ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T36789—2018

動物狂犬病病毒核酸檢測方法

Nucleicaciddetectionofanimalrabiesvirus

2018-09-17發(fā)布2019-04-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T36789—2018

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出

。

本標準由全國動物衛(wèi)生標準化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位軍事醫(yī)學科學院軍事獸醫(yī)研究所

:。

本標準主要起草人馮燁郭煥成許運斌江禹涂長春

:、、、、。

Ⅰ

GB/T36789—2018

引言

本文件的發(fā)布機構(gòu)提請注意聲明符合本文件時可能涉及與套式檢測方法相關(guān)的專

,,4.4RT-PCR

利的使用

。

本文件的發(fā)布機構(gòu)對于該專利的真實性有效性和范圍無任何立場

、。

該專利持有人已向本文件的發(fā)布機構(gòu)保證他愿意同任何申請人在合理且無歧視的條款和條件下

,,

就專利授權(quán)許可進行談判該專利持有人的聲明已在本文件的發(fā)布機構(gòu)備案相關(guān)信息可以通過以下

。。

聯(lián)系方式獲得

:

專利持有人姓名江禹涂長春

:、

地址吉林省長春市凈月經(jīng)濟開發(fā)區(qū)柳鶯西路號軍事醫(yī)學科學院軍事獸醫(yī)研究所

:666

請注意除上述專利外本文件的某些內(nèi)容仍可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別這些專

,。

利的責任

。

Ⅱ

GB/T36789—2018

動物狂犬病病毒核酸檢測方法

1范圍

本標準規(guī)定了檢測動物狂犬病病毒核酸的套式和熒光定量方法

RT-PCRRT-PCR。

本標準適用于臨床疑似狂犬病病毒感染動物腦組織脊髓腦脊液唾液腺唾液以及狂犬病病毒細

、、、、

胞培養(yǎng)物中病毒核酸的檢測參見附錄

(A)。

2縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應

RT-PCR:-(Reverse-TranscriptionPolymeraseChainReaction)

脫氧核糖核酸

DNA:(DeoxyribonucleicAcid)

核糖核酸

RNA:(RibonucleicAcid)

焦炭酸乙二酯

DEPC:(Diethypyocarbonate)

磷酸鹽緩沖液

PBS:(PhosphateBufferSolution)

值達到閾值的循環(huán)數(shù)

Ct:(CycleThreshold)

乙二胺四乙酸

EDTA:(EthyleneDiaminetetraaceticAcid)

三磷酸脫氧核糖核苷

dNTP:(Deoxy-RibonucleosideTriphosphate)

Taq酶耐熱聚合酶

:DNA(ThermusAquaticusPolymerase)

3器材和試劑

31器材

.

311儀器

..

級生物安全柜離心機冰箱冰柜分析天平擴增儀熒光定量

II、4℃、(-20℃)、(4℃)、、PCR、PCR

擴增儀電泳儀電泳槽紫外凝膠成像儀或紫外分析儀微波爐震蕩混勻器組織研磨器單道可調(diào)

、、、()、、、、

移液器

(10μL、200μL、1000μL)。

312耗材

..

手術(shù)剪醫(yī)用鑷子稱量紙棉簽瓊脂糖量筒錐形瓶一次性無槍頭

、、、、、(500mL)、(500mL)、RNase

無離心管與熒光定量擴增儀配套的管

(10μL,200μL,1000μL)、RNase(1.5mL)、PCRPCR

組織研磨棒

(0.2mL)、。

32試劑

.

321總提取試劑

..RNA。

322磷酸鹽緩沖液配制方法見附錄

..(1mol/LPBS,pH7.4)。B。

323電泳緩沖液配制方法見附錄

..TAE。B。

324其他試劑反轉(zhuǎn)錄酶