在一起，締合形成聚集體的方式構(gòu)成蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。 四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)中每個(gè)球狀蛋白質(zhì)稱(chēng)為亞基。亞基一般是一條多肽鏈。亞基也稱(chēng)為單體。 由兩個(gè)亞基組成的稱(chēng)為二聚體蛋白。由4個(gè)亞基組成的稱(chēng)為四聚體蛋白。 （2）四級(jí)締合的驅(qū)動(dòng)力 穩(wěn)定四級(jí)結(jié)構(gòu)的作用力與穩(wěn)定三級(jí)結(jié)構(gòu)的作用力相同，為：范德華力、氫鍵、離子鍵和疏水作用。 （3）四級(jí)締合在結(jié)構(gòu)和功能上的優(yōu)越性 A 增強(qiáng)結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性 B 提高遺傳經(jīng)濟(jì)性和效率 C 使催化基團(tuán)匯集在一起 D 具有協(xié)同性和別構(gòu)效應(yīng),（4）概念 多亞基蛋白質(zhì)一般具有多個(gè)結(jié)合部位，結(jié)合在蛋白質(zhì)分子的特定部位上的配體對(duì)該分子的其他部位所產(chǎn)生的影響稱(chēng)為別構(gòu)效應(yīng)。別構(gòu)效應(yīng)分為同促效應(yīng)和異促效應(yīng)。 同促效應(yīng)發(fā)生作用的部位是相同的，也即一種配體的結(jié)合對(duì)在其他同種部位的同種配體的親和力影響，這種影響一般是使親和力加強(qiáng)。 異促效應(yīng)發(fā)生作用的部位是不同的，也即活性部位的結(jié)合行為將受到別構(gòu)部位與效應(yīng)物結(jié)合的影響。,5.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)層次的相關(guān)概念。,6.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、肌紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能（了解） 2、血紅蛋白的結(jié)構(gòu)與功能 （1）血紅蛋白的主要功能就是在血液中結(jié)合并轉(zhuǎn)運(yùn)氧氣。 （2）Bohr效應(yīng)的重要生理意義。（p264） 當(dāng)血流經(jīng)組織特別是流經(jīng)代謝迅速的肌肉時(shí)由于這里的PH較低，CO2濃度較高，因此有利于血紅蛋白釋放氧氣，使組織比單純的氧分壓降低獲得更多的氧，而氧的釋放又促使血紅蛋白與H+和CO2的結(jié)合，以補(bǔ)償由于組織呼吸形成的CO2所引起的PH降低，起著緩沖血液PH的作用。當(dāng)血液流經(jīng)肺部時(shí)，由于肺部氧分壓較高，有利于血紅蛋白與氧結(jié)合并因此促進(jìn)了H+和CO2的釋放，同時(shí)CO2的呼出又有利于氧合血紅蛋白的生成。,7.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì) 蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)。在沒(méi)有其他鹽類(lèi)干擾時(shí)，蛋白質(zhì)質(zhì)子供體基團(tuán)解離出來(lái)的質(zhì)子數(shù)與質(zhì)子受體基團(tuán)結(jié)合的質(zhì)子數(shù)相等時(shí)的pH稱(chēng)為等離子點(diǎn)。 2、蛋白質(zhì)的分子大小與形狀（見(jiàn)教材 291） （1）根據(jù)化學(xué)組成測(cè)定最低相對(duì)分子質(zhì)量 （2）沉降分析法測(cè)定相對(duì)分子質(zhì)量：利用超速離心機(jī)。 （3）凝膠過(guò)濾法測(cè)定相對(duì)分子質(zhì)量 （4）SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定相對(duì)分子質(zhì)量 蛋白質(zhì)顆粒在各種介質(zhì)包括聚丙烯酰胺凝膠中電泳時(shí)，它的遷移率決定于它所帶的凈電荷以及分子大小和形狀等因素。如果在聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中加入陰離子去污劑SDS和少量巰基乙醇，蛋白質(zhì)分子的電泳遷移率主要取決于它的相對(duì)分子質(zhì)量，而與原來(lái)所帶的電荷和分子形狀無(wú)關(guān)。,3、蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)與蛋白質(zhì)的沉淀 （1）蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)：蛋白質(zhì)溶液屬于膠體系統(tǒng)。 （2）蛋白質(zhì)的沉淀：蛋白質(zhì)在溶液中的穩(wěn)定是相對(duì)的，有條件的。沉淀蛋白質(zhì)的方法有以下幾種：（見(jiàn)教材p300） A 鹽析法：一般不引起蛋白質(zhì)變性 B 有機(jī)溶劑沉淀法 C 重金屬鹽沉淀法 D 生物堿試劑和某些酸類(lèi)沉淀法 E 加熱變性沉淀法 4、蛋白質(zhì)分離純化的一般原則 蛋白質(zhì)純化的總目標(biāo)是增加制品的純度或比活，以增加單位蛋白質(zhì)重量中所要蛋白質(zhì)的含量或生物活性。 分離純化蛋白質(zhì)的一般程序：前處理、粗分級(jí)處理、細(xì)分級(jí)處理。,5、蛋白質(zhì)的分離純化方法（見(jiàn)教材 p301） （1）根據(jù)分子大小不同的純化方法 A 透析和過(guò)濾 透析是利用蛋白質(zhì)分子不能透過(guò)半透膜的性質(zhì)，使蛋白質(zhì)和其他小分子物質(zhì)如無(wú)機(jī)鹽、單糖等分開(kāi)。 過(guò)濾或超濾：利用壓力或離心力，強(qiáng)行使水和其他小分子溶質(zhì)通過(guò)半透膜，而蛋白質(zhì)被截留在膜上，以達(dá)到濃縮和脫鹽的目的。 B 密度梯度（區(qū)帶）離心 蛋白質(zhì)在具有密度梯度的介質(zhì)中離心時(shí)，質(zhì)量和密度大的顆粒沉降得快。 C 凝膠過(guò)濾：根據(jù)分子大小分離蛋白質(zhì),（2）利用溶解度差別的純化方法 影響蛋白質(zhì)溶解度的外部因素：溶液的PH，離子強(qiáng)度，介電常數(shù)，溫度 A 等電點(diǎn)沉淀和PH控制 蛋白質(zhì)處于等電點(diǎn)時(shí)，其凈電荷為0，由于相鄰蛋白質(zhì)分子之間沒(méi)有靜電斥力而趨于聚集沉淀，因此在其他條件相同時(shí)，它的溶解度達(dá)到最低點(diǎn)。 B 蛋白質(zhì)的鹽溶和鹽析 中性鹽可以增加蛋白質(zhì)的溶解度，這種現(xiàn)象稱(chēng)為鹽溶。 當(dāng)溶液的離子強(qiáng)度達(dá)到一定數(shù)值時(shí)，蛋白質(zhì)溶解度開(kāi)始下降，并從水中沉淀出來(lái)，這種現(xiàn)象稱(chēng)為鹽析。 C 有機(jī)溶劑分級(jí)分離法 D 溫度對(duì)蛋白質(zhì)溶解度的影響,（3）根據(jù)電荷不同的純化方法 A 電泳：在外電場(chǎng)的作用下，帶點(diǎn)顆粒將向著與其電性相反的電極移動(dòng) B 聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE） C 毛細(xì)管電泳 D 等電聚焦（IEF） E 層析聚焦 F 離子交換層析 （4）利用選擇性吸附的純化方法 （5）利用對(duì)配體的特異生物學(xué)親和力的純化方法 （6）高效液相層析和快速蛋白質(zhì)液相層析,6、蛋白質(zhì)的含量測(cè)定與純度鑒定 （1）蛋白質(zhì)含量測(cè)定 凱氏定氮法，雙縮脲法等。 （2）蛋白質(zhì)純度的鑒定,7.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 蛋白質(zhì)分離純化的方法 （這一部分內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)本身緊密相關(guān)，是考試的重中之重）,8.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、酶催化作用的特點(diǎn) 酶作為生物催化劑的特點(diǎn)： A 酶易失活 B 酶具有很高的催化效率 C 酶具有高度專(zhuān)一性 D 酶活性受到調(diào)節(jié)和控制（具體調(diào)節(jié)方式見(jiàn)教材 p322） 2、酶的化學(xué)本質(zhì)及組成 （1）酶的化學(xué)本質(zhì):有催化活性的RNA和蛋白質(zhì) 不能說(shuō)所有的蛋白質(zhì)都是酶，只有具有催化作用的蛋白質(zhì)，才稱(chēng)為酶。 （2）酶的化學(xué)組成 從化學(xué)組成來(lái)看，酶分為單純蛋白質(zhì)和綴合蛋白質(zhì)。,屬于綴合蛋白質(zhì)的酶類(lèi)，除了蛋白質(zhì)外，還要結(jié)合一些對(duì)熱穩(wěn)定的非蛋白質(zhì)小分子物質(zhì)或金屬離子，前者稱(chēng)為脫輔酶，后者稱(chēng)為輔因子。全酶=脫輔酶+輔因子。 酶的輔因子，包括金屬及有機(jī)化合物，根據(jù)他們與脫輔酶結(jié)合的松緊程度不同，可分為兩類(lèi)，輔酶和輔基。 輔酶指與脫輔酶結(jié)合比較松弛的小分子有機(jī)物，通過(guò)透析方法可以除去，如輔酶I和輔酶II等。 輔基是以共價(jià)鍵和脫輔酶結(jié)合，不能通過(guò)透析除去，需要經(jīng)過(guò)一定的化學(xué)處理才能與蛋白質(zhì)分開(kāi)，如FAD等。 注意事項(xiàng)見(jiàn)教材（p324）,3 酶的命名和分類(lèi)（簡(jiǎn)單了解） 4 酶的專(zhuān)一性 (1)酶的專(zhuān)一性：結(jié)構(gòu)專(zhuān)一性和立體異構(gòu)專(zhuān)一性 (2)關(guān)于酶作用專(zhuān)一性的假說(shuō) 誘導(dǎo)契合假說(shuō)：當(dāng)酶分子與底物分子接近時(shí)，酶蛋白受底物分子誘導(dǎo)，其構(gòu)象發(fā)生有利于底物結(jié)合的變化，酶與底物在此基礎(chǔ)上互補(bǔ)契合進(jìn)行反應(yīng)。 5、酶的活力測(cè)定和分離純化 （1）酶活力的測(cè)定 A 酶活力：酶催化某一化學(xué)反應(yīng)的能力，酶活力的大小可以用在一定條件下所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速率來(lái)表示，兩者呈線性關(guān)系。,B 酶的活力單位（U）（見(jiàn)教材p336） 酶活力的大小即酶含量的多少，用酶活力單位表示，即酶單位（U）。 酶單位：在一定條件下，一定時(shí)間內(nèi)將一定量的底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物所需的酶量。（U/g，U/ml） 1961年，國(guó)際單位IU，1IU=1umol/min 1976年，國(guó)際單位Kat 1Kat=1mol/s C 酶的比活力 ：每mg蛋白質(zhì)所含的酶活力單位數(shù)，對(duì)于同一種酶來(lái)說(shuō)，比活力越大表示酶的純度越高。 比活力=活力U/mg蛋白=總活力U/總蛋白mg D 酶活力的測(cè)定方法（見(jiàn)教材p336） （2）酶的分離和純化 生物細(xì)胞產(chǎn)生的酶有兩類(lèi)：胞外酶、胞內(nèi)酶 胞外酶比胞內(nèi)酶更容易分離純化。 根據(jù)酶的特點(diǎn)在分離純化中應(yīng)注意一下幾點(diǎn)：（見(jiàn)教材 p338） 選材、破碎、抽提、分離及純化、結(jié)晶、保存,6、核酶（簡(jiǎn)單了解） RNase P是催化tRNA前體5端成熟的內(nèi)切核酸酶，是由RNA和蛋白質(zhì)兩部分組成。 7、抗體酶（簡(jiǎn)單了解） 抗體酶是一種具有催化能力的蛋白質(zhì)，其本質(zhì)上是免疫球蛋白 8、酶工程簡(jiǎn)介（簡(jiǎn)單了解） 固定化酶：將水溶性酶用物理或化學(xué)方法處理，使之成為不溶于水的，但仍具有酶活性的狀態(tài)。 生物酶工程：是酶學(xué)和以DNA重組技術(shù)為主的現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物。,8.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 酶的化學(xué)組成及酶活力單位。,9.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、化學(xué)動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ) （1）反應(yīng)速率及其測(cè)定 瞬時(shí)反應(yīng)速率 （2）反應(yīng)分子數(shù)和反應(yīng)級(jí)數(shù) A 反應(yīng)分子數(shù)：在反應(yīng)中真正相互作用的分子數(shù) B 反應(yīng)級(jí)數(shù)：根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，整個(gè)化學(xué)反應(yīng)的速率服從哪種分子反應(yīng)速率方程式，則這個(gè)反應(yīng)即為幾級(jí)反應(yīng)。 反應(yīng)級(jí)數(shù)表示反應(yīng)速率與反應(yīng)物濃度之間關(guān)系的問(wèn)題。 2、底物濃度對(duì)酶反應(yīng)速率的影響,（1）中間絡(luò)合物學(xué)說(shuō) 內(nèi)容：當(dāng)?shù)孜餄舛容^低時(shí)，反應(yīng)速率與底物濃度的關(guān)系呈正比關(guān)系，表現(xiàn)為一級(jí)反應(yīng)，隨著底物濃度的增加，反應(yīng)速率不再按比例升高，反應(yīng)表現(xiàn)為混合級(jí)反應(yīng)。當(dāng)?shù)孜餄舛冗_(dá)到相當(dāng)高時(shí)，底物濃度對(duì)反應(yīng)速率影響變小，最后反應(yīng)速率與底物濃度幾乎無(wú)關(guān)，反應(yīng)達(dá)到最大速率（Vmax），表現(xiàn)為零級(jí)反應(yīng)。酶底物中間絡(luò)合物學(xué)說(shuō)認(rèn)為當(dāng)酶催化某一化學(xué)反應(yīng)時(shí)，酶首先和底物結(jié)合生成中間復(fù)合物（ES），然后生成產(chǎn)物P，并釋放出酶。 S+E=ES=P+E,(2) 酶促反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)方程式 A 米氏方程式的推導(dǎo)（見(jiàn)教材p356） vVmaxS/（Km+S) 這個(gè)方程稱(chēng)為Michaelis-Menten方程，是在假定存在一個(gè)穩(wěn)態(tài)反應(yīng)條件下推導(dǎo)出來(lái)的，其中 Km 值稱(chēng)為米氏常數(shù)，Vmax是酶被底物飽和時(shí)的反應(yīng)速度，S為底物濃度。由此可見(jiàn)Km值的物理意義為反應(yīng)達(dá)到1/2Vmax的底物濃度，單位一般為mol/L，只由酶的性質(zhì)決定，而與酶的濃度無(wú)關(guān)。可用Km的值鑒別不同的酶。當(dāng)?shù)孜餄舛确浅４髸r(shí)，反應(yīng)速度接近于一個(gè)恒定值。,B 米氏常數(shù)和Vmax的意義 Km是酶的一個(gè)特性常數(shù)，Km的大小只與酶的性質(zhì)有關(guān)，而與酶的濃度無(wú)關(guān)。Km值隨測(cè)定的底物、反應(yīng)的溫度、PH及離子強(qiáng)度而改變。 當(dāng)=Vmax/2時(shí)，Km=S。因此，Km等于酶促反應(yīng)速度達(dá)最大值一半時(shí)的底物濃度。 當(dāng)k-1k+2時(shí)，Km=k-1/k+1=Ks。因此，Km可以反映酶與底物親和力的大小，即Km值越小，則酶與底物的親和力越大；反之，則越小。 Km可用于判斷反應(yīng)級(jí)數(shù)：當(dāng)S100Km時(shí)，=Vmax，反應(yīng)為零級(jí)反應(yīng)，即反應(yīng)速度與底物濃度無(wú)關(guān)；當(dāng)0.01KmS100Km時(shí)，反應(yīng)處于零級(jí)反應(yīng)和一級(jí)反應(yīng)之間，為混合級(jí)反應(yīng)。 Km是酶的特征性常數(shù)：在一定條件下，某種酶的Km值是恒定的，因而可以通過(guò)測(cè)定不同酶（特別是一組同工酶）的Km值，來(lái)判斷是否為不同的酶。,Km可用來(lái)判斷酶的最適底物：當(dāng)酶有幾種不同的底物存在時(shí)，Km值最小者，為該酶的最適底物。 Km可用來(lái)確定酶活性測(cè)定時(shí)所需的底物濃度：當(dāng)S=10Km時(shí)，=91%Vmax，為最合適的測(cè)定酶活性所需的底物濃度 Vmax可用于酶的轉(zhuǎn)換數(shù)的計(jì)算：當(dāng)酶的總濃度和最大速度已知時(shí)，可計(jì)算出酶的轉(zhuǎn)換數(shù)，即單位時(shí)間內(nèi)每個(gè)酶分子催化底物轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物的分子數(shù)。,3、 酶的抑制作用 （1）概念：由于酶的必需基團(tuán)化學(xué)性質(zhì)的改變，但酶未變性，而引起酶活力的降低或喪失而稱(chēng)為抑制作用。 （2）抑制作用的類(lèi)型 A 不可逆的抑制作用：抑制劑與酶的必需基團(tuán)以共價(jià)鍵結(jié)合而引起酶活力喪失，不能用透析、超濾等物理方法除去抑制劑而使酶復(fù)活，稱(chēng)為不可逆抑制。 B 可逆的抑制作用：抑制劑與酶以非共價(jià)鍵結(jié)合而引起酶活力降低或喪失，能用物理方法除去抑制劑而使酶復(fù)活，這種抑制作用是可逆的稱(chēng)為可逆抑制。 根據(jù)可逆抑制劑與底物的關(guān)系，可逆抑制分為三種類(lèi)型：競(jìng)爭(zhēng)性抑制、 非競(jìng)爭(zhēng)性抑制、反競(jìng)爭(zhēng)性抑制 （3）可逆抑制作用動(dòng)力學(xué)（了解 見(jiàn)教材 p370） （4）一些重要的抑制劑（了解 見(jiàn)教材 p373）,4、影響酶反應(yīng)的因素（見(jiàn)教材 p378） 溫度 PH 激活劑 9.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 1 、米氏方程的推導(dǎo)及應(yīng)用 2 、酶的抑制作用類(lèi)型,10.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、酶的活性部位 （1）酶活性部位的特點(diǎn) 某些特異氨基酸集中的區(qū)域，即與酶活力直接相關(guān)的區(qū)域稱(chēng)為活性部位或活性中心。 活性部位分為：結(jié)合部位和催化部位。前者負(fù)責(zé)與底物結(jié)合，決定酶的專(zhuān)一性，后者負(fù)責(zé)催化底物鍵的斷裂形成新鍵，決定酶的催化能力。輔酶分子或輔酶分子上的某一部分結(jié)構(gòu)，往往也是酶活性部位組成部分。 A 活性部位在酶分子的總體中只占相當(dāng)小的部分 B 酶的活性部位是一個(gè)三維實(shí)體 C 誘導(dǎo)契合（重點(diǎn)） D 酶的活性部位是位于酶分子表面的一個(gè)裂縫內(nèi)。 E 底物通過(guò)次級(jí)鍵較弱的力結(jié)合到酶上。 F 酶活性部位具有柔性或可運(yùn)動(dòng)性。,誘導(dǎo)契合（induced-fit）：酶的活性部位并不是和底物的形狀正好互補(bǔ)的，而是在酶和底物的結(jié)合過(guò)程中，底物分子或酶分子，有時(shí)是兩者的構(gòu)象同時(shí)發(fā)生了一定的變化后才互補(bǔ)的，這時(shí)催化基團(tuán)的位置也正好在所催化底物鍵的斷裂和即將生成鍵的合適位置。這個(gè)動(dòng)態(tài)的辨認(rèn)過(guò)程稱(chēng)為誘導(dǎo)契合。 （2）研究酶活性部位的方法 A 側(cè)鏈基團(tuán)的化學(xué)修飾法 非特異性共價(jià)修飾 特異性共價(jià)修飾 親和標(biāo)記法 B 其他方法（簡(jiǎn)要了解 見(jiàn)教材p386）,2、酶催化反應(yīng)的獨(dú)特性質(zhì)（見(jiàn)教材 p388） 3、影響酶催化效率的有關(guān)因素 （1）底物和酶的鄰近效應(yīng)和定向效應(yīng) A 鄰近效應(yīng)：酶與底物形成中間復(fù)合物以后，使底物和底物之間，酶的催化基團(tuán)與底物之間結(jié)合于同一分子而使有效濃度得以極大的提高，從而使反應(yīng)速率大大增加的一種效應(yīng)。 B定向效應(yīng)是指反應(yīng)物的反應(yīng)基團(tuán)之間和酶的催化基團(tuán)與底物的反應(yīng)基團(tuán)之間的正確取位產(chǎn)生的效應(yīng)。 （2）底物的形變和誘導(dǎo)契合 （3）酸堿催化 通過(guò)瞬時(shí)的向反應(yīng)物提供質(zhì)子或從反應(yīng)物接受質(zhì)子以穩(wěn)定過(guò)渡態(tài)，加速反應(yīng)的一類(lèi)催化機(jī)制。,（4）共價(jià)催化 又稱(chēng)親核催化，或親電子催化，在催化時(shí)，親核催化劑或親電子催化劑能分別放出電子或汲取電子并作用于底物的缺電子中心或負(fù)電子中心，迅速形成不穩(wěn)定的共價(jià)中間復(fù)合物，降低反應(yīng)活化能，使反應(yīng)加速。 （5）金屬離子催化 （6）多元催化和協(xié)同效應(yīng) （7）活性部位微環(huán)境的影響 4、酶催化反應(yīng)機(jī)制的實(shí)例（見(jiàn)教材 p394）,5、酶活性的調(diào)節(jié)控制 （1）別構(gòu)調(diào)控（allosteric regulation） 酶分子的非催化部位與某些化合物可逆地非共價(jià)結(jié)合后發(fā)生構(gòu)象的改變，進(jìn)而改變酶活性狀態(tài)，稱(chēng)為別構(gòu)調(diào)控。具有這種調(diào)節(jié)作用的酶稱(chēng)為別構(gòu)酶。凡能使酶分子發(fā)生別構(gòu)作用的物質(zhì)稱(chēng)為效應(yīng)物或別構(gòu)劑，通常為小分子代謝物或輔因子。 導(dǎo)致酶活性增加的物質(zhì)稱(chēng)為正效應(yīng)物或別構(gòu)激活劑，反之為負(fù)效應(yīng)物或別構(gòu)抑制劑。 別構(gòu)酶的性質(zhì)：一般都是寡聚酶，通過(guò)次級(jí)鍵由多亞基構(gòu)成。 （2）酶原的激活：由無(wú)活性狀態(tài)轉(zhuǎn)變成活性狀態(tài)是不可逆的 （3）可逆的共價(jià)修飾：通過(guò)共價(jià)調(diào)節(jié)酶進(jìn)行 6、同工酶 概念：催化相同的化學(xué)反應(yīng)，但其蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和免疫能力等方面都存在明顯差異的一組酶。,10.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 1、酶活性部位的特點(diǎn) 2、影響酶催化效率的有關(guān)因素,11.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、維生素概論 （1）已知絕大多數(shù)維生素作為酶的輔酶或輔基的組成成分。 （2）維生素的分類(lèi) 根據(jù)溶解性質(zhì)分為：脂溶性和水溶性 脂溶性：維生素A、D、E、K等。 水溶性：維生素B1、B2、煙酸和煙酰胺、B6、泛酸、生物素、葉酸、B12和維生素C等。 2、水溶性維生素 （1）維生素PP和煙酰胺輔酶 維生素PP包括煙酸和煙酰胺。 在體內(nèi)煙酰胺與核糖、磷酸、腺嘌呤組成脫氫酶的輔酶，只要是煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+，輔酶I）和煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（NADP+，輔酶II），其還原形式為NADH、NADPH。,（2）維生素B2和黃素輔酶 維生素B2又名核黃素。在體內(nèi)核黃素是以黃素單核苷酸（FMN）和黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）形式存在，是生物體內(nèi)一些氧化還原酶（黃素蛋白）的輔基，與蛋白部分結(jié)合很牢。 （3）泛酸和輔酶A 泛酸是輔酶A和磷酸泛酰巰基乙胺的組成成分，輔酶A是泛酸的主要活性形式，簡(jiǎn)寫(xiě)為CoA （4）維生素B6：包括吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺。 11.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 了解維生素及輔酶的相關(guān)概念,12.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、核酸的種類(lèi)和分布 （1）脫氧核糖核酸（DNA） A 分布：原核細(xì)胞DNA集中在核區(qū)，真核細(xì)胞DNA分布在核內(nèi)，線粒體，葉綠體等細(xì)胞器也含有DNA。病毒有且只有DNA或RNA。 B 原核生物染色體DNA、質(zhì)粒DNA、真核生物細(xì)胞器DNA：環(huán)狀雙鏈 真核生物DNA：線性 質(zhì)粒：染色體外基因，它們能夠自主復(fù)制，并給出附加的性狀。 （2）核糖核酸（RNA） A 分類(lèi)：tRNA、mRNA 、rRNA 原核生物信使RNA結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，由于功能相近的基因組成操縱子作為一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位，產(chǎn)生多順?lè)醋觤RNA。真核生物信使RNA結(jié)構(gòu)復(fù)雜，有5端帽子和3poly（A）尾巴，以及非翻譯區(qū)調(diào)控序列，但功能相關(guān)的基因不形成操縱子，不產(chǎn)生多順?lè)醋觤RNA。,2、核酸的生物功能 （1）DNA是主要的遺傳物質(zhì) （2）RNA參與蛋白質(zhì)的生物合成 （3）RNA功能具有多樣性 12.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 核酸的分類(lèi)及功能,13.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 核酸的基本組成單位是核苷酸，核苷酸由一分子磷酸，一分子五碳糖和一分子含氮堿基組成。五碳糖和含氮堿基合稱(chēng)為核苷。 1、核苷酸 （1）堿基 A 嘧啶堿 （C、T、U） B 嘌呤堿（A、G） C 稀有堿基：大部分都是甲基化堿基 （2）核苷 核苷是一種糖苷，由戊糖和堿基縮合而成。糖與堿基之間以糖苷鍵相連。糖與堿基之間的連鍵是N-C鍵，一般稱(chēng)之為N-糖苷鍵。 假尿嘧啶核苷的結(jié)構(gòu)很特殊，C-糖苷鍵。 （3）核苷酸 （共8種）,2、核酸的共價(jià)結(jié)構(gòu) （核酸的一級(jí)結(jié)構(gòu)，通常指核酸的核苷酸序列） （1）核酸中核苷酸的連接方式：磷酸二酯鍵 （2）DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)： A 由4中脫氧核苷酸通過(guò)3、5磷酸二酯鍵連接起來(lái)的直線形或環(huán)形多聚體。 B 真核生物與原核生物基因的比較 原核的基因是連續(xù)的，無(wú)內(nèi)含子，功能相關(guān)的基因組成操縱子，有共同的調(diào)節(jié)和控制序列，調(diào)控序列所占比例較小，很少重復(fù)序列。 真核生物的基因是斷裂的，有內(nèi)含子，功能相關(guān)基因不組成操作子，調(diào)控序列所占比例大，有大量重復(fù)序列。 （3）RNA的一級(jí)結(jié)構(gòu) 原核生物以操縱子作為轉(zhuǎn)錄單位，產(chǎn)生多順?lè)醋觤RNA，即一條mRNA鏈上有多個(gè)編碼區(qū)，5端和3端各有一段非翻譯區(qū)。 真核生物mRNA都是単順?lè)醋樱?端有帽子結(jié)構(gòu)，然后依次是5非編碼區(qū)，編碼區(qū)，3非編碼區(qū)和3端poly（A）尾巴。其分子內(nèi)有時(shí)還有極少甲基化的堿基。（見(jiàn)教材p484）,poly（A）尾巴的作用：與mRNA從細(xì)胞核到細(xì)胞質(zhì)的運(yùn)輸有關(guān)。 5端帽子是一個(gè)特殊結(jié)構(gòu)，帽子結(jié)構(gòu)通常有三種類(lèi)型。分別為：O型、I型和II型。 O型： I型： II型： （三種類(lèi)型的含義及書(shū)寫(xiě)是重點(diǎn)，見(jiàn)教材p484） 3、DNA的高級(jí)結(jié)構(gòu) （1）DNA堿基組成的Chargaff規(guī)則： A=T C=G A+C=G+T A+G=C+T,（2）DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)（DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型） A 兩條反向平行的多核苷酸鏈圍繞同一中心軸相互纏繞，兩條鏈均為右手螺旋。 B 嘌呤與嘧啶堿位于雙螺旋的內(nèi)側(cè)，磷酸與核糖在外側(cè)，彼此通過(guò)3,5-l磷酸二酯鍵相連接，形成DNA分子的骨架。 C 雙螺旋的平均直徑為2nm，兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間相距的高度，即堿基堆積距離為0.34nm，兩個(gè)核苷酸之間的夾角為36。 D 兩條核苷酸鏈依靠彼此堿基之間形成的氫鍵相連系而結(jié)合在一起。 F 堿基在一條鏈上的排列順序不受任何限制。 （3）DNA能以多種不同的構(gòu)象存在：B型、A型、C型、D型、E型和左手螺旋的Z型。A型和B型是DNA的兩種基本構(gòu)象，Z型則比較特殊。 比較A型和B型DNA的差異性。（見(jiàn)教材p488）,（4）DNA的三級(jí)結(jié)構(gòu) A 概念：DNA分子通過(guò)通過(guò)扭曲和折疊所形成的特定構(gòu)象，包括不同二級(jí)結(jié)構(gòu)單元間的相互作用、單鏈與二級(jí)結(jié)構(gòu)單元間的相互作用以及DNA的拓?fù)涮卣鳌３菪荄NA三級(jí)結(jié)構(gòu)的一種形式。 B DNA的一些重要拓?fù)鋵W(xué)特性（見(jiàn)教材p491） 連環(huán)數(shù) 扭轉(zhuǎn)數(shù) 超螺旋數(shù) 比連環(huán)差 （5）DNA與蛋白質(zhì)復(fù)合物的結(jié)構(gòu) A 病毒顆粒由核酸和蛋白質(zhì)組成 B 真核生物的染色體 在分裂間期，基因組以染色質(zhì)形式存在。染色質(zhì)分為常染色質(zhì)和異染色質(zhì)。（概念見(jiàn)教材p493） 染色質(zhì)的基本組成單位是核小體,核小體由組蛋白核心和盤(pán)繞其上的DNA所構(gòu)成。核心由組蛋白H2A、H2B、H3和H4各兩分子組成，是一個(gè)八聚體，DNA以左手螺旋在組蛋白核心上盤(pán)繞1.8圈，共146bp。 C 真核生物染色體DNA組裝的過(guò)程（重點(diǎn) 見(jiàn)教材495） 4 RNA的高級(jí)結(jié)構(gòu) （1）tRNA的高級(jí)結(jié)構(gòu) tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)都呈三葉草形。三葉草形結(jié)構(gòu)由氨基酸臂、二氫尿嘧啶環(huán)、反密碼環(huán)、額外環(huán)和TC環(huán)等5個(gè)部分組成。（見(jiàn)教材 p496） 氨基酸臂：由7對(duì)堿基組成，富含鳥(niǎo)嘌呤，末端為CCA，接受活化的氨基酸。 二氫尿嘧啶環(huán)：由8-12個(gè)核苷酸組成，具有兩個(gè)二氫尿嘧啶。 反密碼環(huán)：由7個(gè)核苷酸組成、環(huán)中部為反密碼子。 額外環(huán)：由3-18個(gè)核苷酸組成。 TC環(huán)（假尿嘧啶核苷-胸腺嘧啶核糖核苷環(huán)）：由7個(gè)核苷酸組成。 （2）rRNA的高級(jí)結(jié)構(gòu)（了解 見(jiàn)教材p498）,13.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 13.2.1重難點(diǎn)知識(shí)點(diǎn)總結(jié) 1、兩種核酸的結(jié)構(gòu) 2、相關(guān)概念 13.2.2本章重難點(diǎn)例題講解 【例題1】簡(jiǎn)要敘述真核生物染色體DNA組裝的過(guò)程。 解析：,14.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、核酸的水解 （1）酸水解 糖苷鍵和磷酸酯鍵都能被酸水解 （2）堿水解 RNA的磷酸酯鍵易被堿水解，產(chǎn)生核苷酸。DNA的磷酸酯鍵則不易被堿水解。 （3）酶水解（了解 見(jiàn)教材p503） 2、核酸的酸堿性質(zhì) （了解 見(jiàn)教材p504） 核酸的堿基、核苷和核苷酸均能發(fā)生解離，核酸的酸堿性質(zhì)與此有關(guān)。 （1）堿基的解離 （2）核苷的解離 （3）核苷酸的解離,3、核酸的紫外吸收 紫外吸收是實(shí)驗(yàn)室最常用的定量測(cè)定DNA或RNA的方法。（見(jiàn)教材p507） 核酸的摩爾磷吸光系數(shù)較所含核苷酸單體的摩爾磷吸光系數(shù)要低40%-50%，單鏈多核苷酸的摩爾磷吸光系數(shù)比雙螺旋結(jié)構(gòu)多核苷酸的摩爾磷吸光系數(shù)要高，所以核酸發(fā)生變性時(shí)，摩爾磷吸光系數(shù)值升高25%，此現(xiàn)象稱(chēng)為增色效應(yīng)。復(fù)性后摩爾磷吸光系數(shù)值又降低，此現(xiàn)象稱(chēng)為減色效應(yīng)。 4、核酸的變性、復(fù)性及雜交 （1）變性 A 概念： 核酸的變性：核酸雙螺旋區(qū)的氫鍵斷裂，變成單鏈，并不涉及共價(jià)鍵的斷裂。 加熱變性使DNA的雙螺旋結(jié)果失去一半時(shí)的溫度稱(chēng)為該DNA的熔解溫度，用Tm表示。 B DNA的Tm值相關(guān)因素 DNA的均一性，G-C含量，介質(zhì)中的離子強(qiáng)度（見(jiàn)教材 p509）,（2）復(fù)性 變性DNA在適當(dāng)條件下，又可使兩條彼此分開(kāi)的鏈重新締合成為雙螺旋結(jié)構(gòu)，這過(guò)程稱(chēng)復(fù)性。 （3）核酸的雜交 核酸雜交可以在液相或固相上進(jìn)行，目前實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用最廣的是硝酸纖維素膜和尼龍膜作支持物進(jìn)行的雜交。 Southern印跡法：將電泳凝膠上的DNA片段轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上后，再進(jìn)行雜交。 雜交必須在在較高的鹽濃度及適當(dāng)?shù)臏囟龋?8C）下進(jìn)行數(shù)小時(shí)。 Northern印跡法：將RNA變形后轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上再進(jìn)行雜交。 Western印跡法：根據(jù)抗體、抗原可以結(jié)合的原理，分析蛋白質(zhì)。 14.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 核酸雜交技術(shù),15.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、核酸的分離、提純和定量測(cè)定（見(jiàn)教材p513） （1）DNA的分離 （2）RNA的分離 （3）核酸含量的測(cè)定方法 2、核酸的超速離心（見(jiàn)教材p515） （1）核酸密度的測(cè)定 (2) 測(cè)定DNA中G-C之含量 （3）溶液中核酸構(gòu)象的研究 （4）用于核酸的制備 3、核酸的凝膠電泳 （1）瓊脂糖凝膠電泳：以瓊脂糖作為支持物 電泳的遷移率決定于以下因素： 核酸分子大小、膠濃度、DNA的構(gòu)象、電壓、堿基組成、溫度。 瓊脂糖凝膠電泳常用于分析DNA。,（2）聚丙烯酰胺凝膠電泳：以聚丙烯酰胺作為支持物 聚丙烯酰胺一般不含有RNase，用于RNA的分析。 聚丙烯酰胺強(qiáng)度較好，常用垂直板電泳。 4、核酸的核苷酸序列測(cè)定 （1）DNA的酶法測(cè)序 （2）DNA的化學(xué)法測(cè)序 基本原理（見(jiàn)教材p518） （3）RNA的測(cè)序 A 用酶特異切斷RNA鏈 B 用化學(xué)試劑裂解RNA C 逆轉(zhuǎn)錄成cDNA 5、DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR） PCR體外快速擴(kuò)增DNA的方法。 PCR的實(shí)驗(yàn)原理及方法。（見(jiàn)教材p519） 6、DNA的化學(xué)合成（了解 見(jiàn)教材p520）,15.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 15.2.1重難點(diǎn)知識(shí)點(diǎn)總結(jié) 1、核酸的核苷酸序列測(cè)定 2、DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR） 15.2.2本章重難點(diǎn)例題講解 【例題1】解釋PCR并簡(jiǎn)要敘述PCR反應(yīng)的過(guò)程。 解析：,16.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、抗生素的概況 （1）定義：抗生素是微生物代謝過(guò)程中產(chǎn)生的，在低濃度下就能抑制它種微生物的生長(zhǎng)和活動(dòng)，甚至殺死他種微生物的化學(xué)物質(zhì)。 （2）常見(jiàn)抗生素 A 青霉素：主要抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。 青霉素的抗菌作用與抑制細(xì)胞壁的合稱(chēng)相關(guān)。 B 鏈霉素：主要抑制革蘭氏陰性細(xì)菌。 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌與革蘭氏陰性細(xì)菌的差異。 2、抗生素的抗菌作用機(jī)制 （見(jiàn)教材 p542） （1）抑制核酸的合成 （2）抑制蛋白質(zhì)的合成 （3）改變細(xì)胞膜的通透性 （4）干擾細(xì)胞壁的形成 （5）作用于能量代謝系統(tǒng)和作為抗代謝物,17.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、概述 （1）概念：激素是生物體內(nèi)特殊組織或腺體產(chǎn)生的，直接分泌到體液中，通過(guò)體液運(yùn)送到特定作用部位，從而引起特殊激動(dòng)效應(yīng)（調(diào)節(jié)控制各種物質(zhì)代謝或生理功能）的一群微量的有機(jī)化合物。 （2）化學(xué)本質(zhì)： 激素按照化學(xué)本質(zhì)可以分為三類(lèi)： A 含氮激素（蛋白質(zhì)、多肽類(lèi)激素、氨基酸衍生物激素） B 固醇類(lèi)激素 C 脂肪酸衍生物激素 （3）激素的合成與分泌 （見(jiàn)教材p554）（了解） （4）激素的作用機(jī)制 （見(jiàn)教材p571）（了解） （5）激素的分泌調(diào)節(jié)（見(jiàn)教材p582）（了解） （6）植物激素 （見(jiàn)教材p584）（了解）,18.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、生物膜的組成和性質(zhì) 生物膜主要由蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖類(lèi)組成，還有水和金屬離子。 （1）膜脂 A 膜脂的種類(lèi)：生物膜內(nèi)的脂質(zhì)有磷脂、膽固醇、糖脂等。（見(jiàn)教材 p590） B 膜脂的多態(tài)性：膜脂是兩親性分子，因此膜脂在水溶液中的溶解度是很有限的。 （2）膜蛋白：膜周邊蛋白和膜內(nèi)在蛋白 A 外周蛋白質(zhì)：易于分離，都溶于水。 B 膜內(nèi)在蛋白質(zhì)：主要靠疏水力與膜脂相結(jié)合。 2、生物膜的分子結(jié)構(gòu) 生物膜是由蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖類(lèi)組成的超分子體系。 （1）生物膜中分子間作用力：靜電力、疏水力、范德華力,（2）生物膜結(jié)構(gòu)的幾個(gè)主要特征：（見(jiàn)教材p596） A 膜組分的不對(duì)稱(chēng)分布 B 生物膜的流動(dòng)性 a 膜脂的流動(dòng)性 b 膜蛋白的運(yùn)動(dòng)性 （3）生物膜分子的結(jié)構(gòu)模型 流體鑲嵌模型：突出膜的流動(dòng)性、顯示了膜蛋白分布的不對(duì)稱(chēng)性。 18.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 18.2.1重難點(diǎn)知識(shí)點(diǎn)總結(jié) 1、生物膜的流體鑲嵌模型。 18.2.2本章重難點(diǎn)例題講解 【例題1】題目: 生物膜的流體鑲嵌模型的要點(diǎn)是什么？ 解析：,19.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在生物體內(nèi)所經(jīng)歷的一切化學(xué)變化總稱(chēng)為新陳代謝。 新陳代謝可以概括為5個(gè)方面： 從周?chē)h(huán)境中獲得營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 將外界引入的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)樽陨硇枰慕Y(jié)構(gòu)元件，即大分子的組成前體 將結(jié)構(gòu)元件裝配成自身的大分子，如蛋白質(zhì)、核酸、脂類(lèi)及其他組分。 形成或分解生物體特殊功能所需的生物分子 提供生命活動(dòng)所需的一切能量。 1、分解代謝與合成代謝 概念： 分解代謝：有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物，不管是從外界環(huán)境獲得的還是自身儲(chǔ)存的，通過(guò)一系列反應(yīng)步驟轉(zhuǎn)變?yōu)檩^小的、較簡(jiǎn)單的物質(zhì)的過(guò)程叫做分解代謝。 合成代謝又稱(chēng)生物合成，是生物體利用小分子或者大分子的結(jié)構(gòu)元件建造成自身大分子的過(guò)程。,2、能量代謝在新陳代謝中的重要地位 ATP并不是能量的儲(chǔ)存形式，而是一種傳遞能量的分子。 3、輔酶I和輔酶II的遞能作用 由營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分解代謝釋放出的化學(xué)能，除了通過(guò)合成ATP的途徑捕獲外，還有另外一種途徑，就是以氫原子和電子的形式將自由能轉(zhuǎn)移給生物合成的需能反應(yīng)。這種具有高能的氫原子是由脫氫反應(yīng)形成的。脫氫酶催化物質(zhì)的脫氫反應(yīng)，將脫下的氫原子和電子傳遞給一類(lèi)特殊能接受這種氫原子和電子的輔酶，稱(chēng)為輔酶I和輔酶II。 4、FMN和FAD的遞能作用 FMN：黃素腺嘌呤單核苷酸 FAD：黃素腺嘌呤二核苷酸 它們是一類(lèi)在傳遞電子和氫原子中起作用的載體。 FMN和FAD都能接受兩個(gè)電子和兩個(gè)氫原子，它們?cè)谘趸€原反應(yīng)中，特別是在氧化呼吸鏈中起著傳遞電子和氫原子的作用。,5、輔酶A在能量代謝中的作用 輔酶A（CoA）分子中含有腺嘌呤、D-核糖、磷酸、焦磷酸、泛酸和巰基乙胺。 乙酰輔酶A的結(jié)構(gòu)：（見(jiàn)教材p5） 6、新陳代謝的調(diào)節(jié) 三個(gè)不不同水平：分子水平、細(xì)胞水平和整體水平。 7、代謝中常見(jiàn)的有機(jī)反應(yīng)機(jī)制 酶催化的有機(jī)反應(yīng)機(jī)制可歸納為以下幾種：酸堿催化、公價(jià)催化、金屬離子催化和靜電催化。 生物化學(xué)中的反應(yīng)可歸納為四類(lèi)：基團(tuán)轉(zhuǎn)移反應(yīng)、氧化-還原反應(yīng)、消除、異構(gòu)化和重排反應(yīng)、碳-碳鍵的形成或斷裂反應(yīng)。 （1）基團(tuán)轉(zhuǎn)移反應(yīng)（見(jiàn)教材 p7） 酰基轉(zhuǎn)移、磷酰基轉(zhuǎn)移、葡糖基轉(zhuǎn)移 （2）氧化-還原反應(yīng)：電子得失的反應(yīng)（見(jiàn)教材 p9） （3）消除、異構(gòu)及重排反應(yīng)（見(jiàn)教材p10） （4）碳-碳鍵的形成或斷裂反應(yīng) （見(jiàn)教材p12）,8、新陳代謝的研究方法 （1）使用酶的抑制劑 酶的抑制劑可以使代謝途徑受到阻斷，結(jié)果造成某一種代謝中間物的積累，從而為測(cè)定該中間代謝物提供可能。 （2）利用遺傳缺欠癥研究代謝途徑 （3）同位素示蹤法 放射自顯影法：將帶有放射性標(biāo)記的化合物與照相的感光片放在一起，利用放射性能使感光片感光的性質(zhì)測(cè)定感光片變黑的部分。 （4）核磁共振波譜法 19.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 代謝的相關(guān)概念及輔酶。,20.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 1、有關(guān)熱力學(xué)的一些基本概念 燃燒熱：將1mol的有機(jī)化合物完全氧化所釋放出的最大能量。 自由能：能用于做功的能量。 內(nèi)能是體系內(nèi)部質(zhì)點(diǎn)能量的總和，通常用符號(hào)U或E表示。 焓又稱(chēng)為熱焓，用H表示。焓也是體系的一個(gè)狀態(tài)函數(shù)，它是一個(gè)體系的內(nèi)能與其全部分子的壓力和體積總變化之和。 熵代表體系能量分散程度的狀態(tài)參數(shù)，用S表示。 注：氧化作用所放出的總能量的多少，與該物質(zhì)的氧化途徑無(wú)關(guān)，只要氧化后所生成的產(chǎn)物相同，釋放出的總能量必然相等。 一個(gè)反應(yīng)體系的過(guò)程在自發(fā)進(jìn)行時(shí)，其熵是可能降低的，但其周?chē)h(huán)境的熵必然增加，它們的總和必然是正值。 2、化學(xué)反應(yīng)中自由能的變化和意義 （1）自由能公式：（見(jiàn)教材 p28） G=H-TS,（2）標(biāo)準(zhǔn)自由能變化和化學(xué)平衡的關(guān)系（見(jiàn)教材p28） 標(biāo)準(zhǔn)條件：溫度 壓強(qiáng) 參加反應(yīng)物的濃度 標(biāo)準(zhǔn)自由能變化的符號(hào)用G0表示，pH為7時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)自由能用G0 表示。 注：G0和G之間的區(qū)別 G0是在特定條件下，一個(gè)化學(xué)反應(yīng)得常數(shù)，每一個(gè)化學(xué)反應(yīng)都有其特定的標(biāo)準(zhǔn)自由能。 G是在某一化學(xué)反應(yīng)隨參加反應(yīng)物的濃度、發(fā)生反應(yīng)得pH和溫度而改變的自由能變化。 根據(jù)反應(yīng)物和產(chǎn)物計(jì)算出的G值，可判斷一個(gè)化學(xué)反應(yīng)能否按照預(yù)想的方向進(jìn)行。只有當(dāng)G值是負(fù)值時(shí)，反應(yīng)才能進(jìn)行。 一個(gè)化學(xué)反應(yīng)自由能的變化G，有兩部分決定，一部分是不變因素，即由反應(yīng)物本身的性質(zhì)所決定，另一部分是可變因素，即反應(yīng)物和產(chǎn)物的濃度，反應(yīng)的化學(xué)當(dāng)量以及反應(yīng)的溫度。 G0=-2.303RTlgKeq R為氣體常數(shù),（3）標(biāo)準(zhǔn)生成自由能及應(yīng)用 概念：由處于標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)的最穩(wěn)定單質(zhì)合成標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)當(dāng)量化合物時(shí)，其標(biāo)準(zhǔn)自由能的變化值。（G0f） （4）G0 、G以及平衡常數(shù)計(jì)算的舉例（見(jiàn)教材p32） 3、高能磷酸化合物 （1）高能磷酸化合物及其他高能化合物的類(lèi)型（見(jiàn)教材p34） A 磷氧鍵型（-O-P） B 氮磷鍵型如胍基磷酸化合物 C 硫酯鍵型活性硫酸基 D 甲硫鍵型活性甲硫氨酸 （2）ATP的結(jié)構(gòu)特性 ATP是一分子腺嘌呤、一分子核糖和三個(gè)相連的磷酸基團(tuán)構(gòu)成的核苷酸。 （3）ATP系統(tǒng)的動(dòng)態(tài)平衡 細(xì)胞所處的能量狀態(tài)用ATP、ADP和AMP之間的關(guān)系式來(lái)表示，稱(chēng)為能荷。 能荷=？ （見(jiàn)教材p42）,20.2本章重難點(diǎn)總結(jié) 化學(xué)反應(yīng)中自由能的變化和意義,21.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 生物膜的主要功能：能量轉(zhuǎn)換、物質(zhì)運(yùn)輸、信息識(shí)別與傳遞 1、被動(dòng)運(yùn)輸與主動(dòng)運(yùn)輸 （1）被動(dòng)運(yùn)輸 物質(zhì)從高濃度的一側(cè)，通過(guò)膜運(yùn)輸?shù)降蜐舛鹊囊粋?cè)，即順濃度梯度的方向跨膜運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程。 主要特點(diǎn)：（見(jiàn)教材p46） （2）主動(dòng)運(yùn)輸 物質(zhì)逆濃度梯度運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程。 主要特點(diǎn)（見(jiàn)教材p47） 2、小分子物質(zhì)的運(yùn)輸 （見(jiàn)教材p49） （1）Na+、K+的運(yùn)輸 無(wú)論植物還是動(dòng)物細(xì)胞中，細(xì)胞內(nèi)外存在著離子梯度差，細(xì)胞內(nèi)是高K+ 低Na+，而外環(huán)境中則是高Na+低K+ A Na+，K+-泵就是分布于膜上的Na+，K+-ATP酶。 B Na+，K+-ATP酶的作用機(jī)制構(gòu)象變化假說(shuō),（2）Ca2+的運(yùn)輸 （3）三類(lèi)驅(qū)動(dòng)離子的ATP酶：P、F、V型（見(jiàn)教材p52） 基本功能：通過(guò)水解ATP提供的能量轉(zhuǎn)運(yùn)離子，或者通過(guò)離子梯度合成ATP。 （4）糖和氨基酸的運(yùn)送 A 協(xié)同運(yùn)輸 在小腸或腎細(xì)胞中葡萄糖的運(yùn)輸是伴隨Na+ 一起輸入細(xì)胞的，這種運(yùn)輸稱(chēng)為協(xié)同運(yùn)輸。 B 基團(tuán)運(yùn)輸 有些糖在通過(guò)細(xì)菌莢膜時(shí)，需要進(jìn)行磷酸化反應(yīng)加入一個(gè)磷酸基團(tuán)，以糖-磷酸的形式才能通過(guò)膜，稱(chēng)為基團(tuán)運(yùn)輸。 3、生物大分子的跨膜運(yùn)輸 多核苷酸、多糖等生物大分子甚至顆粒物的運(yùn)輸，主要通過(guò)胞吞和胞吐作用，包括受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用等運(yùn)輸?shù)摹?（1）胞吐作用：細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)先被囊泡裹入，形成分泌泡，然后與細(xì)胞質(zhì)膜接觸、融合并向外釋放被裹入的物質(zhì)，這個(gè)過(guò)程，稱(chēng)為胞吐作用。 （2）胞吞作用：細(xì)胞從外界攝入的大分子或顆粒逐漸被質(zhì)膜的一小部分包圍，內(nèi)陷，其后從質(zhì)膜上脫下來(lái)而形成含有攝入物質(zhì)的細(xì)胞內(nèi)囊泡的過(guò)程，稱(chēng)為胞吞作用。 A 吞噬作用 B 胞飲作用 C 受體介導(dǎo)的胞吞作用,22.1本章知識(shí)點(diǎn)串講 ATP形成主要通過(guò)兩條途徑：有氧呼吸和無(wú)氧呼吸 在無(wú)氧條件下，葡萄糖進(jìn)行分解，形成2分子丙酮酸并提供能量，這一過(guò)程稱(chēng)為糖酵解作用。糖酵解是葡萄糖分解代謝所經(jīng)歷的共同途徑。 1、糖酵解過(guò)程的概述 （1）糖酵解的生物學(xué)意義：在不需要氧供應(yīng)的條件下，產(chǎn)生ATP的一種功能方式。 （2）酵解作用的反應(yīng)式： C6H12O6+2Pi+2ADP2CH3CH(OH)COO-+2ATP+2H2O+2H+ 葡萄糖 無(wú)機(jī)磷酸 乳酸 （3）酒精發(fā)酵作用的反應(yīng)式 C6H12O6+2Pi+2ADP2CH3CH2OH+2 H2O +2CO2 乙醇 （4）從酵解總的能量變化來(lái)看，是一個(gè)放能過(guò)程，因此是一個(gè)不可逆的反應(yīng)。,糖酵解由葡萄糖到所有的中間產(chǎn)物都是以磷酸化合物的形式來(lái)實(shí)現(xiàn)的。中間產(chǎn)物磷酸化的意義： A 帶有負(fù)電荷的磷酸基團(tuán)使中間產(chǎn)物具有極性，從而使這些產(chǎn)物不易透過(guò)膜而散失。 B 磷酸基團(tuán)在各反應(yīng)步驟中，對(duì)酶來(lái)說(shuō)，起到信號(hào)基團(tuán)的作用，有利于與酶結(jié)合而被催化。 C 磷酸基團(tuán)經(jīng)酵解作用后，最