1、核酸類藥物的生產 1、 核酸藥物的分類核酸藥物的分類2、核酸類藥物的生產方法、核酸類藥物的生產方法 3、核酸類藥物的生產實例、核酸類藥物的生產實例 4、核酸類藥物的檢測、核酸類藥物的檢測5、核酸藥物的應用、核酸藥物的應用 主主 要要 內內 容容核酸藥物的分類核酸藥物的分類藥理功能藥理功能：有助于改善機體的物質代謝和能量代謝平衡，加速受損組織的修復，促使機體恢復正常生理功能。如如：DNA、RNA、肌苷、ATP、輔酶A、脫氧核苷酸、肌苷酸等。 獲得獲得：微生物發酵或從生物資源中提取生產。 藥理功能藥理功能：治療病毒、腫瘤、愛滋病的重要藥物，也是產生干擾素、免疫抑制劑的臨床藥物。 如如：三氟代胸苷、

2、疊氮胸苷等。獲得獲得：由自然結構的核酸類物質通過半合成生產。具有天然結構的核酸類物質天然堿基、核苷、核苷酸的類似物或聚合物 核酸類藥物的生產方法 DNA主要存在于細胞核中，RNA主要存在于細胞質中。1、核酸的生產一般采用提取法，即從粉碎、破裂的生物組織細胞中通過一定的方法獲取總DNA或總RNA。 2、獲取大分子核酸的另一方法是人工合成，即利用化學的方法按照設定的核苷酸順序逐一加入形成核酸。現已有核酸合成儀，但合成長度還有一定限制，并且該儀器價格昂貴。因此這種方法一般用于研究，不適合生產。 DNA和和RNA的生產方法的生產方法 核酸類藥物的生產方法 核苷酸、核苷及堿基類似物的生產方法核苷酸、核苷

3、及堿基類似物的生產方法1 1、酶解法、酶解法 核酸類藥物的生產方法 2、半合成法、半合成法 微生物發酵與化學合成并用。 由于發酵法生產核苷的產率很高，因此可由發酵法生產核苷后經提取，精制再經磷酸化制取核苷酸。 方法：將核苷懸浮于磷酸三甲酯或磷酸三乙酯中，在冷卻條件下加入氯化氧磷，進行磷酸化。從核苷生成5-核苷酸收率可達90%。 核苷酸、核苷及堿基類似物的生產方法核苷酸、核苷及堿基類似物的生產方法3、直接發酵法、直接發酵法 采用營養缺陷型菌株或營養缺陷型兼結構類似物抗性菌株來發酵大量生產目的核苷或核苷酸。 核酸類藥物的生產實例 DNA的生產技術的生產技術 1、來源、來源 選用細胞核含量比例大的生

4、物組織作為提取制備DNA的材料，如胰臟、脾、胸腺等。 2、提取原理、提取原理 細胞內的核酸通常是與蛋白質形成復合物核糖核蛋白（RNP）和脫氧核糖核蛋白（DNP），這兩種復合物在不同電解質溶液中的溶解度有較大差異。 核酸類藥物的生產實例 RNA的生產的生產 1、來源：微生物、來源：微生物酵母酵母 2、RNA的提取的提取等電沉淀法等電沉淀法 3、工藝過程、工藝過程 （1）預處理：壓榨、除水 （2）提取：0.13%NaOH，使細胞壁變性，使核酸從細胞內釋放出來 （3）中和、除菌體 （4）分離：等電點法，調pH2.5，使RNA沉淀下來 洗滌、干燥核酸類藥物的生產實例核酸類藥物的生產實例4.發酵法生產發

5、酵法生產高含量高含量RNA酵酵母及其母及其RNA提提取工藝流程取工藝流程ATP制備制備 基本工藝路線：基本工藝路線： 核酸類藥物的生產實例 輔酶輔酶A的生產的生產 核酸類藥物的生產實例1、DNA含量測定含量測定 DNA是磷酸和戊糖通過磷酸二酯鍵形成的長鏈，所以磷酸或戊糖的量正比例于DNA的量，可通過測定磷酸或戊糖的量來測定DNA的量，前者稱為定磷法，后者稱為定糖法。（1）定磷法 磷酸與鉬酸反應生成磷鉬酸，再轉變為鉬藍，吸收峰在660nm。 （2）定糖法二苯胺法 670nm 2、RNA含量測定含量測定 （1）定磷法二苯胺法，595nm （2）定糖法地衣二酚（苔黑酚）法 3、核苷酸、核苷含量的測定、核苷酸、核苷含量的測定 紫外分光光度法紫外分光光度法 核酸類藥物的檢測 核酸類產品的重要用途是用作藥物、保健品和食品添中劑。用作食品添加劑的主要是鮮味肌苷酸(IMP)、烏苷酸(GMP)等。 作為保健品，它對促進嬰兒生長發育，提高成年人和老年人抗病、抗衰老能力均有顯著作用。它作為美容和抗紫外線輻射化妝品也逐漸成為人們