第三章實驗動物的微生物學

和寄生蟲學控制第一節實驗動物的微生物學分類法第二節實驗動物常見的傳染性疾病第三節實驗動物微生物學質量檢測第三章實驗動物的微生物學分類第一節實驗動物按微生物學控制的分類

按對微生物學質量的控制，可將實驗動物分為四類：無菌動物(Germfreeanimal,GF)和悉生動物(Gnotobioticanimal,GN)無特定病原體動物(Specificpathogenfreeanimal,SPF)清潔動物(Cleananimal,CL)普通動物(Conventionalanimal,CV)第三章實驗動物的微生物學分類無菌動物（Germfreeanimal，簡稱GF）定義：指用現有的實驗手段檢測，動物的體表體內不攜帶其它生命體（包括一切微生物和寄生蟲）的實驗動物。飼養條件：無菌隔離器內來源：第一代通過無菌剖腹產術，人工哺乳獲得；以后通過無菌動物雌雄交配繁殖或無菌剖腹產術，奶媽代奶擴群。第三章實驗動物的微生物學分類2.悉生動物（Gnotobioticanimal，簡稱GN）定義：又稱已知菌動物，指動物體內帶有明確的微生物種類的動物。飼養條件：無菌隔離器內來源：人為將已知的微生物投給無菌動物，使其體內帶有已知菌單菌動物雙菌動物多菌動物第三章實驗動物的微生物學分類3.無特定病原體動物（Specificpathogenfreeanimal，簡稱SPF動物)定義：指不攜帶特定病原體（細菌、病毒、寄生蟲），但帶有未知的微生物群的動物。飼養條件：屏障系統內大規模生產/隔離器內保種最初來源：將無菌動物/悉生動物轉移到屏障系統中飼養繁殖應用：SPF大小鼠為國際通行的科研用動物第三章實驗動物的微生物學分類4.清潔動物（Cleananimal，簡稱CL動物）定義：微生物控制級別介于SPF動物和普通動物之間的動物飼養條件：屏障系統大規模生產來源：SPF動物擴群應用：各種科研、教學用大小鼠第三章實驗動物的微生物學分類5.普通動物（Conventionalanimal，簡稱CV動物）定義：不帶有嚴重危害動物自身健康和人獸共患病病原體的動物。飼養條件：普通開放環境來源：經微生物學檢查不帶有上述病原體的動物，或SPF動物降級。應用：豚鼠、兔、犬、猴等大動物的實驗研究。第三章實驗動物的微生物學分類不同微生物級別動物用于實驗的比較項目GF/GN動物SPF動物CV動物傳染病無無有或可能有寄生蟲無無有或可能有實驗結果準確準確有疑問應用動物數少少多統計學價值好可能好不準確長期實驗可能好可能好困難實驗中死亡率很低低高長期實驗存活率約100%約90%約40%實驗的正確設計可能可能不可能實驗結果的統計價值很高高有疑問第三章實驗動物的微生物學分類不同微生物等級動物飼養特點的比較微生物級別飼養環境空氣處理人與動物關系飼養人員素質飼養費用GF無菌隔離器超高效過濾間接接觸專門訓練高GN無菌隔離器超高效過濾間接接觸專門訓練高SPF屏障系統高效過濾直接接觸專門訓練較高CL半屏障系統亞高效過濾直接接觸一般較低CV開放系統不處理直接接觸一般低第三章實驗動物的微生物學分類目前我國實驗動物國家標準中已經取消普通級大小鼠，這意味著科研教學用的大小鼠必須使用清潔級或SPF級。豚鼠/兔只有普通級，清潔級豚鼠/兔大規模生產正在研究中。犬只有普通級。第三章實驗動物的微生物學分類第二節實驗動物常見的傳染性疾病一、傳染性疾病對實驗動物生產和動物實驗研究的影響引起動物死亡和質量下降（鼠痘、仙臺病毒感染、兔瘟、犬出血性腸炎等）。人獸共患病（淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒感染、流行性出血熱、B病毒感染。3.干擾實驗結果，影響科研的準確性和可靠性。第三章實驗動物的微生物學分類二、傳染病的概念病原微生物循著一定的途徑侵入動物體內，在機體內生長繁殖，破壞了動物的正常生理功能而引起發病，并能把病原體傳染給其他同類健康動物，引起疾病流行。第三章實驗動物的微生物學分類三、傳染病的防疫原則及措施傳染病發生的條件：傳染源、傳播途徑和易感動物。第三章實驗動物的微生物學分類預防和控制措施預防措施1）從有資質的實驗動物供應商處采購動物2）制定科學的飼養管理和操作規程,嚴格按操作規程進行飼養管理和動物實驗3）定期進行微生物學監測4）徹底消滅飼養室內外的野鼠5）大動物接種疫苗2.控制措施1）重要傳染病感染要及時捕殺、消毒、隔離2）大動物隔離治療3）不明死亡原因要剖檢明確診斷第三章實驗動物的微生物學分類物理消毒滅菌法1.煮沸或流通蒸汽消毒滅菌用于飲水瓶、衣帽、口罩、金屬器械、飲水等。一般不用于飼料消毒。2.高壓蒸汽滅菌用于大多數耐熱物品：墊料、籠具、飲水等。3.鈷60輻照用于飼料等。四、常用的消毒滅菌方法第三章實驗動物的微生物學分類1.鼠痘（Mousepox,Infectiousectromelia）病原學：鼠痘病毒（Poxviridae,mousepoxvirus）流行病學：

傳染源：病鼠，野生小鼠很少發生傳播途徑：接觸傳播、消化道傳播易感動物：小鼠（某些品系易感，某些品系抵抗）臨床癥狀：痘斑、脫腳、斷尾診斷：流行病學，臨床癥狀，病毒分離，實驗室檢查預防和控制：預防：嚴格執行規章制度，不從無生產許可證單位購買動物?？刂疲翰稓⒉∈?，消毒飼養室實驗動物常見傳染病疾病

1.病毒性疾病第三章實驗動物的微生物學分類2.狂犬病（Rabies）病原學：狂犬病毒（Rhabodovirus）流行病學：

傳染源：病犬、貓、豬等家畜，野生動物傳播途徑：咬傷，少數接觸傳播易感動物：犬科、貓科動物，人臨床癥狀：高度興奮，攻擊人獸，轉而麻痹。診斷：臨床癥狀觀察：10-14天后病犬死亡病毒分離：腦組織和唾液腺實驗室檢查：腦組織海馬回和小腦有病毒包涵體（內基氏小體）預防和控制：預防：不收購來源不清的野犬。人被咬傷后必須注射狂犬疫苗?？刂疲翰稓⒉∪?、野犬，焚燒或深埋。1.病毒性疾病第三章實驗動物的微生物學分類3.流行性出血熱病毒感染（Epidemichemorrhagicfevervirusinfection）病原學：流行性出血熱病毒（Bunyaviridae,Hantavirus)流行病學：

傳染源：帶毒野鼠和實驗大鼠傳播途徑：咬傷接觸傳播，氣溶膠吸入易感動物：大鼠臨床癥狀：無癥狀，人感染后得流行性出血熱診斷：血清學檢查，病毒分離預防和控制：預防：飼養區內外捕殺野鼠，不從無生產許可證單位購買動物?？刂疲翰稓⒀鍖W檢查陽性大鼠，消毒、隔離1.病毒性疾病第三章實驗動物的微生物學分類4.仙臺病毒感染（Sendaivirusinfection）病原學：仙臺病毒（Paramyxoviridae,Sendaivirus）流行病學：

傳染源：病鼠傳播途徑：呼吸道易感動物：所有實驗動物臨床癥狀：肺炎診斷:流行病學，臨床癥狀、實驗室檢查預防和控制：1.病毒性疾病第三章實驗動物的微生物學分類仙臺病毒感染肺病變第三章實驗動物的微生物學分類5.犬細小病毒感染病原學：犬細小病毒，細小病毒科流行病學：

傳染源：病犬傳播途徑：消化道，接觸傳播易感動物：2-8周齡幼犬類型：腸炎型和心肌炎型臨床癥狀：腸炎型：出血性壞死，抑郁，厭食，嘔吐，腹瀉心肌炎型：急性非化膿性心肌炎診斷:流行病學，剖解、血清學檢查預防和控制：1.病毒性疾病第三章實驗動物的微生物學分類6.鼠肝炎（Mousehepatitis）病原學：鼠肝炎病毒（Coronaviridae,Mousehepatitisvirus）流行病學：

傳染源：隱性感染鼠、病鼠傳播途徑：消化道，接觸傳播易感動物：小鼠臨床癥狀：乳鼠死亡，裸鼠“wastesyndrome”診斷:流行病學、剖解肝臟壞死，血清學檢查預防和控制：1.病毒性疾病第三章實驗動物的微生物學分類感染鼠肝炎的裸鼠wastesyndrome裸鼠的肝臟病變第三章實驗動物的微生物學分類2.細菌性疾病1.沙門氏菌病（Salmonella）病原學：沙門氏菌流行病學：

傳染源：患病動物和無癥狀帶菌動物傳播途徑：消化道易感動物：嚙齒類、兔臨床癥狀：突然死亡，腹瀉診斷：臨床癥狀，病原菌分離預防和控制：第三章實驗動物的微生物學分類豚鼠的脾臟病變小鼠肝臟病變第三章實驗動物的微生物學分類2.細菌性疾病2.細菌性肺炎病原學：肺炎雙球菌、克雷伯肺炎桿菌、鼠丹毒桿菌等流行病學：

傳染源：患病和隱性感染動物傳播途徑：呼吸道易感動物：所有實驗動物臨床癥狀：呼吸困難診斷：分離培養，血清學檢查預防和控制：加強管理，保持室溫，防止晝夜溫差過大。第三章實驗動物的微生物學分類3.寄生蟲病弓形體病（Toxoplasmainfection）病原學：弓形體生活史：有性繁殖：終末宿主貓包囊內滋養體裂殖體配子體配子卵囊成熟卵囊無性繁殖：中間宿主、終末宿主滋養體滋養體第三章實驗動物的微生物學分類滋養體裂殖體配子體囊合子小腸絨毛上皮細胞囊合子囊合子囊合子滋養體滋養體各種組織細胞有性繁殖：終末宿主貓無性繁殖：終末宿主、中間宿主第三章實驗動物的微生物學分類流行病學：傳染源：患病動物傳播途徑：消化道易感動物：各種實驗動物臨床癥狀：診斷：血清學檢查預防和控制：捕殺患病動物，消毒第三章實驗動物的微生物學分類第三節實驗動物的微生物學質量檢測一、微生物學監測的意義所謂微生物監測是指用微生物學的方法對不同等級的實驗動物進行定期的抽樣檢查，以確認該等級動物是否感染了某些病原體。因此，微生物學監測是一個群體的、流行病學上的概念，它是通過從一個群體中定期抽取少量樣本進行檢測，從而判斷整個群體中某一疾病流行情況的一種方法。第三章實驗動物的微生物學分類二、取樣原則、樣本數量、檢查頻度和方法1.取樣原則隨機抽樣哨兵動物：為確保長期試驗室實驗結果的可靠性，定期處死采血檢查以監視鼠群中某些疾病的流行，為微生物檢測所設置的指示動物。第三章實驗動物的微生物學分類2.樣本數量動物疾病病原體的傳染和寄生蟲的感染率與動物的敏感性有關。樣本數越大，可靠性就越高。3.檢查頻度

病原感染：潛伏期、顯性感染期、恢復期。按照抗體的生成變化，2-3個月一次定期監測較為合適。第三章實驗動物的微生物學分類三、微生物檢測的方法細菌學檢測取樣---細菌分離---可疑菌