ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T31803—2015

棉花皺葉病毒檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofCottonleafcrumplevirus

2015-07-03發(fā)布2015-11-27實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T31803—2015

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別這些專利的責(zé)任

。。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院中華人民共和國(guó)福建出入境檢驗(yàn)檢疫局浙江大學(xué)浙

:、、、

江出入境檢驗(yàn)檢疫局

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人張永江雷榮沈建國(guó)周雪平魯潔張明哲李桂芬朱水芳

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T31803—2015

棉花皺葉病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了棉花皺葉病毒的免疫學(xué)及分子生物學(xué)檢疫鑒定等方法

。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于可能攜帶棉花皺葉病毒的活體寄主植物葉片組織的檢疫鑒定

。

2儀器設(shè)備用具和試劑

、

21儀器設(shè)備

.

電子分析天平小型離心機(jī)臺(tái)式冷凍離心機(jī)恒溫水浴鍋酶標(biāo)儀普通儀實(shí)時(shí)熒

(0.001g)、、、、、PCR、

光儀電泳系統(tǒng)計(jì)凝膠成像系統(tǒng)冰箱超凈工作臺(tái)超低溫冰箱高壓滅菌鍋

PCR、、pH、、4℃、、-80℃、、

制冰機(jī)渦旋振蕩器微波爐等

、、。

22用具

.

可調(diào)移液器吸頭離心管管

(2.5μL、10μL、20μL、100μL、1000μL)、、、Eppendorf(0.2mL、

和研缽等

0.5mL、1.5mL)。

23試劑

.

除有特殊說明外所有實(shí)驗(yàn)用試劑均為分析純或生化試劑

,。

常規(guī)及實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)試劑分別見附錄附錄及附錄

DAS-ELISA、PCRPCRB、CD。

3檢疫鑒定方法

31DAS-ELISA檢測(cè)

.

檢測(cè)見附錄

DAS-ELISAB。

32常規(guī)PCR檢測(cè)

.

常規(guī)檢測(cè)見附錄

PCRC。

33實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)

.

實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)見附錄

PCRD。

4結(jié)果判斷

及中兩種不同原理的檢測(cè)方法的結(jié)果為陽(yáng)性即可判定樣品為陽(yáng)性一般是

3.1、3.23.3,CLCrV。

檢測(cè)為陽(yáng)性后常規(guī)或?qū)崟r(shí)熒光檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性即可判斷樣品為陽(yáng)性

DAS-ELISA