1、核酸類藥物的生產(chǎn) 1、 核酸藥物的分類核酸藥物的分類2、核酸類藥物的生產(chǎn)方法、核酸類藥物的生產(chǎn)方法 3、核酸類藥物的生產(chǎn)實例、核酸類藥物的生產(chǎn)實例 4、核酸類藥物的檢測、核酸類藥物的檢測5、核酸藥物的應(yīng)用、核酸藥物的應(yīng)用 主主 要要 內(nèi)內(nèi) 容容核酸藥物的分類核酸藥物的分類藥理功能藥理功能：有助于改善機體的物質(zhì)代謝和能量代謝平衡，加速受損組織的修復(fù)，促使機體恢復(fù)正常生理功能。如如：DNA、RNA、肌苷、ATP、輔酶A、脫氧核苷酸、肌苷酸等。 獲得獲得：微生物發(fā)酵或從生物資源中提取生產(chǎn)。 藥理功能藥理功能：治療病毒、腫瘤、愛滋病的重要藥物，也是產(chǎn)生干擾素、免疫抑制劑的臨床藥物。 如如：三氟代胸苷、

2、疊氮胸苷等。獲得獲得：由自然結(jié)構(gòu)的核酸類物質(zhì)通過半合成生產(chǎn)。具有天然結(jié)構(gòu)的核酸類物質(zhì)天然堿基、核苷、核苷酸的類似物或聚合物 核酸類藥物的生產(chǎn)方法 DNA主要存在于細胞核中，RNA主要存在于細胞質(zhì)中。1、核酸的生產(chǎn)一般采用提取法，即從粉碎、破裂的生物組織細胞中通過一定的方法獲取總DNA或總RNA。 2、獲取大分子核酸的另一方法是人工合成，即利用化學(xué)的方法按照設(shè)定的核苷酸順序逐一加入形成核酸。現(xiàn)已有核酸合成儀，但合成長度還有一定限制，并且該儀器價格昂貴。因此這種方法一般用于研究，不適合生產(chǎn)。 DNA和和RNA的生產(chǎn)方法的生產(chǎn)方法 核酸類藥物的生產(chǎn)方法 核苷酸、核苷及堿基類似物的生產(chǎn)方法核苷酸、核苷

3、及堿基類似物的生產(chǎn)方法1 1、酶解法、酶解法 核酸類藥物的生產(chǎn)方法 2、半合成法、半合成法 微生物發(fā)酵與化學(xué)合成并用。 由于發(fā)酵法生產(chǎn)核苷的產(chǎn)率很高，因此可由發(fā)酵法生產(chǎn)核苷后經(jīng)提取，精制再經(jīng)磷酸化制取核苷酸。 方法：將核苷懸浮于磷酸三甲酯或磷酸三乙酯中，在冷卻條件下加入氯化氧磷，進行磷酸化。從核苷生成5-核苷酸收率可達90%。 核苷酸、核苷及堿基類似物的生產(chǎn)方法核苷酸、核苷及堿基類似物的生產(chǎn)方法3、直接發(fā)酵法、直接發(fā)酵法 采用營養(yǎng)缺陷型菌株或營養(yǎng)缺陷型兼結(jié)構(gòu)類似物抗性菌株來發(fā)酵大量生產(chǎn)目的核苷或核苷酸。 核酸類藥物的生產(chǎn)實例 DNA的生產(chǎn)技術(shù)的生產(chǎn)技術(shù) 1、來源、來源 選用細胞核含量比例大的生

4、物組織作為提取制備DNA的材料，如胰臟、脾、胸腺等。 2、提取原理、提取原理 細胞內(nèi)的核酸通常是與蛋白質(zhì)形成復(fù)合物核糖核蛋白（RNP）和脫氧核糖核蛋白（DNP），這兩種復(fù)合物在不同電解質(zhì)溶液中的溶解度有較大差異。 核酸類藥物的生產(chǎn)實例 RNA的生產(chǎn)的生產(chǎn) 1、來源：微生物、來源：微生物酵母酵母 2、RNA的提取的提取等電沉淀法等電沉淀法 3、工藝過程、工藝過程 （1）預(yù)處理：壓榨、除水 （2）提取：0.13%NaOH，使細胞壁變性，使核酸從細胞內(nèi)釋放出來 （3）中和、除菌體 （4）分離：等電點法，調(diào)pH2.5，使RNA沉淀下來 洗滌、干燥核酸類藥物的生產(chǎn)實例核酸類藥物的生產(chǎn)實例4.發(fā)酵法生產(chǎn)發(fā)

5、酵法生產(chǎn)高含量高含量RNA酵酵母及其母及其RNA提提取工藝流程取工藝流程ATP制備制備 基本工藝路線：基本工藝路線： 核酸類藥物的生產(chǎn)實例 輔酶輔酶A的生產(chǎn)的生產(chǎn) 核酸類藥物的生產(chǎn)實例1、DNA含量測定含量測定 DNA是磷酸和戊糖通過磷酸二酯鍵形成的長鏈，所以磷酸或戊糖的量正比例于DNA的量，可通過測定磷酸或戊糖的量來測定DNA的量，前者稱為定磷法，后者稱為定糖法。（1）定磷法 磷酸與鉬酸反應(yīng)生成磷鉬酸，再轉(zhuǎn)變?yōu)殂f藍，吸收峰在660nm。 （2）定糖法二苯胺法 670nm 2、RNA含量測定含量測定 （1）定磷法二苯胺法，595nm （2）定糖法地衣二酚（苔黑酚）法 3、核苷酸、核苷含量的測定、核苷酸、核苷含量的測定 紫外分光光度法紫外分光光度法 核酸類藥物的檢測 核酸類產(chǎn)品的重要用途是用作藥物、保健品和食品添中劑。用作食品添加劑的主要是鮮味肌苷酸(IMP)、烏苷酸(GMP)等。 作為保健品，它對促進嬰兒生長發(fā)育，提高成年人和老年人抗病、抗衰老能力均有顯著作用。它作為美容和抗紫外線輻射化妝品也逐漸成為人們