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文檔簡介

生長量測定法微生物基礎研究人員想到了用群體的變化量來間接反應群體的生長繁殖情況。血球計數板法平板菌落計數法染色計數法液體稀釋法測定微生物細胞數量的方法體積測量法稱干重法比濁法測定微生物菌體生長量的方法微生物群體在生長過程中伴隨著一系列生理指標發生變化酸堿度發酵液含氮量、含糖量、產氣量測定含氮量、含糖量、還原糖、氨基氮、ATP、DNA、RNA等，與生長量平行的生理指標，反應微生物的生長情況。一、測定微生物

細胞數量的

方法（一）血球計數板法直接計數法總菌數計數法

適用于各種含單細胞菌體的純培養懸浮液，但對雜菌和雜質不易分辯。（一）血球計數板法優點簡便直觀快捷缺點只適合個體較大的微生物，如酵母菌、霉菌的孢子，測定的結果是微生物個體的綜合，不能區別死活菌。（二）染色計數法利用染色劑，使死活細胞呈現不同顏色，計數活細胞即可（二）染色計數法查看酵母菌的活菌數用美蘭染色液對菌體進行染色后，活細胞無色，死細胞藍色，在顯微鏡下進行活菌計數就可以了。優點方便實用價格低廉操作簡單缺點時間不宜過長，否則部分活細胞也會著色，會干擾計數。（二）染色計數法（三）平板菌落計數法最常用的活菌計數法在高度稀釋條件下每一個活的單細胞均能繁殖成一個菌落，因而可以用培養的方法使每個活細胞生長成一個單獨的菌落，并通過長出的菌落數去推算菌懸液中的活菌數，因此菌落數就是待測樣品所含的活菌數。（三）平板菌落計數法涂布法傾注法（三）平板菌落計數法1.涂布平板法（三）平板菌落計數法2.傾注法混菌法混勻法二、測定微生物

菌體生長量

的方法體積測量法菌絲長度測量法稱干重法比濁法（一）稱干重法以干重直接衡量微生物群體的生物量；稱干重法往往利用離心或過濾法測定。（二）過濾法絲狀真菌用濾紙過濾，細菌用醋酸纖維膜等濾膜過濾，過濾后用少量水洗滌，在40℃下進行真空干燥，干燥后稱重。（三）體積測量法測菌絲濃度法把待測培養液放在刻度離心管中作自然沉降或離心，然后觀察其體積取一定量的待測培養液(如10mL)放在有刻度的離心中，設定一定的離心時間(如5min)和轉速(如5000r/min),離心后，倒出菌液，測出上清液體積V，則菌絲濃度為(10-V)/10。（四）比濁法主要用于發酵工業菌體生長監測取一根據培養液中菌體細胞數與渾濁度成正比，與透光度成反比的關系，利用分光光度計測定菌懸液的光密度值（OD值），以OD值來代表培養液中的濁度即微生物量。（四）比濁法主要用于發酵工業菌體生長監測為了對某一培養物類的菌體生長做定時跟蹤，可采用不必取樣的

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