1第五章微生物的新陳代謝內容提要本章介紹微生物的新陳代謝以能量代謝為中心講解不同營養類型的微生物的能量代謝機制擇要介紹微生物所特有的、重要的和有代表性的合成代謝途徑微生物代謝調節在發酵生產中的應用重點內容：微生物合成代謝和分解代謝的方式及發酵和呼吸的概念；難點內容：微生物代謝的方式和途徑。2代謝概論代謝（metabolism）：細胞內發生的各種化學反應的總稱代謝分解代謝(catabolism)合成代謝(anabolism)復雜分子（有機物）分解代謝合成代謝簡單小分子ATP[H]原文鏈接：/content/110/9/3369.abstract?sid=77af1f91-f537-4c13-a1ce-64dff61f6581

4第一節微生物的能量代謝能量代謝是新陳代謝中的核心問題。中心任務：把外界環境中的各種初級能源轉換成對一切生命活動都能使用的能源——ATP。

有機物最初能源 日光 通用能源 還原態無機物化能自養菌化能異養菌光能營養菌5一、化能異養微生物的生物氧化與產能

葡萄糖降解代謝途徑生物氧化：

發酵作用產能過程呼吸作用（有氧或無氧呼吸）生物氧化的概念:過程：脫氫（或電子）遞氫（或電子）受氫（或電子）微生物的能量代謝

——將最初能源轉換成通用的ATP過程6生物氧化的功能為：產能（ATP）、還原力[H]和小分子中間代謝物自養微生物利用無機物異養微生物利用有機物生物氧化能量微生物直接利用儲存在高能化合物（如ATP）中以熱的形式被釋放到環境中7微生物氧化的形式

①和氧的直接化合：

C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O②失去電子：

Fe2+→Fe3++e-③化合物脫氫或氫的傳遞:

CH3-CH2-OHCH3-CHONADNADH2生物氧化的形式：某物質與氧結合、脫氫或脫電子三種8（一）底物脫氫的4條途徑9（一）EMP途徑葡萄糖的酵解作用

(又稱：Embden-Meyerhof-Parnas

途徑，簡稱：EMP途

徑)活化移位

氧化磷酸化葡萄糖激活的方式己糖異構酶磷酸果糖激酶果糖二磷酸醛縮酶甘油醛-3-磷酸脫氫酶磷酸甘油酸激酶甘油酸變位酶烯醇酶丙酮酸激酶10EMP途徑關鍵步驟1.葡萄糖磷酸化→1.6二磷酸果糖(耗能)2.1.6二磷酸果糖→2分子3-磷酸甘油醛3.3-磷酸甘油醛→丙酮酸總反應式：葡萄糖+2NAD+2Pi+2ADP→2丙酮酸+2NADH2+2ATP

CoA↓丙酮酸脫氫酶

乙酰CoA，進入TCA11EMP途徑的特點基本代謝途徑，產能效率低，生理功能極其重要供應ATP形式的能量和NADH2形式的還原力產能（底物磷酸化產能）（1）1，3—P--甘油醛3—P--甘油酸+ATP；（2）PEP丙酮酸+ATP連接多個重要代謝途徑有氧：EMP途徑與TCA途徑連接；無氧：還原一些代謝產物，丙酮酸及其進一步代謝產物乙醛被還原成各種發酵產物（乙醇、乳酸、甘油、丙酮和丁醇等）

(專性厭氧微生物)產能的唯一途徑。提供多種中間代謝產物作為合成代謝的原料逆向反應可以合成多糖12（二）HMP途徑(戊糖磷酸途徑)

（HexoseMonophophatePathway）13分為兩個階段：1、3個分子6-磷酸葡萄糖在6-磷酸葡萄糖脫氫酶和6-磷酸葡萄糖酸脫氫酶等催化下經氧化脫羧生成6個分子NADPH2，3個分子CO2和3個分子5-磷酸核酮糖2、5-磷酸核酮糖在轉酮酶和轉醛酶催化下使部分碳鏈進行相互轉換，經三碳、四碳、七碳和磷酸酯等，最終生成2分子6-磷酸果糖和1分子3-磷酸甘油醛。146-磷酸果糖出路：可被轉變重新形成6-磷酸葡糖，回到磷酸戊糖途徑。甘油醛-3-磷酸出路：

a、經EMP途徑，轉化成丙酮酸，進入TCA途徑

b、變成己糖磷酸，回到磷酸戊糖途徑?？偡磻剑?6-磷酸葡萄糖+12NADP++3H2O→56-磷酸葡萄糖+6CO2+12NADPH+12H++Pi

特點：a

、不經EMP途徑和TCA循環而得到徹底氧化，無ATP生成，b、產大量的NADPH+H+還原力；c、產各種不同長度的重要的中間物（5-磷酸核糖、4-磷酸-赤蘚糖）d、單獨HMP途徑較少，一般與EMP途徑同存

e、HMP途徑是戊糖代謝的主要途徑。

15又稱2-酮-3-脫氧-6-磷酸葡糖酸（KDPG）裂解途徑。1952年在嗜糖假單胞菌（Pseudomonassaccharophila）中發現，后來證明存在于多種細菌中（革蘭氏陰性菌中分布較廣）。

ED途徑可不依賴于EMP和HMP途徑而單獨存在，是少數缺乏完整EMP途徑的微生物的一種替代途徑，未發現存在于其它生物中。（三）ED途徑16ED途徑

ATPADPNADP+NADPH2葡萄糖6-磷酸-葡萄糖6-磷酸-葡萄酸

~~激酶

（與EMP途徑連接）

~~氧化酶

(與HMP途徑連接)

EMP途徑3-磷酸-甘油醛~~脫水酶

2-酮-3-脫氧-6-磷酸-葡萄糖酸EMP途徑丙酮酸~~醛縮酶

有氧時與TCA環連接無氧時進行細菌發酵

ED途徑17ED途徑的特點特點:

a、步驟簡單

b、產能效率低：1ATPc、關鍵中間產物2-酮-3-脫氧-6-磷酸葡萄糖酸KDPG，特征酶：KDPG醛縮酶

細菌：銅綠、熒光假單胞菌,根瘤菌,固氮菌,膿桿菌,運動發酵單胞菌等。此途徑可與EMP途徑、HMP途徑和TCA循環相連接，可互相協調以滿足微生物對能量、還原力和不同中間代謝物的需要。好氧時與TCA循環相連，厭氧時進行乙醇發酵.18關鍵反應：2-酮-3-脫氧-6-磷酸葡萄糖酸的裂解催化的酶：6-磷酸脫水酶，KDPG醛縮酶相關的發酵生產：細菌酒精發酵 ATP有氧時經呼吸鏈

6ATP

無氧時進行發酵

2乙醇2ATPNADH+H+NADPH+H+2丙酮酸 ATP C6H12O6 KDPGED途徑的總反應192021TCA循環的生理意義：（1）為細胞提供能量。（2）三羧酸循環是微生物細胞內各種能源物質徹底氧化的共同代謝途徑。（3)三羧酸循環是物質轉化的樞紐。22TCA循環的重要特點1、循環一次的結果是乙酰CoA的乙酰基被氧化為2分子CO2,并重新生成1分子草酰乙酸；2、整個循環有四步氧化還原反應，其中三步反應中將NAD+還原為NADH+H+，另一步為FAD還原；3、為糖、脂、蛋白質三大物質轉化中心樞紐。4、循環中的某些中間產物是一些重要物質生物合成的前體；5、生物體提供能量的主要形式；6、為人類利用生物發酵生產所需產品提供主要的代謝途徑。如檸檬酸發酵；Glu發酵等。23二、遞氫、受氫和ATP的產生★根據遞氫特別是受氫過程中氫受體性質的不同,把微生物能量代謝分為呼吸作用和發酵作用兩大類.發酵作用：沒有任何外援的最終電子受體的生物氧化模式；呼吸作用：有外援的最終電子受體的生物氧化模式；★呼吸作用又可分為兩類：有氧呼吸——最終電子受體是分子氧O2;

無氧呼吸——最終電子受體是O2以外的無機氧化物，如NO3-、SO42-等.2425呼吸作用（respiration）

——從葡萄糖或其他有機物質脫下的電子或氫經過系列載體最終傳遞給外源O2或其他氧化型化合物并產生較多ATP的生物氧化過程。有氧呼吸（aerobicrespiration）無氧呼吸（anaerobicrespiration）

26呼吸鏈的功能：一是傳遞電子；二是將電子傳遞過程中釋放的能量合成ATP——這就是電子傳遞磷酸化作用（或稱氧化磷酸化作用）。27自EMP2NADH2自乙酰CoA2NADH2自TCA6NADH2自TCA2FADH2高能水平低氧化還原勢氧化態 還原態還原態 氧化態 氧化態 還原態還原態 醌 氧化態氧化態 還原態

脫氫酶NAD FADH2 H2ONADH2 FAD 1/2O2

+2H+低能水平高氧化還原勢FP Fe-S Cyt.b Cyt.c Cyt.a Cyt.a3

氧化酶典型的呼吸鏈28呼吸鏈在傳遞氫或電子的過程中，通過與氧化磷酸化作用的偶聯，產生生物的通用能源——ATP。目前獲得多數學者接受的是化學滲透學說。主要觀點：在氧化磷酸化過程中，通過呼吸鏈酶系的作用，將底物分子上的質子從膜的內側傳遞至外側，從而造成了質子在膜兩側分布的不均衡，即形成了質子梯度差（又稱質子動勢、pH梯度等）。這個梯度差就是產生ATP的能量來源，因為它可通過ATP酶的逆反應，把質子從膜的外側再輸回到內側，結果一方面消除了質子梯度差，同時就合成了ATP。氧化磷酸化產能機制29一個NAD分子，通過呼吸鏈進行氧化，可以產生3個ATP分子。它分別在三個位置，各產生一個ATP。如圖4－1所示，第一個ATP大約在輔酶1和黃素蛋白之間；第二個ATP大約在細胞色素b和cl之間；第三個ATP大約在細胞色素c和a之間。電子傳遞磷酸化舉例30概念：以無機氧化物中的氧作為最終電子（和氫）受體的氧化作用。一些厭氧和兼性厭氧微生物在無氧條件下進行無氧呼吸.無機氧化物：如NO3-、NO2-、SO42-、S2O32-等。如：以硝酸鉀為電子受體進行無氧呼吸時，可釋放出1796.14KJ自由能。2、無氧呼吸31特點：

a常規途徑脫下的氫，經部分呼吸鏈傳遞；

b氫受體：氧化態無機物（個別：延胡索酸）

c產能效率低。(1)硝酸鹽呼吸（反硝化作用）即硝酸鹽還原作用特點：

a有其完整的呼吸系統；

b只有在無氧條件下，才能誘導出反硝化作用所需的硝酸鹽還原酶A亞硝酸還原酶等

c兼性厭氧

細菌：銅綠假單胞、地衣芽孢桿菌等。無氧呼吸（厭氧呼吸）32硝酸鹽呼吸同化性硝酸鹽作用：

NO3-

NH3-NR-NH2

異化性硝酸鹽作用：無氧條件下，利用NO3-為最終氫受體

NO3-NO2NON2ON2

反硝化意義：1）使土壤中的氮（硝酸鹽NO3-）還原成氮氣而消失，降低土壤的肥力；2）反硝化作用在氮素循環中起重要作用。

氧化氮還原酶氧化亞氮還原酶亞硝酸還原酶硝酸鹽還原酶33

（２）硫酸鹽呼吸（硫酸鹽還原）

——厭氧時，SO42-

、SO32-、S2O32-等為末端電子受體的呼吸過程。特點：

a、嚴格厭氧；

b、大多為古細菌

c、極大多專性化能異氧型，少數混合型；

d、最終產物為H2S；

SO42-

SO32-SO2SH2Se、利用有機質（有機酸、脂肪酸、醇類）作為氫供體或電子供體；

f、環境：富含SO42-的厭氧環境（土壤、海水、污水等）

34（３）硫呼吸（硫還原）

——

以元素S作為唯一的末端電子受體。電子供體：乙酸、小肽、葡萄糖等被砷、硒化合物污染的土壤中，厭氧條件下生長一些還原硫細菌。利用Desulfotomaculumauripigmentum（氧化乙醇脫硫單胞菌）還原AsO43-生產三硫化二砷（雌黃）作用：生物礦化和微生物清污35其他類型無氧呼吸（４）鐵呼吸

——以Fe3+、Mn2+許多有機氧化物等作為末端電子受體的無氧呼吸。（５）碳酸鹽呼吸（碳酸鹽還原）

——以CO2、HCO3-

為末端電子受體產甲烷菌

—

利用H2作電子供體（能源）、CO2為受體，產物CH4；產乙酸細菌

—H2/CO2

進行無氧呼吸，產物為乙酸。（６）延胡索酸呼吸

——延胡索酸琥珀酸+1ATP?！肮砘稹钡纳飳W解釋36

定義

廣義：利用微生物生產有用代謝產物的一種生產方式狹義：厭氧條件下，以自身內部某些中間代謝產物作為最終氫（電子）受體的產能過程

特點：

1）通過底物水平磷酸化產ATP；

2）葡萄糖氧化不徹底，大部分能量存在于發酵產物中；

3）產能效率低；

4）產多種發酵產物。3、發酵（fermentantion）37①酵母型酒精發酵②同型乳酸發酵③丙酸發酵④混合酸發酵⑤2,3—丁二醇發酵⑥丁酸發酵（1）丙酮酸的發酵產物38①酵母型乙醇發酵

1G2丙酮酸2乙醛+CO22乙醇+2ATP

條件：pH3.5~4.5,厭氧菌種：釀酒酵母、少數細菌（胃八疊球菌、解淀粉歐文氏菌等）

i、加入NaHSO4NaHSO4+乙醛磺化羥乙醛（難溶）

ii、弱堿性（pH7.5）

2乙醛1乙酸+1乙醇（歧化反應）磷酸二羥丙酮作為氫受體，經水解去磷酸生成甘油——甘油發酵（EMP）---亞硫酸氫鈉必須控制亞適量（3%）

39概念：有氧條件下，發酵作用受抑制的現象（或氧對發酵的抑制現象）。意義：合理利用能源通風對酵母代謝的影響通風（有氧呼吸）缺氧（發酵）酒精生成量耗糖量/單位時間細胞的繁殖低（接近零）少旺盛高多很弱至消失巴斯德效應(ThePasteureffect)現象：40葡萄糖3-磷酸甘油醛磷酸二羥丙酮2(1,3-二-磷酸甘油酸）2乳酸

2丙酮酸②同型乳酸發酵2NAD+2NADH4ATP4ADP2ATP2ADPLactococcuslactisLactobacillusplantarum概念菌種途徑特點41③混合酸發酵概念：埃希氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌屬的一些菌通過EMP途徑將葡萄糖轉變成琥珀酸、乳酸、甲酸、乙醇、乙酸、H2和CO2等多種代謝產物，由于代謝產物中含有多種有機酸，故將其稱為混合酸發酵。

葡萄糖琥泊酸草酰乙酸磷酸烯醇式丙酮酸乳酸丙酮酸乙醛乙酰CoA甲酸乙醇乙酰磷酸CO2H2

乙酸丙酮酸甲酸裂解酶乳酸脫氫酶甲酸-氫裂解酶磷酸轉乙酰酶乙酸激酶PEP羧化酶乙醛脫氫酶+2HpH﹤6.242混合酸發酵：

——腸道菌（E.coli、沙氏菌、志賀氏菌等）1G丙酮酸乳酸乳酸脫氫酶

乙酰-CoA+甲酸丙酮酸甲酸解酶草酰乙酸丙酸PEP羧化酶磷酸轉乙?；敢胰┟摎涿敢宜峒っ敢掖济摎涿敢宜嵋掖糆.coli與志賀氏菌的區別：葡萄糖發酵試驗：

E.coli、產氣腸桿菌

甲酸CO2+H2

（甲酸氫解酶、H+）志賀氏菌無此酶，故發酵G不產氣。CO2+H2

43④2,3-丁二醇發酵

葡萄糖乳酸丙酮酸乙醛乙酰CoA甲酸乙醇乙酰乳酸

二乙酰

3-羥基丁酮

2,3-丁二醇CO2H2-乙酰乳酸合成酶-乙酰乳酸脫羧酶2,3-丁二醇脫氫酶概念：腸桿菌、沙雷氏菌、和歐文氏菌屬中的一些細菌具有-乙酰乳酸合成酶系而進行丁二醇發酵。EMP44丁二醇發酵（2，3--丁二醇發酵）

——

腸桿菌、沙雷氏菌、歐文氏菌等丙酮酸乙酰乳酸3-羥基丁酮乙二酰紅色物質（乙酰乳酸脫氫酶）（OH-、O2）中性丁二醇精氨酸胍基其中兩個重要的鑒定反應：

1、V．P．實驗2、甲基紅（M.R）反應產氣腸桿菌：V.P.試驗（+），甲基紅（-）

E.coli：V.P.試驗（-），甲基紅（+）V.P.試驗的原理：45（2）通過HMP途徑的發酵異型乳酸發酵（HMP途徑）異型乳酸發酵的“經典”途徑腸膜明串株菌（

HMP

）產能：1ATP

異型乳酸發酵的雙歧桿菌途徑雙歧桿菌（HMP

、HK）

產能：2G5ATP即1G2.5ATP46①異型乳酸發酵：葡萄糖6-磷酸葡萄糖6-磷酸葡萄糖酸5-磷酸木酮糖3-磷酸甘油醛乳酸乙酰磷酸NAD+NADHNAD+NADHATPADP乙醇乙醛乙酰CoA2ADP2ATP-2H概念菌種途徑特點-CO247②雙歧發酵：雙歧桿菌通過HMP途徑發酵葡萄糖的途徑特點：每分子葡萄糖產3分子乙酸、2分子乳酸、5分子ATP48磷酸己糖酮解途徑2葡萄糖

2葡萄糖-6-磷酸6-磷酸果糖6-磷酸-果糖4-磷酸-赤蘚糖乙酰磷酸2木酮糖-5-磷酸2甘油醛-3-磷酸2乙酰磷酸2乳酸2乙酸乙酸磷酸己糖解酮酶磷酸己糖解酮酶戊逆HMP途徑同EMP乙酸激酶4950（4）氨基酸的發酵產能（stickland反應）發酵菌體：生孢梭菌、肉毒梭菌、斯氏梭菌、雙酶梭菌等。特點：氨基酸的氧化與另一些氨基酸還原相偶聯；產能效率低（1ATP）氫供體（氧化）氨基酸：

Ala、Leu、Ile、Val、His、Ser、Phe、Tyr、

Try等。氫受體（還原）氨基酸：

Gly、Pro、Arg、Met、Leo、羥脯氨酸等。

51氧化

丙氨酸丙酮酸-NH3NAD+NADH乙酰-CoANAD+NADH乙酸+ATP甘氨酸乙酸甘氨酸-NH3還原5253二、自養微生物產ATP和產還原力化能無機自養型微生物光能自養型微生物兩類自養微生物固定CO2的條件和途徑P119圖5-18化能自養型微生物還原CO2時ATP和[H]的來源

P120圖5-1954(一）化能自養微生物：通常是化能自養型細菌，一般是好氧菌。

產能的途徑主要是借助于無機電子供體(能源物質)的氧化，從無機物脫下-的氫(電子)直接進入呼吸鏈通過氧化磷酸化產生ATP。最普通的電子供體是氫、還原型氮化合物、還原型硫化合物和亞鐵離子(Fe2＋)。利用卡爾文循環固定C02作為它們的碳源。最重要反應：

CO2

還原成[CH20]水平的簡單有機物，進一步合成復雜細胞成分

——大量耗能、耗還原力的過程。5556（一）化能自養微生物能對無機物進行氧化而獲得能量的微生物，稱作化能無機自養型微生物。ATP和[H]來源：通過氧化無機底物如NH4+、NO2-、H2S、S0、H2、Fe2+等而獲得。產能途徑：借助于經過呼吸鏈的氧化磷酸化反應。傳遞方式：逆呼吸鏈最初能源及無機氫供體57

化能自養細菌的能量代謝特點：

①無機底物脫下的氫（電子）從相應位置直接進入呼吸鏈氧化磷酸化產能。②電子可從多處進入呼吸鏈，所以呼吸鏈有多種多樣。③產能效率，即氧化磷酸化效率(P／0值)通常要比化能異養細菌的低。④生長緩慢，產細胞率低。有以下特點：無機底物上脫下的氫(電子)直接進入呼吸鏈。581硝化細菌

能氧化氮的化能無機營養型細菌，桿狀、橢圓形、球形、螺旋形或裂片狀，且它們可能有極生或周生鞭毛。好氧、沒有芽孢的革蘭氏陰性有機體，在細胞質中有非常發達的內膜復合體。

將氨氧化成硝酸鹽的過程稱為硝化作用。

a、亞硝化細菌

NH3+O2+2H+NH2OH+H2OA氨單加氧酶羥氨氧化酶HNO2+4H++4e-b、硝化細菌NO2-+H2O

亞硝酸氧化酶NO3-+2H++2e-根據它們氧化無機化合物的不同也稱氨氧化細菌(產生1分子ATP)592氫細菌（氧化氫細菌）

能利用氫作為能源的細菌組成的生理類群稱氫細菌或氫氧化細菌(hydrogenoxidizingbacteria)。兼性化能自養菌主要有假單胞菌屬、產堿桿菌屬(Alcaligenes)、副球菌屬、芽孢桿菌屬、黃桿菌屬(Flavobacterium)、水螺菌屬(Aquaspirillum)、分支桿菌屬(Mycobacterium)和諾卡氏菌屬(Nocardia)等。

產能：2H2+O2

—2H2O

合成代謝反應：

2H2+CO2

—[CH2O]+H2O。60

氫細菌的自氧作用

第一步：產能反應，氧化4分子H。產生1分子ATP；

第二步：合成代謝反應，用所產生的ATP還原C02構成細胞物質[CH2O]和生長。在Ralstoniaeutropha中存在兩種氫酶，一種膜結合氫酶涉及質子動勢而細胞質中的氫酶為Calvincycle

提供還原力NADH。613硫細菌（硫氧化細菌）

——利用H2S、S02、S2O32-等無機硫化物進行自養生長,主要指化能自氧型硫細菌大多數硫桿菌，脫下的H+（e-）經cyt.c部位進入呼吸鏈；而脫氮硫桿菌從FP或cyt.b水平進入。

嗜酸型硫細菌能氧化元素硫和還原性硫化物外，還能將亞鐵離子(Fe2＋)氧化成鐵離子(Fe3＋)。62（二）光能營養微生物微生物的光合作用

真核生物：藻類及其他綠色植物

產氧原核生物：藍細菌光能營養型生物不產氧（僅原核生物有）真細菌：光合細菌

古生菌：嗜鹽菌63（二）光能營養微生物1.循環光合磷酸化：光合細菌的原始光合作用，在光能驅動下通過電子的循環式傳遞而完成磷酸化產能反應，是不產氧光合作用。特點：電子傳遞途徑屬循環方式，即光驅使下，電子自菌綠素上逐出后，經過類似呼吸鏈的循環，又回到菌綠素；產能和產還原力分別進行還原力來自H2S等無機氫供體不產生氧64光驅使下，電子自菌綠素上逐出后，經過類似呼吸鏈的循環，又回到菌綠素產ATP和還原力分別進行.紫色細菌循環光合磷酸化過程

65外源電子供體——H2S等無機物氧化放出電子，最終傳至失電子的光合色素時與ADP磷酸化偶聯產生ATP。特點：只有一個光合系統，光合作用釋放的電子僅用于NAD+還原NADH，但電子傳遞不形成環式回路。綠硫細菌和綠色細菌662.非循環光合磷酸化是各種綠色植物、藻類和藍細菌共有的利用光能產生ATP的磷酸化反應。特點：電子的傳遞途徑屬非循環式的在有氧條件下進行有PSⅠ和PSⅡ兩個光合系統反應中可同時產ATP（產自PSⅡ）、還原力（產自PSⅠ）和O2（產自PSⅡ）還原力NADPH2中的[H]來自H2O分子的光解產物H+和電子67

2非循環光合磷酸化

當光反應中心I的葉綠素P700吸收光量子能量后釋放的電子，經過黃素蛋白和鐵氧還蛋白(Fd)傳遞給NAD+（NADP’）生成NADH（NADPH）+H’(還原力)，而不是返回氧化型P700。光合系統II將電子提供給氧化型P700，并產生ATP。光合系統II天線色素吸收光能并激發P680放出電子，然后還原脫鎂葉綠素a(脫鎂葉綠素a是2個氫原子取代中心鎂原子的葉綠素a)，經過由質體醌(plastoquinone，PQ)、Cyt.b、Cyt.f和質體藍素(plastocyanin，PC)組成的電子傳遞鏈到氧化型P700（不返回氧化型P680），而氧化型P680從水氧化成02過程中得到電子。在光系統Ⅱ中，電子由PQ經Cyt.b傳遞給Cyt.f時與ADP磷酸化偶聯產生ATP。68藍細菌等的產氧光合作用——非循環光合磷酸化過程693.嗜鹽菌紫膜的光介導ATP合成嗜鹽菌在無氧條件下，利用光能所造成的紫膜蛋白上視黃醛輔基構象的變化，可使質子不斷驅至膜外，從而在膜兩側建立一個質子動勢，再由它來推動ATP酶合成ATP，此即光介導ATP合成。紫膜：由細菌視紫紅質和類脂組成。嗜鹽菌紫膜光合磷酸化：迄今發現的最簡單的光合磷酸化反應，是驗證化學滲透學說的絕好實驗模型。703依靠菌視紫紅質的光合作用無葉綠素或菌綠素參與的獨特的光合作用，是迄今為止最簡單的光合磷酸化反應。

——極端嗜鹽古細菌

菌視紫紅質：

以“視黃醛”（紫色）為輔基。與葉綠素相似，具質子泵作用。與膜脂共同構成紫膜；埋于紅色細胞膜（類胡蘿卜素）內。

71ATP合成機理：視黃醛吸收光，構型改變，質子泵到膜外，膜內外形成質子梯度差和電位梯度差，是ATP合成的原動力，驅動ATP酶合成ATP。72第三節 微生物獨特合成代謝舉例主要內容：一、自養微生物的CO2固定二、生物固氮三、肽聚糖生物合成73一、自養微生物的CO2固定（一）Calvin循環又稱Calvin-Benson循環、Calvin-Bassham循環、核酮糖二磷酸途徑或還原性戊糖磷酸循環，是光能自養生物和化能自養生物固定CO2的主要途徑。綠色植物、藍細菌、多數光合細菌，硫細菌、鐵細菌、硝化細菌等。6個1,5-二磷酸核酮糖在核酮糖二磷酸羧化酶作用下將6分子CO2固定，形成2分子甘油醛－3－磷酸。74Calvin循環的過程羧化反應還原反應受體再生激酶羧化酶75Calvin循環的總反應6CO2+18ATP+12NAD（P）H2——→C6H12O6+18ADP+18Pi十12NAD（P）+ΔG0‘＝+114千卡／摩爾＝476.86千焦/摩爾76（二）厭氧乙酰-CoA途徑活性乙酸途徑，這個體系與還原羧酸循環不同，不需要ATP，光合細菌也有可能利用這個體系把CO2換成乙酸。途徑見P131圖5-3177（三）逆向TCA循環還原性TCA循環，途徑見P132圖5-32是在光合細菌、綠硫細菌中發現的。還原三羧酸循環的第—步反應是將乙酰CoA還原羧化為丙酮酸，后者在丙酮酸羧化酶的催化下生成磷酸烯醇式丙酮酸，隨即被羧化為草酰乙酸，草酰乙酸經一系列反應轉化為琥珀酰CoA，再被還原羧化為а-酮戊二酸。а-酮戊二酸轉化為檸檬酸后，裂解成乙酸和草酰乙酸。乙酸經乙酰-CoA，從而合成酶催化生成乙酰CoA，從而完成循環反應。每循環—次，可固定四分子CO2，合成一分子草酰乙酸，消耗三分子ATP、兩分子NAD(P)H和—分子FADH2。78（四）羥基丙酸途徑少數綠色硫細菌Chloroflexus(綠彎菌屬）在以H2或H2S作電子供體進行自養生活時所特有的CO2固定機制。通過羥基丙酸途徑，把2個CO2轉變為草酰乙酸?？偡磻剑?CO2+4[H]+3ATP關鍵步驟：羥基丙酸的產生，P133圖5-33草酰乙酸79（一）固氮微生物的種類

一些特殊類群的原核生物能夠將分子態氮還原為氨，然后再由氨轉化為各種細胞物質。微生物利用其固氮酶系催化大氣中的分子氮還原成氨的過程稱為固氮作用。

自生固氮菌：獨立固氮（氧化亞鐵硫桿菌等）共生固氮菌：與它種生物共生才能固氮形成根瘤及其他形式聯合固氮菌：必須生活在植物根際、葉面或動物腸道等處才能固氮的微生物。根際—芽孢桿菌屬；葉面—固氮菌屬。二、生物固氮作用80（二）固氮的生化機制2、固氮反應的條件

aATP的供應：

1molN2

—10~15ATPb還原力[H]及其載體氫供體：H2、丙酮酸、甲酸、異檸檬酸等。電子載體：鐵氧還蛋白（Fd）或黃素氧還蛋白（Fld）。

c固氮酶

組分I：真正“固氮酶”，又稱鉬鐵蛋白（MF）、鉬鐵氧還蛋白（MoFd）81組分II：

固氮酶還原酶，不含鉬，又稱鐵蛋白、固氮鐵氧還蛋白（AzoFd）特性：對氧極為敏感；需有Mg2+的存在；專一性：除N2外，可還原其他一些化合物

C2H2

—C2H4；

2H+

—H2

；

N2O—N2；HCN—CH4+NH3

（乙炔反應：可用來測知酶活）d還原底物N2：

NH3存在時會抑制固氮作用。82

N2+8[H]

+（16~24）ATP—2NH3+H2+（16~24）ADP+18~24Pi即75%還原力用來還原N2，25%的還原力以H2形式浪費3、固氮生化途徑4H+

+4eH283固氮的生化途徑84(1)好氧性自生固氮菌的抗氧保護機制

呼吸保護；構象保護。(2)藍細菌固N酶的抗氧保護機制

a分化出特殊的還原性異形胞（——適宜固氮作用的細胞）

I、厚壁，物理屏障；

II、缺乏氧光合系統II，脫氧酶、氫酶活性高；

III、SOD活性很高；

IV、呼吸強度高

b非異形胞藍細菌固N酶的保護

——缺乏獨特的防止氧對固N酶的損傷機制。

I、固N、光合作用在時間上分隔開

——

織線藍菌屬（黑暗：固N；光照：光合作用）

II、形成束狀群體（束毛藍菌屬），利于固N酶在微氧環境下固N

III、提高胞內過氧化酶、SOD的活力，解除氧毒（粘球藍菌屬）85微生物特有的結構大分子：細菌：肽聚糖、磷壁酸、脂多糖、各種莢膜成分等真菌：葡聚糖、甘露聚糖、纖維素、幾丁質等肽聚糖：絕大多數原核微生物細胞壁所含有的獨特成分；在細菌的生命活動中有重要功能，尤其是許多重要抗生素如青霉素、頭孢霉素、萬古霉素、環絲氨酸（惡唑霉素）和桿菌肽等呈現其選擇毒力（selectivetoxicity）的物質基礎，是在抗生素治療上有特別意義的物質。合成特點：①合成機制復雜，步驟多，且合成部位幾經轉移；②合成過程中須要有能夠轉運與控制肽聚糖結構元件的載體（UDP和細菌萜醇）參與。合成過程：依發生部位分成三個階段：細胞質階段：合成派克（Park）核苷酸細胞膜階段：合成肽聚糖單體細胞膜外階段：交聯作用形成肽聚糖三、微生物結構大分子——肽聚糖的合成8687“Park”核苷酸的合成88

——肽聚糖單體亞單位的合成

載體：細菌萜醇（類脂載體）

——C55類異戊二烯醇（含11個異戊二烯單位）穿膜的同時與G結合，接上肽橋，此外，類脂載體還參與胞外多糖、脂多糖的合成（磷壁酸、纖維素、幾丁質、甘露聚糖等）萬古霉素，桿菌肽所抑制這些反應

2細胞膜中的合成89肽聚糖單體的合成——細菌萜醇細菌萜醇（bactoprenol）：又稱類脂載體；運載“Park”核苷酸進入細胞膜，連接N-乙酰葡糖胺和甘氨酸五肽“橋”，最后將肽聚糖單體送入細胞膜外的細胞壁生長點處。結構式：

CH3 CH3 CH3 CH3C=CHCH2(CH2C=CHCH2)9CH2C=CHCH2―OH功能：除肽聚糖合成外還參與微生物多種細胞外多糖和脂多糖的生物合成，如：細菌的磷壁酸、脂多糖， 細菌和真菌的纖維素， 真菌的幾丁質和甘露聚糖等。90肽聚糖單體的合成G-M-P-P-類脂M-P-P-類脂 UDPUDP-G ②UDP ①UDP-M

P-類脂 Pi⑤

P-P-類脂桿菌肽④ 萬古霉素 5甘氨酰-tRNA③ 5tRNA插入至膜外肽聚糖合成處G-M-P-P-類脂雙糖肽位于細胞膜外細胞壁生長點處細胞質細胞膜上91（三）膜外的合成

第一步——多糖鏈的伸長（橫向連接）：

肽糖單體+引物（6~8肽糖單位）—多糖鏈橫向延伸1雙糖單位。第二步——相鄰多糖鏈相聯（縱向連接）：

2D-Val—M-4肽+D-Val

—甲肽尾五甘氨酸肽的游離—NH與乙肽尾

D-Val（第4個氨基酸）游離COOH轉肽作用：

青霉素所抑制。青霉素為D-Val-D-Val結構類似物，競爭轉肽酶轉糖基（形成-1，4糖苷鍵）92轉糖基作用和轉肽作用9394思考題一．選擇題：1、Lactobacillus

是靠__________產能。A.發酵B.呼吸C.光合作用2、自然界中的大多數微生物是靠_________產能。A.發酵B.呼吸C.光合磷酸化3、在原核微生物細胞中單糖主要靠__________途徑降解生成丙酮酸。A.EMPB.HMPC.ED4、在下列微生物中__________能進行產氧的光合作用。A.鏈霉菌B.藍細菌C.紫硫細菌5、合成氨基酸的重要前體物α-酮戊二酸來自_________。A.EMP途徑。B.ED途徑C.TCA循環6、反硝化細菌進行無氧呼吸產能時,電子最后交給________。A.無機化合物中的氧B.O2C.中間產物7、參與肽聚糖生物合成的高能磷酸化合物是：A.ATPB.GTPC.UTP95二、判斷題

EMP途徑主要存在于厭氧生活的細菌中。()EMP途徑主要存在于好氧細菌中。()乳酸發酵和乙酸發酵都是在厭氧條件下進行的。()一分子葡萄糖經同型乳酸發酵可產2個ATP,經異型乳酸發酵可產1個ATP。()一分子葡萄糖經同型乳酸發酵可產1個ATP,經異型乳酸發酵產2個ATP。()丙酮丁醇發酵是在好氣條件下進行的,該菌是一種梭狀芽孢桿菌。()UDP--G,UDP--M是合成肽聚糖的重要前體物,它們是在細胞質內合成的。()組成肽聚糖的前體物UDP--G,UDP--M是在細胞膜上合成后運到細胞壁上聯結的。()ED途徑存在于某些好氧生活的G-細菌中。()ED途徑主要存在于某些G-的厭氧菌中。()96丙酮丁醇細菌是一種梭狀芽孢桿菌,它在厭氧條件下進行丙酮丁醇發酵產生丙酮和丁醇。()化能自養菌還原力的產生是在消耗ATP的情況下通過反向電子傳遞產生的。()德氏乳酸桿菌走EMP途徑進行同型乳酸發酵。()雙歧桿菌走HK途徑進行異型乳酸發酵。()Saccharomycescerevisiae

走EM途徑進行酒精發酵。()Zymomonas

走ED途徑進行酒精發酵。()97三．填空題：合成代謝是__________能代謝。分解代謝是_________能代謝。異養微生物合成代謝所需要的能量來自己糖降解的__________,__________,__________和__________。異養微生物合成代謝所需要的還原力來自己糖降解的__________,_________,__________和_________。在發酵過程中,葡萄糖首先通過__________途徑產生2個________。無氧呼吸是以__________作為最終電子受體。一分子葡萄糖經有氧呼吸徹底氧化可產生__________個ATP。光合磷酸化有__________和__________兩種。98發酵是在__________條件下發生的。每一分子葡萄糖通過酵母菌進行乙醇發酵產生__________個ATP。同型乳酸發酵的產物有__________,__________。在合成代謝中,能量的直接來源是__________中的高能磷酸鍵的水解。微生物優先利用的能源物質是_________。微生物在進行生命活動過程中所消耗的能量有兩個來源,即__________和__________。自養微生物所需能量來自__________或_________。發酵的產能水平較__________呼吸作用的產能水平較__________。99大多微生物的產能方式是